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金黃色葡萄球菌檢驗

(1)血漿凝固酶試驗:血漿凝固酶由金黃色葡萄球菌產生,其致病性與壹種侵襲性酶有關,其作用是使血漿纖維蛋白在細菌表面沈積凝固,以阻礙吞噬細胞的吞噬作用。血漿凝固酶分為結合型和遊離型。前者與細菌的細胞壁結合,可直接作用於血漿中的纖維蛋白原,將其轉化為纖維蛋白,包圍細菌並形成凝塊。另壹方面,遊離型血漿凝固酶在產生後分泌到細菌外部,不能直接作用於纖維蛋白原,但可以激活血漿中的纖溶酶原,將其轉化為凝血酶,凝血酶又作用於纖維蛋白原,將其轉化為纖維蛋白。因此,具體的測量方法分為兩種:玻片法和試管法。

玻片法將待測菌落用生理鹽水乳化於玻片上,經10~20S確認無自凝現象後,用接種環取壹環人或兔血漿,與乳化後的菌液混合,出現凝集者為陽性,另壹組生理鹽水為陰性對照。

試管法吸取0.5mL兔血漿與0.5mL金黃色葡萄球菌肉浸肉湯24小時培養液充分混合,置於37℃培養,每半小時觀察壹次,連續觀察6小時,出現凝集者,即小試管傾斜或倒置時內容物不流動,判為陽性。

(2)耐熱核酸酶試驗:在沸水浴中肉湯培養24小時15min,用接種環線刺於甲苯胺-DNA平板上,35℃培養24小時,在刺線周圍出現淡粉紅色者為陽性。此試驗為金黃色葡萄球菌陽性。

(3)甘露醇發酵試驗 金黃色葡萄球菌能發酵甘露醇。

(4)金黃色葡萄球菌乳膠凝集試驗(Staphaurex Latex Agglutination Test)是壹種快速、簡單的商品化直接凝集試驗,用於鑒定金黃色葡萄球菌。其基本原理是在壹張紙上滴加壹滴包裹有纖維蛋白原和 IgG 抗體的聚苯乙烯乳膠,然後用接種環挑取待鑒定菌株的新鮮培養物加入混合液中,若出現凝集現象則為陽性。

5.生化鑒定如上所述,與其他凝固酶陽性葡萄球菌鑒別要註意要點:PYR(吡咯烷酮-β-萘甲酰胺試驗陰性;VP 試驗陽性;鳥氨酸脫羧酶試驗陰性。

6、免疫學方法:酶聯免疫吸附試驗和對流免疫電泳可檢測金黃色葡萄球菌的膦甲糖苷抗體。

7.分子生物學方法包括 PFGE 脈沖場凝膠電泳和酶聯免疫電泳。

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