蜘蛛是節肢動物。
蜘蛛的長度從0.05毫米到60毫米不等。身體分為胸部和腹部。有些種類的頭胸後部有胸甲(有些沒有)，頭胸前端通常有8只單眼(6、4、2、0)，排列成2 ~ 4排。腹面有大胸板，胸板前方兩額葉間有下唇。腹部不分段，腹柄由1腹段(第7體段)進化而來。腹部多為圓形或橢圓形，有的有各種形狀奇特的突起。腹腹旋器由附肢進化而來，有8個原始種，位置稍靠前；大多數物種有6個吐絲器，位於身體後端的肛門前方；有的物種有四個吐絲器，吐絲器上有許多紡管，與各種絲腺相連，絲就是從紡管中紡出來的。感覺器官包括眼睛、各種感覺毛、聽覺毛、七弦琴和跗骨。
蜘蛛周身有幾丁質外骨骼，身體明顯分為頭、胸、腹，往往從腹部第壹腹節開始用壹根細柄相連，沒有尾節，也沒有尾鞭。蜘蛛沒有復眼，頭部和胸部有6對附肢。第壹對和第二對屬於頭附肢，其中第壹對多為2節，基部膨大部分為爪，末端漸細部分為爪，齒為管狀。爪部或頭部、胸部有毒腺，分泌的毒液來源於此。第二對附肢叫做腳須，形狀像行走的腳，但只有六個關節。基部關節在嘴附近形成顎狀突起，可以幫助取食，而雌性蜘蛛的足須變化不大，而雄性蜘蛛的足須則特化為生殖輔助器官，具有儲存和傳遞精子的結構，稱為觸肢器。第三對至第六對附肢為行走足，由七節組成，末端有爪，爪下有壹簇剛毛，適合在光滑物體上爬行。
大部分蜘蛛都有毒腺，有爪和爪兩種活動方式。大部分的穴居蜘蛛都是上下移動，而在地面捕食，在空中結網的蜘蛛則像鉗子壹樣掃來掃去。沒有觸須，沒有翅膀，沒有復眼，只有壹只眼睛，通常是8只眼睛，但也有6、4或2只眼睛，有些甚至沒有眼睛。就眼睛的顏色和功能而言，可分為晝和夜。
蜘蛛的口器由爪肢、觸肢的顎葉、上唇和下唇組成，具有毒殺、捕捉、粉碎食物和吮吸汁液的功能。
有些蜘蛛的跗骨爪下有壹簇簇黏糊糊的毛，有能力讓蜘蛛在垂直光滑的物體上爬行。結網的蜘蛛在飛節頂端附近有幾個爪狀的刺，叫做二級爪。
大多數蜘蛛的腹部是不分節的。外生殖器的有無是鑒別雌性物種的重要特征。在腹部的中間或後端有壹個特殊的旋轉器。三對旋轉器根據落地位置分別稱為前、中、後旋轉器。紡紗機的頂部設置有薄膜紡管，薄膜紡管被毛皮包圍。不同的蜘蛛用不同的紡絲管紡出不同種類的絲。旋轉管的旋轉器也是壹個旋轉器官。比如鱗翅目的紡紗機上就有966。通過紡管抽出體外的絲腺有8種，隨著蜘蛛的生長和蛻皮，絲腺的大小和數量都在增加。蜘蛛絲是壹種骨蛋白，非常粘，有韌性，有彈性，吐絲後暴露在空氣中會變硬。