當前位置:偏方大全网 - 藥品查詢 - 如何進行昆蟲標記

如何進行昆蟲標記

1、福爾馬林

福爾馬林在固定組織標本時殺菌能力強,所以防腐

性強,滲透力大,固定得快。永福爾馬林固定精細的解剖標本時,要跟甘油、酒精、石炭酸等混合使用。

固定液常用的濃度是5~10%(根據材料的大小、性質和數量而定)。

保存液常用的濃度是5~10%。用福爾馬林作保存液,效果好且價格低廉。

在配制福爾馬林溶液(固定液或保存液)時,應將37~40%的甲醛作為整個溶質來配。例如配制5%福爾馬林是取市售37~40%甲醛溶液5毫升跟95毫升蒸餾水混合。實際上甲醛含量只有1.9~2%,這樣的配法已成為壹般實驗室常用的慣例。

註意事項:

(1)福爾馬林業在長期貯存中會產生蟻酸,可適量的加入碳酸鈣( )或碳酸鎂( )等堿性物質進行中和。

(2)福爾馬林業作為保存液會慢慢揮發而致使濃度降低,並且福爾馬林液再保存中往往形成多聚甲醛,使浸液變濁,影響觀察。所以,根據壹定保存期的情況,可適當增加福爾馬林液的濃度或更換新液,以防標本變壞。其中如有白色沈澱物,加熱後可使它溶解。

(3)市售的福爾馬林液常帶有酸性,能腐蝕石灰質,因此,最好不用福爾馬林液浸制有石灰質外殼的動物。

2、酒精(乙醇)

酒精也是常用的固定液,它有強烈的殺菌作用,對組織材料的滲透力較大,固定的快。但是,它的脫水作用較強,在高濃度的酒精中容易使材料顯著硬化和收縮。壹般用於固定浸制標本材料,分壹級或二級固定,即70%或50%與70%的酒精。有些小型材料或精細的解剖材料,最好用二級或三級固定,即用50%、70%或50%、60%、70%的酒精,最後再進行保存。從經濟效果來考慮,壹般酒精應跟福爾馬林液等固定液混合使用。

市售的工業用酒精濃度是95%左右,因此用時要重新配制。保存液的濃度通常是70%。

註意事項:

(1)在固定材料時要註意固定的效果,小型材料壹般放在固定液中固定。大型材料必須先往體內註射壹部分固定液,再放入固定液中,防止材料內部腐懷變質。用福爾馬林液固定也是如此。

(2)高濃度的酒精有脫水、脫脂作用。含有多量脂肪或擬脂標本(如腦、脊髓)等都不宜用較高濃度的酒精作保存液。

(3)為了防止酒精使標本硬化,保存壹些精細的材料或解剖標本時,因加入少量甘油,因為甘油具有潤軟組織的作用。

(4)忌跟鉻酸、鋨酸和中鉻酸鉀等氧化劑配合。

3、醋酸

醋酸即乙酸,純醋酸在低於16.7攝氏度時會凝成冰狀固體,所以叫冰醋酸。醋酸能很快穿透組織,因為它不能沈澱細胞質中的蛋白質,組織不會硬化。壹般常跟酒精、福爾馬林、鉻酸等容易引起組織變硬和收縮的液體混合,以起到相互抵消的作用。

醋酸固定液的常用濃度是0.3%~5%。

4、苦味酸

苦味酸是壹種黃色結晶,能溶於水(溶解度是0.9~1.2%)、酒精(溶解度是4.9%)和苯(溶解度是10%)。苦味酸也能沈澱壹切蛋白質,穿透較慢,固定後,組織收縮明顯,但不使組織硬化。

苦味酸固定液可以在100毫升蒸餾水中加入苦味酸約1.5克,制成飽和水溶液。固體苦味酸易爆,長制成飽和水溶液保存。

5、升汞

升汞又叫氯化汞,是白色粉末,以針狀結晶為最純。通常固定時用飽和水溶液,有時也用70%酒精作溶劑,不單獨用作固定劑。升汞的穿透力較弱,通常用於小型材料,對蛋白質有強烈的沈澱作用,硬化程度中等。

