2.無菌工作區應保持清潔、寬敞。必要的物品，如試管架、移液管吸管或移液管盒可臨時放置，其他實驗用品用完後應移走，以利空氣流通。實驗用品在放入無菌工作臺前應先用 70% 的乙醇擦拭。實驗操作應在臺面無菌區的中央進行，而不是在邊緣的非無菌區。
3.小心使用無菌實驗器皿，避免汙染。不要接觸移液管的尖端或容器口，也不要在打開的容器上方操作實驗。容器打開後，用手握住瓶蓋和瓶身，傾斜約 45°角取用，盡量不要將瓶蓋放在桌面上，瓶口朝上。
4.工作人員應註意自身安全，實驗前應穿戴實驗服和手套。對於人或病毒感染的細胞株，應特別小心處理，並選擇相應級別的無菌操作臺（至少二級）。避免產生氣溶膠，小心使用 DMSO 和 TPA 等有毒藥物，避免使用鋒利的針頭。
5、定期檢測以下項目：5.1 CO2氣瓶的CO2壓力 5.2 CO2培養箱的CO2濃度、溫度以及水盤是否被汙染（水盤的水用無菌水，每周更換壹次）。5.3 無菌操作臺上的氣流壓力，定期更換紫外線燈和 HEPA 過濾膜、前置過濾器（300 小時/前置過濾器，3000 小時/HEPA）。3000 小時/HEPA）。6.水槽中可添加消毒劑（Zephrin1:750），定期更換水槽中的水
6、粉末培養基配制好後（含血清），壹般在4度下盡量不要超過1個月，如在-20度下存放時間可以長些，但最好不要超過3-4個月，可能是對於永生化細胞株來說要求不太高，細胞比較嬌嫩，不宜放置太久。
7、打開紫外線照射臺，然後將培養基、酶、DHANKS液即放到室外讓其自然升溫。這樣40分鐘後，溫度也就升高了。也有不少人將其放入 37 度的水浴中加熱。壹定要註意水浴鍋的衛生，有的水浴鍋常年不清洗，裏面很臟，外面的瓶子上很容易吸附很多細菌。所以使用時也壹定要註意換水。從水槽出來後，最好找個毛巾把上面的水擦幹。