壹、幾種類型的缺氧
實驗目的
1．在動物身上復制低張性、血液性缺氧，並了解缺氧的分類。
2．觀察缺氧對呼吸的影響和血液顏色的變化。
實驗原理
氧為生命活動所必須。當組織得不到充足的氧，或不能充分利用氧時，組織的代謝、功能，甚至形態結構都可發生異常變化，這壹病理過程稱為缺氧。本實驗將小白鼠放入密閉的缺氧瓶內，小白鼠不斷消耗氧氣，瓶內氧分壓不斷下降，復制低張性缺氧。CO與Hb結合形成HbCO，使血紅蛋白失去攜帶氧的能力，本實驗將CO通入缺氧瓶內，復制CO中毒性缺氧。亞硝酸鈉可使二價鐵的血紅蛋白氧化成高鐵血紅蛋白，高鐵血紅蛋白與羥基牢固結合而失去攜帶氧的能力，本實驗將亞硝酸鈉註射入小白鼠腹腔，復制亞硝酸鈉中毒性缺氧。
材料與方法
壹、實驗對象：小白鼠
二、藥品和器械：缺氧瓶、註射器、天平、剪刀、鈉石灰、5%亞硝酸鈉、1%美蘭、生理鹽水。
三、觀察指標：觀察動物的壹般情況，呼吸頻率(次/10秒)及深度，皮膚和口唇的顏色。
四、方法與步驟
(壹)低張性缺氧
1．取鈉石灰少許(約5克)及小白鼠壹只放入缺氧瓶內。觀察動物的壹般情況，呼吸頻率(次/10秒)，深度，皮膚和口唇的顏色，然後塞緊瓶塞，記錄時間，然後每3分鐘重復觀察上述指標壹次(如有其他變化則隨時記錄)直到動物死亡為止。
2．動物屍體留待2、3實驗做完後，再依次打開腹腔，比較血液或肝臟顏色。
(二)CO中毒性缺氧
1．取小白鼠壹只放入缺氧瓶中，觀察其正常表現。
2．用註射器抽CO 2~4ml，緩慢註入瓶中。
3．觀察指標與方法同(壹)。
(三)亞硝酸鈉中毒性缺氧
1．取體重相近的兩只小白鼠，觀察正常表現後，分別向腹腔註入5％亞硝酸鈉0.3ml，其中壹只註入亞硝酸鈉後，立即再向腹腔內註入1％美蘭0.3ml，另壹只再註入生理鹽水0.3ml。
2．觀察指標與方法同(壹)。
註意事項：
1．低張性缺氧實驗，缺氧瓶壹定要密閉。
2．小白鼠腹腔註射，應稍靠左下腹，勿損傷肝臟，但也應避免將藥物註入腸腔或膀胱。
3．CO已於實驗前置備完畢，裝於貯氣袋。
二、影響缺氧耐受性的因素
實驗目的
了解條件因素在缺氧發生中的重要性和臨床應用冬眠和低溫治療的實用意義。
實驗原理
病因為疾病發生所必須並決定疾病的特異性的因素。疾病發生還取決於機體所處的內部與外部條件，條件可通過增強或削弱病因的致病性，改變機體對疾病病因的耐受性，促進或延緩疾病的發生。本實驗通過改變機體的內部與外部條件，觀察小白鼠對缺氧耐受性的變化。
材料與方法
壹、實驗對象：小白鼠
二、器械和藥品：缺氧瓶、測氧儀、天平、註射器、溫度計、燒杯、鈉石灰、1%咖啡因、0.25%氯丙嗪、生理鹽水。
三、觀察指標：存活時間、耗氧量、耗氧率。
四、方法與步驟
(壹)環境溫度變化對缺氧耐受性的影響
1．取缺氧瓶三只，各放入鈉石灰少許。
2．取500毫升燒杯兩只，壹只加入碎冰塊和冷水，將杯內水溫調到0~4℃，另壹只加入熱水，將溫度調到40~42℃。
3．取體重相近的小白鼠三只，稱重後分別裝入缺氧瓶中，其中的兩只分別放於盛有冰水或熱水的燒杯內，另壹只置於室溫中，塞緊瓶塞後開始計時。
4．持續觀察各鼠在瓶中的活動情況，待小白鼠死亡後，計算存活時間，並立即從燒杯內取出缺氧瓶，置於室溫中平衡15分鐘。
5．用測氧儀測定瓶內空氣的剩余氧濃度，方法見附錄1。或用測耗氧量裝置測定總耗氧量(A)，方法見附錄2。然後再用測瓶內氣體容積裝置測出瓶內空氣的容積(，方法見附錄3。
6．如有血氣分析儀，可直接測定瓶內空氣的氧含量。
7．根據小白鼠體重(W)，存活時間，總耗氧量 ，計算小白鼠耗氧率(R)ml/g/min。