固定液用飽和溶液,濃度約為7%。

6、卡爾氏(Carl's)液

配方

95%酒精 170毫升 蒸餾水 280毫升

福爾馬林 60毫升 冰醋酸 20毫升

冰醋酸要在臨用前加入。

這時極好的昆蟲保存液,常用來殺死和保存小型、身體柔軟的種類入蟎、蜈蚣、馬陸等。在這溶液裏加入少量甘油,能防止蟲體變脆。

7、卡諾氏(Carnoy's)液

配方

純酒精 6份 冰醋酸 1份

氯仿 3份

這種固定液能固定細胞質和細胞核,尤其適宜於固定染色體,所以多用於細胞學的質片,還用來固定腺體、淋巴組織以及原生動物的胞殼等。這種固定液穿透得快,因此壹般小塊組織固定20~40分鐘,大型材料不超過3~4小時。固定後用95%或純酒精洗滌,換液兩次,移到石蠟中或用80%酒精保存。

8、吉爾桑氏(Gilson)液

配方

60%酒精 50毫升 冰醋酸 2毫升

80%硝酸 7.5毫升 升汞 10克

蒸餾水 440毫升

這是常用的固定液,適用於肉質菌類,特別是柔軟膠質狀的材料如木耳等,也廣泛用於無脊椎動物和壹般組織和蛙胚的固定。固定時間18~20小時,然後用50%酒精沖洗材料,除去升汞。如果用水沖洗,會使材料膨脹。混合液保存24小時後失效。

9、福爾馬林--醋酸--酒精溶液(FAA)液

配方

50%酒精 85毫升 福爾馬林 10毫升

冰醋酸 5毫升

這種固定液適用於固定壹般植物莖、葉組織,昆蟲和甲殼類動物。液組織在這溶液裏固定12小時,木質化組織要固定1周,材料也可在此液中長期保存。固定後的材料放在50%酒精中沖洗1~2次。

10、克來寧堡氏(Kleinenberg's)液

配方

在20%硫酸水溶液內加入苦味酸,直到飽和。

這種固定液適用於雞胚的固定,也用於許多小型海洋生物的固定。

11、包因氏(Bouin's)液

配方

苦味酸飽和水溶液 75毫升 冰醋酸 5毫升

福爾馬林 25毫升

這是常用的良好固定劑,滲透迅速,固定均勻,組織收縮少,染色後能顯示壹般的微細結構。壹般動物組織、無脊椎動物的卵和幼蟲以及壹般組織學、胚胎學的材料,如植物組織的根尖和胚囊都可用它來固定。壹般組織固定24~48小時,小塊組織固定4~16小時,動物材料能在這種固定液中長期保存。固定後,動物材料用70%酒精沖洗凈苦味酸,到無黃色為止(用酒精沖洗時,加幾滴氨水,可加快除去黃色);植物材料用20%酒精沖洗幾次。

12、紹丁氏(Schaudinn's)液

配方

甲液 升汞飽和水溶液 66毫升

95%酒精 33毫升

乙液 冰醋酸 1毫升

甲、乙液要在臨用前混合。

這種固定液適用於固定有鞭毛的原生動物、植物的精子和遊動孢子等。材料如制作塗布裝片,可在40攝氏度下固定10~20分鐘。

13、眼球固定液

配方

丙酮 40毫升 冰醋酸 1.5毫升

升汞 2克 甲醛 10毫升

蒸餾水 40毫升

這種固定液適用於眼球的固定,並可在固定液中長期保存。

14、納瓦興氏(Nawaschin's)液

配方

甲液 鉻酸 1.5克 冰醋酸 10毫升

蒸餾水 90毫升

乙液 福爾馬林 40毫升 蒸餾水 60毫升

臨用前將等量甲、乙液混合。

高等植物有絲分裂材料適宜在這種固定液裏固定或長期保存。

15、綠色標本保存液

配方壹

硫酸銅 5克 水 95毫升

這種保存液適用於綠色植物和壹切植物綠色部分的保存。植物放入硫酸銅液後,由綠變黃,再由黃變綠。這時取出材料,用清水漂洗幹凈,浸在5%福爾馬林液內長期保存。

配方二

硫酸銅 0.2克 95%酒精 50毫升

福爾馬林 10毫升 冰醋酸 5毫升

水 35毫升

先把硫酸銅溶於水中,然後加入配方中的其他組分。綠色標本能長期的貯存在該液中。

配方三

醋酸銅 15~30克 50%醋酸 100毫升

在50%醋酸中逐漸加入醋酸銅,直到飽和。適用時取原液1份,加水4份,即成稀釋的硫酸銅溶液。

這種保存液適用於表面有蠟質、蛙質、質地較硬的綠色植物保色。加熱稀釋到醋酸銅溶液,放入植物,輕輕翻動,到植物由綠轉黃再轉綠色時取出植物,用清水漂洗後,浸入5%福爾馬林液內保存。

