物理消毒滅菌是醫療實踐中常用的方法，通常包括熱力、紫外線、輻射、超聲波和過濾滅菌。
(1)熱滅菌法
熱可以破壞微生物的蛋白質和核酸，使蛋白質變性固化，核酸融化裂解，從而導致其死亡。
1.幹熱滅菌法通常包括焚化、燒灼和幹烤。
(1)焚燒和燒灼僅用於被病原微生物汙染的廢棄物品、垃圾、人畜屍體等。焚燒用於微生物實驗室的接種環、金屬儀器、試管口、瓶口的滅菌。
(2)幹烤在幹燥箱中滅菌。壹般需要加熱到160℃~ 170℃2小時，才能達到殺菌的目的。適用於玻璃器皿、瓷器和金屬物品的滅菌。
2.濕熱消毒滅菌方法
(1)巴氏殺菌法是法國學者巴斯德發明的。主要是在低溫下殺滅致病菌或特定微生物，使物品中的不耐熱成分不被破壞。有兩種方法:壹種是61.1℃ ~ 62.8℃加熱30min；另壹種方法是加熱71.7℃，1.5 ~ 30s。現在人們用後壹種方法給牛奶消毒。
(2)100℃煮沸5 ~ 10 min可殺滅細菌繁殖體，而孢子則需煮沸1 ~ 2 h。常用於註射器、器皿、飲用水的消毒。
(3)流通蒸汽法，采用阿諾德蒸鍋或普通蒸鍋，在100℃加熱，15 ~ 30 min，可殺滅細菌的繁殖體。如果滅菌後的物品在37℃的培養箱中培養，孢子會發育成繁殖體，第二天再蒸壹次，達到連續三次以上的滅菌效果。
(4)高壓蒸汽滅菌是壹種快速有效的滅菌方法。使用高壓蒸汽滅菌器時，加熱產生蒸汽。隨著蒸汽壓力的增加，溫度上升。通常在壓力為103.4kPa(相當於老的15 lb/cm2或1.05kg/cm 2)時，滅菌器內的溫度可達65438。維持1.5 ~ 30 min，可殺滅所有微生物，包括孢子。這種方法常用於壹般培養基、生理鹽水、手術器械和敷料等的滅菌。
(2)紫外線和電離輻射
1.日光和紫外線日光消毒是最簡單、最經濟的方法。將患者的被褥、衣服、書籍、報紙在陽光下暴曬數小時，可殺死表面的大部分微生物。陽光中主要的殺菌成分是紫外線。紫外線在200 ~ 300 nm時有殺菌作用，其中波長為265 ~ 266 nm的紫外線殺菌作用最強。紫外線的殺菌原理主要是壹條鏈上相鄰的兩個嘧啶通過價鍵形成二聚體，幹擾DNA正常的堿基配對，導致細菌死亡或突變。
紫色紅外線可以穿透應時，但不能穿透普通玻璃或薄紙。所以紫外線只適用於表面和空氣的消毒，如手術室、嬰兒室、傳染病房、無菌準備室、微生物接種室的空氣消毒。
2.X射線、γ射線、陰極射線等電離輻射具有較高的能量和穿透力，因此能產生較強的致死作用。其機理在於產生自由基，破壞DNA。這種方法常用於消毒大量的壹次性醫用塑料制品；也可用於中藥和食品的消毒，不破壞其化學和營養成分。
(3)超聲波
超聲波是高於20千周/秒的聲波，人耳感覺不到。其殺菌機理主要是通過水時空化，破壞細菌細胞質的膠體，使其細胞膜與細胞質分離，使其細胞壁和細胞膜破裂，導致細菌繁殖體死亡。這種方法主要用於破碎細胞提取細胞成分或制備抗原。
(4)微波
它是波長約為1mm到1m的電磁波，稱為微波。它能穿透玻璃、塑料薄膜和陶瓷，但不能穿透金屬表面。目前用於消毒的微波有兩種，分別是2,450MHz和915MHz，常用於無菌病房的實驗室用品、非金屬器械、食具等用品的消毒。
(5)過濾滅菌
過濾除菌是用細菌過濾器將過濾液體和氣體的細菌保留下來，從而達到無菌的目的。細菌過濾器包含微小的孔隙，僅允許液體或氣體通過，而大於孔徑的細菌等顆粒不能通過。常用的細菌過濾器有四種:蔡氏過濾器、玻璃過濾器、薄膜過濾器、高效微粒空氣過濾器，主要用於不耐熱血清、抗毒素、生物藥物、空氣的殺菌。
二、化學消毒法
許多化學藥物能抑制或殺滅微生物，根據作用不同可分為化學消毒劑和化學治療劑，用於消毒、防腐和治療疾病。
(1)常用消毒劑的種類和應用
殺死微生物的化學藥物叫做消毒劑。消毒劑對人體有毒性作用，只能外用，不能口服。主要用於傷口、器械、皮膚黏膜排泄物及周圍環境的消毒。消毒劑在低濃度下也可用於防腐，但防腐劑的關鍵點是要對人體沒有毒性作用。消毒劑的種類、濃度和用途見表13-1。
表13-1常用消毒劑的種類、濃度和用途
種類
名字
集中
使用
重金屬鹽
水銀紅藥水
2%
皮膚和粘膜消毒，創傷小
升汞
0.05%~0.1%
非金屬器具的浸泡消毒
硝酸銀
1%
滴眼液預防新生兒淋球菌感染
氧化劑
高錳酸鉀
0.1%
皮膚粘膜消毒
過氧化氫
3%
皮膚和粘膜傷口的消毒
過氧乙酸
0.2%~0.5%
塑料和玻璃設備的消毒
碘酊
2.0%~2.5%
皮膚消毒
氯
0.2ppm~0.5ppm
飲用水和遊泳池消毒
漂白粉
10%~20%
地板、廁所和排泄物的消毒
酒精
乙醇
70%~75%
皮膚和溫度計的消毒
酚類
碳酸
3%~5%
地板和器具表面的消毒
煤酚皂溶液
2%
皮膚消毒
醛
甲醛
10%
物品表面和空氣的消毒
戊二醛
2%
精密儀器和內窺鏡的消毒
表面活性劑
苯紮溴銨
0.05%~0.1%
皮膚粘膜和器械的消毒
杜米芬
0.05%~0.1%
皮膚傷口洗滌、金屬器械、塑料、橡膠消毒。
染料
結晶紫
2%~4%
淺表傷口的消毒
酸和堿
乙酸
500毫升/100立方米
等量水分蒸發
空氣消毒
食醋
2%的溶液，
3 ~ 5毫升/立方米
熏蒸消毒空氣
生石灰
加水1: 4
或1: 8
做漿糊
排泄物和地面的消毒