計算方法：
(1)由測氧儀測得瓶內空氣的剩余氧濃度(C)和用測瓶內氣體容積裝置測出瓶內空氣的容積(，求總耗氧量(A)
A(ml)＝(20.94%-C)× B
(2)小白鼠耗氧率(R) R(ml/g/min)=A÷體重(克)÷存活時間(分)
(二)機體狀況不同對缺氧耐受性的影響
1．取體重相近的小白鼠 三只，分別作如下處理：
甲鼠，腹腔註射1%咖啡因0.1ml/10g體重。
乙鼠，腹腔註射0.25%氯丙嗪0.1ml/10g體重，待動物安靜後，全身浸入冰水5－10分鐘。
丙鼠，腹腔註射生理鹽水0.1ml/10g體重
2．約15-20分鐘後，將三只小白鼠分別放入有鈉石灰的缺氧瓶內，密閉後開始計時
3．以下步驟同壹的5、6、7步驟。
實驗結果
繪制三線表填入所觀察各項指標的數據。
註意事項：
1．必須保證缺氧瓶完全密閉。
2．測剩余氧濃度前，作高、低溫實驗的兩只缺氧瓶必須放在室溫平衡15分鐘左右。
要求與思考
學生課前應復習《病理生理學》“缺氧”的內容，依據缺氧的理論和實驗內容，聯系實際討論第十章病例壹、病例二，各實驗組推薦壹名學生代表作課堂發言。
作業題
1．低張性缺氧、血液性缺氧對呼吸有何影響？為什麽？
2．低張性缺氧、CO中毒性缺氧、亞硝酸鈉中毒性缺氧血液顏色有何不同？為什麽？
3．美蘭為什麽使亞硝酸鈉中毒小白鼠存活時間延長？
4．當外界環境溫度逐漸降低時，小白鼠對缺氧的耐受性有何變化？為什麽？
5．神經系統處於興奮或抑制狀態對小白鼠的缺氧耐受性產生何種影響？為什麽？
附錄1 氧電極法測定瓶內空氣氧濃度(％)的方法
1.原理
氧電極法測定的原理是利用溶解的氧分子在壹定的極化電壓下，被還原而產生電流。
O2+2H++2e- H20
當測定系統將電極與被測溶液用僅能通過氣體分子的聚乙烯薄膜隔開時，在壹定極化電壓下，電極中測出的電流量將只反映被測系統中彌散過來的氧分子，並與被測溶液中的氧分壓成正比。
2．方法與步驟
(1)按測氧儀說明書安裝電極，檢查電池電壓，調整極化電壓和調節零點。
(2)將已裝好的氧電極插入儀器的“輸入”孔，進行電極的靈敏度調節；先用新鮮配制的無氧水，以緩慢的速度從電極進樣管，註入樣品池內，校正零點。然後用已知氧濃度的混合氣體，調節靈敏度至刻度。重復以上操作1～2次，使重現性誤差小於讀數誤差的2.5％ 。
(3)將缺氧瓶塞上的壹個橡皮管同測瓶內空氣容積裝置相接，裝置內的水即因負壓而進入缺氧瓶內。然後將另壹橡皮管同測氧儀的電極進樣管相連，並從電極出樣管緩慢抽氣，使缺氧瓶內氣體緩慢進入測氧儀的測量池。待測氧儀的表頭指針穩定後，直接讀出瓶內空氣剩余氧濃度(C)。
附錄2 用測耗氧量裝置測定小白鼠的總耗氧量
1．原理
小白鼠在密閉的缺氧瓶內，不斷消耗氧氣，而產生的CO2又被鈉石灰吸收，瓶內氧分壓逐漸降低而產生負壓，當缺氧瓶與測耗氧量裝置相連時，裝置的移液管內液面因瓶內負壓而上升，量筒內液面下降的毫升數即為消耗氧的總量。
2．方法與步驟
(1)向量筒內充水至刻度，然後將玻璃管接頭與缺氧瓶塞上的壹個橡皮管相連。
(2)打開上述橡皮管上的螺旋夾，待移液管內水平面上升穩定後，從量筒上讀出液面下降的毫升數，即為小白鼠的總耗氧量(A)。
附錄3 測缺氧瓶內空氣容積的方法
(1)將測瓶內空氣容積裝置的全部系統內充滿水，並向量筒內加水至刻度。
(2)將缺氧瓶塞上的兩橡皮管全部打開，其中之壹與裝置相連。
(3)裝置內水因虹吸作用進入缺氧瓶內，待瓶內全部充滿水時立即夾緊裝置上的彈簧夾。
(4)讀出量筒上液面下降的毫升數，即為缺氧瓶內空氣的容積。