16、紅色標本保存液

配方壹

甲液 硼酸 3克 福爾馬林 4毫升

水 400毫升

乙液 亞硫酸 2毫升 硼酸 10克

水 488毫升

把紅色的果實浸在甲液裏1~3天,等果實由紅色轉深棕色時取出,移到乙液裏保存,同時在果實內註入少量乙液。

配方二

氯化鋅 2份 福爾馬林 1份

甘油 1份 水 40份

先把氯化鋅溶解在水裏,然後加入配方中其他組分。溶液如果渾濁而有沈澱,應過濾後使用。紅色果實能在此液中保存。

17、黃色標本保存液

配方壹

甲液 硫酸銅 5克 水 95毫升

乙液 6%亞硫酸 30毫升 甘油 30毫升

95%酒精 30毫升 水 900毫升

先把植物標本在甲液中浸1~2天,取出洗凈後,浸入乙液中保存,同時在果實內註入少量乙液。

配方二

6%亞硫酸 568毫升 80%酒精 568毫升

水 450毫升

植物材料能在這種保存液中長期保存。

18、紫色標本保存液

配方壹

95%酒精 20毫升 福爾馬林 20毫升

水 60毫升

使用時,取1份原液加9份水稀釋,植物材料能在這溶液中保存。 配方二

食鹽飽和水溶液 30毫升 水 175毫升

福爾馬林 20毫升 甘油 少量

植物材料能在這溶液中保存。

19、白色標本保存液

配方壹

甲液 5%硫酸銅溶液

乙液 1~4%亞硫酸溶液

全白色植物材料能浸在乙液中保存。雜有綠色的白色植物材料先浸在5%硫酸銅溶液內1~3天,用清水漂洗後浸在乙液中保存。

配方二

氯化鋅 32克 95%酒精 125毫升

水 1000毫升

把氯化鋅溶於水中,再加入酒精。植物材料能在這溶液中保存。

20、綠色幼蟲保存液

甲液 福爾馬林 4毫升 醋酸銅 1克

硝酸鉀 1克 水 100毫升

乙液 甘油 20毫升 醋酸鉀 10克

福爾馬林 1毫升 水 100毫升

先把昆蟲幼蟲放在80攝氏度熱水中燙死,曬幹後放在甲液中固定1星期左右,最後放入稀釋壹倍的乙液中保存。

配方二

甲液 95%酒精 90毫升 甘油 2.5毫升

福爾馬林 2.5毫升 冰醋酸 2.5毫升

氯化銅 3克

乙液 冰醋酸 5毫升 福爾馬林 4毫升

水 100毫升

將絕食1~2天的幼蟲,用註射器從肛門向體內註射甲液,12小時後轉入乙液內保存,約20天更換1次乙液。

21、黃色幼蟲保存液

甲液 苦味酸飽和液 10毫升 冰醋酸 5毫升

福爾馬林 2.5毫升

乙液 與綠色幼蟲保存液配方二乙液相同

用註射器從幼蟲肛門內註入甲液,12小時後轉入乙液內保存。

22、紅色幼蟲保存液

硼砂 2克 50%酒精 100毫升

昆蟲幼蟲能在這溶液中保存。

23、動物內臟原色保存液

甲液 福爾馬林 200毫升 硝酸鉀 15克

醋酸鉀 30克 水 1000毫升

乙液 甘油 200毫升 醋酸鉀 100克

麝香草酚 2.5克 水 1000毫升

先把材料放在甲液內固定,固定時間根據材料的大小而定,壹般需1~5天。當材料失去自然色澤而呈暗褐色時,用手輕輕擠壓,直到沒有淡紅色血水流出時,取出材料,用清水沖洗,在浸在85%酒精中3~24小時(不能太久,否則易破壞色素),到血色恢復後,浸在乙液中保存。

培養基

1、細菌培養基

配方壹 牛肉膏瓊脂培養基

牛肉膏 0.3克 蛋白腖 1.0克

氯化鈉 0.5克 瓊脂 1.5克

水 1000毫升

在燒杯內加水100毫升,放入牛肉膏、蛋白腖和氯化鈉,用蠟筆在燒杯外作上記號後,放在火上加熱。待燒杯內各組分溶解後,加入瓊脂,不斷攪拌以免粘底。等瓊脂完全溶解後補足失水,用10%鹽酸或10%的氫氧化鈉調整pH值到7.2~7.6,分裝在各個試管裏,加棉花塞,用高壓蒸汽滅菌30分鐘。

配方二 馬鈴薯培養基

取新鮮牛心(除去脂肪和血管)250克,用刀細細剁成肉末後,加入500毫升蒸餾水和5克蛋白腖。在燒杯上做好記號,煮沸,轉用文火燉2小時。過濾,濾出的肉末幹燥處理,濾液pH值調到7.5左右。每支試管內加入10毫升肉湯和少量碎末狀的幹牛心,滅菌,備用。

