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內毒素檢測需要什麽環境?

內毒素測定方法包括:

凝膠法

動態濁度法

終點濁度法

動態顯色方法

結束顏色方法

凝膠法系統是利用鱟試劑與內毒素發生凝集反應的原理,對內毒素進行定性或半定量檢測的方法。凝膠鱟試劑常見規格為0.1ml/片或0.5ml/片以上,應加熱原水(細菌內毒素檢查用水)復溶後使用。凝膠法是通過觀察是否形成凝膠來判斷反應的終點。該方法操作簡單、經濟,無需特殊測量設備,可用於定性或半定量測定。

動態比濁法、終點比濁法、動態顯色法和終點顯色法都是定量檢測內毒素的四種方法。

根據檢測原理,終點濁度法和動態濁度法都屬於濁度法。濁度法是通過檢測鱟試劑與內毒素反應過程中濁度的變化來確定內毒素含量的方法。終點比濁法未發現商品。動態濁度法(也稱為動態濁度法)是壹種檢測反應混合物的濁度上升到預定吸光度所需的反應時間,或檢測濁度上升速度的方法。

終點顯色法和動態顯色法都屬於顯色矩陣法。顯色矩陣法是利用鱟試劑與內毒素反應過程中產生的凝固酶所釋放的發色團的量來測定內毒素含量的方法,也稱比色法。2005年,廈門鱟試劑廠推出以鱟四肽為顯色底物的鱟試劑試劑盒,抗幹擾能力強,靈敏度高達0.005EU/ml,質量達到國際領先水平。目前已有500多家單位使用了該工具包,部分單位還發布了相應的文件。國內有少數國外產品,但價格遠高於國產試劑,而且發貨周期長。

如果只需要檢測樣品的內毒素限值,可以選擇凝膠鱟試劑,通過測定內毒素限值和最大有效稀釋倍數,做樣品的幹擾試驗來確定鱟試劑的靈敏度。

如果需要定量測定樣品中的內毒素含量,應選擇顯色基質鱟試驗試劑盒或動態濁度法鱟試驗試劑。

動態比濁法和動態顯色法需要有孵育系統和配套軟件的動態光度儀,如ELx808微孔板鱟試驗儀和軟件TALgent或Gen5。動態濁度法和動態顯色法簡便、壹步到位、線性範圍寬。

終點顯色法需要用酶標儀或可見分光光度計檢測。將酶標儀器與孵育系統配合使用,如微孔板鱟試驗儀ELx808,可減少試劑消耗。

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