維生素 C 的測定方法？滴定分析法？
滴定法測定維生素C的原理主要是利用維生素C的氧化還原性，通過化學反應，選擇合適的指示劑，根據樣品溶液顏色的變化確定終點。常用的方法有 2,6-二氯靛酚滴定法（又稱染料法）和碘量法。其中，2,6-二氯靛酚滴定法的基本原理是：在酸性環境中，紅色的2,6-二氯靛酚與維生素C反應，被還原成無色的酚亞胺，以2,6-二氯靛酚染料為滴定劑，以滴定劑本身顏色的變化為終點，當溶液中的維生素C剛剛被全部氧化，30s內不褪色時，溶液呈淺紅色，即為滴定終點。滴定終點、反應式如圖 2 所示。滴定分析法快速、準確、方便，可用於測定水果中少量的維生素 C。但當樣品中含有Fe(II)、Sn(II)、Cu(I)、SO2、S2O32
等離子和富含單寧酸、白樺脂等物質時，由於這些物質本身也具有還原性，與氧化劑也會發生氧化還原反應，會使測定結果不準確。因此，滴定分析法通常只適用於測定不含 L-脫氫抗壞血酸（DHA）、花青素含量低和不含還原離子的樣品。
2.光度法？
光度法測定樣品中維生素C含量的原理大多是利用顯色劑與維生素C之間的氧化還原反應，建立標準曲線，通過測定溶液的吸光度來測定樣品中維生素C的含量。但由於總抗壞血酸的局限性，例如 GB/T12392-1990 只能測定脫氫抗壞血酸。至於還原型抗壞血酸的測定，GB5009.159-2003采用抗壞血酸與固體藍鹽B(?快?藍?鹽?B)反應生成黃色草酰肼-2-羥基丁內酯衍生物，在最大吸收波長420 nm處測吸光度進行檢測。使用亞甲基藍褪色光度法也可以很容易地測定維生素 C，而且具有良好的選擇性。抗壞血酸對 Cu(II)有特異的還原作用，在 Cu(II)存在的情況下，抗壞血酸可迅速將 Cu(II) 還原成 Cu(I)，Cu(I)與新烏頭原堿（2,9-二甲基苯-1,10-菲羅啉）絡合，生成壹種黃色的水溶性物質，用分光光度法測定。這種方法可靠、可重復，能準確測定維生素 C 的含量。但是，如果待測液體本身有顏色，吸光度就會受到影響，進而影響結果的準確性，而且測定維生素 C 的含量需要較長的時間。
3.電化學法？
電化學分析法是利用維生素 C 在電極上的氧化反應進行測定。維生素 C 在電極上失去 "2 "個電子和 "2 "個氫離子，被氧化形成脫氫抗壞血酸，脫氫抗壞血酸經過不可逆的水合作用形成脫氫葡萄糖胺。常用的工作電極有金屬電極、石墨電極等，但維生素 C 在這類電極上的氧化需要較高的氧化電位，在檢測過程中容易受到其他物質的幹擾。近年來，利用改性電極降低氧化電位受到研究人員的廣泛重視，如納米粒子金改性氧化鈦薄膜電極（Au/Ti?O2/Ti）、聚吡咯改性分子印跡（MIP）石墨電極等，大大提高了檢測方法的靈敏度和選擇性。電化學分析法具有分析速度快、操作簡便、成本低、試劑少等優點。它還可以與液相色譜法、毛細管電泳生物傳感器等結合使用，提高測定方法的靈敏度。其缺點是對樣品前處理的要求較高，操作較為繁瑣。化學發光法（CL）？化學發光法（CL）是利用維生素 C 與高錳酸鉀、K2Cr2O7、Fe 或鐵氰化物等發生氧化反應，並與盧原子吸收光譜法（AAS）間接測定維生素 C 含量的方法。Kato 等人通過在維生素 C 中加入葉綠酸鐵發光體系並淬滅發光來測定痕量維生素 C。化學發光法具有操作簡便、線性範圍寬、靈敏度高等優點，是痕量分析的有效方法。 5. 流動註射分析法（FIA） 流動註射分析法（FIA）是以有色（或無色但有紫外吸收）溶液為載體，當樣品註入載體時，發生化學反應，使載體溶液的顏色變淺（或紫外吸收減少）。如果載液流的吸光度變化與待測物的質量有壹定的函數關系，即可以對待測樣品進行量化。流動註射法具有試劑用量少、重現性好、自動進樣、占用空間小等優點，特別適用於大量樣品的測定。尤其適合大量樣品中目標分析物的測定。近年來，利用 FIA 技術測定維生素 C 引起了許多研究人員的關註，實現了維生素 C 的快速、自動分析和測定。流式進樣系統可與光譜分析、電化學分析、色譜分析和熒光分析相結合，與傳統方法相比，大大提高了靈敏度和準確度。液相色譜法（HPLC）？液相色譜法（HPLC）因其靈敏度高、重現性好、操作簡便、可實現多種維生素的同時測定等優點，成為近年來應用最廣泛的維生素 C 分離測定方法。根據樣品前處理方法、色譜條件和檢測器的不同，高效液相色譜法測定維生素 C 含量的方法也不盡相同。常用於測定維生素 C 的色譜柱主要是反相色譜柱，檢測器包括紫外（UV）或二極管陣列（PDA）檢測器和電化學（EC）檢測器。例如，Maia 等人以 0.2%的偏磷酸-甲醇-乙腈（90:8:2）為流動相，以 C18 色譜柱為色譜柱，在 254 納米波長下測定藥品中的維生素 C 含量。Quiros 等人以 0.1% (V/V) 的甲酸溶液為流動相，以 Mediterranea.sea.18 為色譜柱，在 254 納米波長下測定果汁和飲料中的維生素 C 含量。由於流動相通常需要使用含有壹定離子強度的緩沖溶液，因此基本上無法使用液相色譜-質譜法測定維生素 C。原子吸收光譜法（AAS）？目前已有壹些報道，大致分為兩類：沈澱法和陽離子樹脂交換法。沈澱法的原理是：在酸性介質中，維生素 C 與 Cu 和 SCN 反應生成壹價銅鹽 CuCNS（沈澱），分離後用原子吸收法測定銅的含量，從而間接測定維生素 C 的含量]。陽離子樹脂交換法是將高氧化態金屬離子或氧化物通過維生素 C 交換柱表面的?(Fe3+、MnO2) 還原成低氧化態金屬離子 (Fe2+、Mn?)，通過流動註入在陽離子交換