配方四 根瘤菌培養基

葡萄糖 10克 磷酸氫二鉀 0.5克

碳酸鈣 3克 硫酸鎂( ) 0.2克

酵母粉 0.4克 瓊脂 20克

水 1000毫升 1%結晶紫溶液 1毫升

先把瓊脂加水煮沸溶解,然後分別加入其他組分,攪拌使溶解後,分裝,滅菌,備用。

2、放線菌培養基

配方壹 澱粉瓊脂培養基(高氏培養基)

可溶性澱粉 2克 硝酸鉀 0.1克

磷酸氫二鉀 0.05克 氯化鈉 0.05克

硫酸鎂 0.05克 硫酸亞鐵 0.001克

瓊脂 2克 水 1000毫升

先把澱粉放在燒杯裏,用5毫升水調成糊狀後,倒入95毫升水,攪勻後加入其他藥品,使它溶解。在燒杯外做好記號,加熱到煮沸時加入瓊脂,不停攪拌,待瓊脂完全溶解後,補足失水。調整pH值到7.2~7.4,分裝後滅菌,備用。

配方二 面粉瓊脂培養基

面粉 60克 瓊脂 20克

水 1000毫升

把面粉用水調成糊狀,加水到500毫升,放在文火上煮30分鐘。另取500毫升水,放入瓊脂,加熱煮沸到溶解後,把兩液調勻,補充水分,調整pH值到7.4,分裝,滅菌,備用。

3、真菌培養基

配方壹 薩市(Sabouraud's)培養基

蛋白腖 10克 瓊脂 20克

麥芽糖 40克 水 1000毫升

先把蛋白腖、瓊脂加水後,加熱,不斷攪拌,待瓊脂溶解後,加入40克麥芽糖(或葡萄糖),攪拌,使它溶解,然後分裝,滅菌,備用。

本培養菌是培養許多種類真菌所常用的。

配方二 馬鈴薯糖瓊脂培養基

把馬鈴薯洗凈去皮,取200克切成小塊,加水1000毫升,煮沸半小時後,補足水分。在濾液中加入10克瓊脂,煮沸溶解後加糖20克(用於培養黴菌的加入蔗糖,用於培養酵母菌的加入葡萄糖),補足水分,分裝,滅菌,備用。

把這培養基的pH值調到7.2~7.4,配方中的糖,如用葡萄糖還可用來培養放線菌和芽孢桿菌。

配方三 黃豆芽汁培養基

黃豆芽 100克 瓊脂 15克

葡萄糖 20克 水 1000毫升

洗凈黃豆芽,加水煮沸30分鐘。用紗布過濾,濾液中加入瓊脂,加熱溶解後放入糖,攪拌使它溶解,補足水分到1000毫升,分裝,滅菌,備用。

把這培養基的pH值調到7.2~7.4,可用來培養細菌和放線菌。

配方四 豌豆瓊脂培養基

豌豆 80粒 瓊脂 5克

水 200毫升

取80粒幹豌豆加水,煮沸1小時,用紗布過濾後,在濾液中加入瓊脂,煮沸到溶解,分裝,滅菌,備用。

4、食用菌菌種培養基

配方壹 馬鈴薯-蔗糖--瓊脂培養基

20%馬鈴薯煮汁 1000毫升

蔗糖 20克 瓊脂 18克

把馬鈴薯洗凈去皮後,切成小塊。稱取馬鈴薯小塊200克,加水1000毫升,煮沸20分鐘後,過濾。在濾汁中補足水分到1000毫升,即成20%馬鈴薯煮汁。在馬鈴薯煮汁中加入瓊脂和蔗糖,煮沸,使它溶解後,補足水分,分裝,滅菌,備用。使用該培養基對pH值要求不嚴格,可以不測定。

配方二 綜合馬鈴薯培養基

20%馬鈴薯煮汁 1000毫升

磷酸二氫鉀 3克 硫酸鎂 1.5克

葡萄糖 20克 維生素 10毫克

瓊脂 18克

先配制20%馬鈴薯煮汁,方法同上。在煮汁中加入上述各種組分,加熱溶解後補足水分,調整pH值到6。分裝,滅菌,備用。

該培養基用於培養和保存靈芝、平菇、香菇等食用菌菌種。

  • 上一篇:藥品管理法》的立法宗旨
  • 下一篇:化妝品出口必須要做MSDS報告嗎
  • copyright 2024偏方大全网