將上述配料混合，滅菌後調節 pH 值至 7.0-7.7H2O）溶液 1ml 磷酸氫二鉀 4g 肉浸液 1000ml
將上述原料混合，調節 pH 值使滅菌後為 7.0～7.2，分裝於 500ml 錐形瓶中，每瓶 80ml，115℃滅菌 30 分鐘。
2 酶液的制備取蠟樣芽孢桿菌斜面培養基
蠟樣芽孢桿菌
CMCC(B)63301]，接種到上述培養基的壹瓶中，在 25 ℃搖床中培養 18 小時，然後取此培養基到培養基的其余各瓶中，每瓶接種 10ml。同時每瓶加入無菌青黴素 4500 單位，25℃ 培養 24 小時，再加入無菌青黴素 20000 單位，繼續培養 24 小時，再加入無菌青黴素 20000 單位，繼續培養 24 小時，離心沈澱菌體，調節 pH 值至 8 左右。5，用過濾柱過濾除菌，再用無菌操作將濾液的 pH 值調至接近中性，然後裝入合適的容器中，在 10℃以下保存備用。濾液經無菌操作調節 pH 值至接近中性後，分裝到合適的容器中，在 10℃以下保存備用。
3 酶活力測定青黴素溶液
稱取適量青黴素鈉（鉀）、磷酸鹽緩沖液（pH7.0）溶解成每 1ml 含 10 000 單位青黴素的溶液。
青黴素酶稀釋液
取青黴素酶溶液，按估計單位用磷酸鹽緩沖液（pH 7.0）稀釋成每 1 ml 含約 8000 至 12000 單位青黴素酶的溶液，37℃預熱。
測定方法
精量測定青黴素溶液50ml，置於100ml量瓶中，預熱至37℃，精密加入預熱好的青黴素酶稀釋液25ml，迅速混勻，在37℃下準確放置1小時，精密測定3ml，立即加入碘滴定劑（0.01mol / L）進行了精確測量[精確測量碘滴定劑（0.0.1mol/L）10ml，置於 100ml 量瓶中，用醋酸鈉緩沖液（pH4.5）稀釋至刻度]25ml，室溫暗處放置 15 分鐘，用硫代硫酸鈉滴定劑（0.01mol/L）滴定，至接近終點時，加入澱粉指示劑溶液，繼續滴定至藍色消失。
空白試驗
取預熱青黴素溶液 2 ml，置 37℃ 1 小時，精密加入上述碘滴定液（0.01mol/L）25 ml，再精密加入青黴素酶稀釋液 1 ml，室溫暗處放置 15 分鐘，用硫代硫酸鈉滴定液（0.01mol/L）滴定。計算公式如下：
E=(B-A)×M×F×D×100
式中
E 為青黴素酶的活性（單位/毫升）/小時；
B 為空白滴定消耗的上述硫代硫酸鈉滴定劑的體積，毫升；
A 為樣品滴定消耗的上述硫代硫酸鈉滴定劑的體積。M 為硫代硫酸鈉滴定劑的濃度，mol/L；
F 為在相同條件下，每 1 毫升上述碘滴定劑（0.01 mol/L）中青黴素的單位數；
D 為青黴素酶溶液的稀釋倍數。
[註]
磷酸鹽緩沖液（pH7.0）
取磷酸氫二鉀 7.36g 和磷酸二氫鉀 3.14g，加水配成 1000ml。
乙酸鈉緩沖液（pH4.5）