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生物藥物分離提取技術的特點與原理?以及生化藥物的特點?請知道的大俠說壹下,先多謝了。

90、穩態:神經系統、體液和免疫系統調節下,內環境的相對穩定

溫度、pH、滲透壓,水、無機鹽、血糖等化學物質含量

血漿 7.35—7.45 緩沖對 NaHCO3/H2CO3 Na2HPO4/NaH2PO4

2/3細胞內液 組織液

91、65%體液 1/3細胞外液 血漿 淋巴

(內環境) 不是血液 血液>血漿>血清

食物 排尿

92、體內水來源 飲水 水排出途徑 出汗 皮膚

代謝水(有氧呼吸)面蟲、駱駝 呼氣 肺

(氨基酸脫水縮合) 排遺 消化道

93、K不吃也排 不經過出汗排

腎上腺分泌醛固酮(固醇) 保Na排K

高溫工作、重體力勞動、嘔吐、腹瀉→→應特別註意補充足夠的水、Na(食鹽)

細胞外液滲透壓下降,出現四肢發冷、血壓下降、心率加快

K對細胞內液細胞滲透壓起決定作用,維持心肌緊張、心肌正常興奮性 K心

94、血糖三來源(食物、分解、轉化) 三去向

糖的主要功能:供能

胰島素 唯壹降血糖激素;增加糖的去路,減少糖的來源 胰高血糖素、 腎上腺素 升血糖

胰高血糖素促進胰島素分泌,胰島素卻抑制胰高血糖素分泌

血 糖 升 高

↓ ↑ ↑

下丘腦某區域→胰島B細胞 胰高血糖素↑ 腎上腺素↑

↓ ↑ ↑

胰島素↑ 胰島A細胞 腎上腺髓質

↓ ↑ ↑ 下丘腦另壹區域

血 糖 降 低

<50-60 低早 <45 低晚 >130高 >160-180糖尿

壹次性攝糖過多,暫時尿糖 持續糖尿不壹定糖尿病,如腎炎重吸收不行

糖尿病 血糖高且有糖尿 驗尿驗血 三多壹少癥狀?

不吃少吃多吃含膳食纖維多的粗糧和蔬菜

95、營養物質:

蛋白質不足:嬰幼兒、兒童、少年生長發育遲緩、體重過輕 成年人浮腫

提供能量

營養物質功能 提供構建和修復機體組織的物質

提供調節機體生理功能的物質

維生素:維持機體新陳代謝、某些特殊生理功能

VA:夜盲癥

維生素 VB:腳氣病

VC:壞血病

VD:佝僂病、骨軟化病、骨質疏松癥

96、溫度感受器分為冷覺感受器和溫覺感受器(分布皮膚、粘膜、內臟器官)

體溫來自代謝釋放熱量(不是ATP提供),體溫恒定是產熱量,散熱量動態平衡結果

寒冷 炎熱

↓ ↓

皮膚冷覺感受器 溫覺感受器 血管

↓傳入神經 ↓ 立毛肌

下丘腦體溫調節中樞 下丘腦 骨骼肌

傳出神經 ↓ 汗

皮膚血管收縮 骨骼肌戰粟(產能特多) 血管舒張

皮膚立毛肌收縮 皮膚立毛肌收縮 汗液分泌增多

↓雞皮疙瘩 腎上腺素↑

縮小汗毛孔 甲狀泉激素↑

減少散熱 增加產熱 散熱量增加 不能減少產熱

調節水分、血糖、體溫

97、下丘腦 分泌激素:促激素釋放激素 抗利尿激素

感受刺激:下丘腦滲透壓感受器

傳導興奮:產生渴覺

第壹道防線:皮膚、粘膜等

非特異性免疫(先天免疫)第二道防線:體液中殺菌物質、吞噬細胞

98、免疫 特異性免疫(獲得性免疫) 第三道防線:體液免疫和細胞免疫

在特異性免疫中發揮免疫作用的主要是淋巴細胞

淋巴細胞的起源和分化:胸腺—T 骨髓—B

免疫細胞:B、T

免疫系統的物質基礎 免疫器官:扁桃體、淋巴結、脾

免疫物質:抗體、淋巴因子(白介素、幹擾素)

99、抗原特點:①壹般異物性 但也有例外:如癌細胞、損傷或衰老的細胞

②大分子性

③特異性 抗原決定簇(病毒的衣殼)

100、體液免疫: 記憶細胞

↓ ↓再次受相同抗原刺激

抗原→→吞噬細胞→→T細胞→→B細胞→→→效應B細胞→→→抗體

↑ (攝取處理) (呈遞) (識別)

感應階段 反應階段 效應階段

效應B細胞產生:抗體(免疫球蛋白)、抗毒素、凝集素

效應T細胞產生:淋巴因子、幹擾素、白細胞介素

識別抗原:B細胞、效應T細胞、記憶B/T

效應B細胞獲得有三途徑(直接、間接、記憶)

記憶細胞受相同抗原再次刺激後引起的二次免疫反應:更迅速、更強

再次接受過敏原(概念)

過敏反應 抗體分布 細胞表面

組織胺:體液調節

101、免疫失調引起的疾病 自身免疫疾病:風濕…類風濕…系統性紅斑狼瘡

先天性:先天性胸腺發育不全

免疫缺陷病 獲得性:艾滋病、肺炎、氣管炎

(人類免疫缺陷病毒) HIV↓攻擊T細胞

(AIDS) 獲得性免疫缺陷綜合癥

102、色素吸收、傳遞、轉換光能 色素不能儲存光能

蛋白質、氨基酸也不能儲存

少數特殊狀態葉綠素a 最終電子供體:水

高能量、易失電子 光能→ 電能 最終電子受體:NADP+

103、C4植物:玉米、高梁、甘庶、莧菜

既C3又C4 CO2固定能力強 先CO2+C3→C4

C3、C4葉肉細胞都含正常葉綠體

選修 C3維管束鞘細胞無葉綠體

圖 C4維管束鞘細胞含無基粒的葉綠體 不進行光反應

(P29) C4植物花環型結構 裏圈:維管束鞘細胞 外圈:部分葉肉細胞

降低呼吸消耗 增加凈光合量

104、提高產量 延長光合作用時間 光:光質、強度、長短

提高農作物對 增大光合作用面積 溫度:影響酶的活性

光能利用率 提高光合作用效率 水

礦質元素 N、P、K、Mg

CO2 農家肥、CO2發生器

105、生物固氮:N2 → NH3

根瘤菌的特異性:蠶豆根瘤菌侵入蠶豆、菜豆、豇豆;大豆根瘤菌侵入大豆。

N素

根瘤菌 有機物 豆科植物 異養需氧

***生固氮菌 根瘤 薄壁細胞 愈傷組織

固氮菌 自生≠自養 根瘤菌拌種 豆科植物綠肥

自生固氮菌:圓褐固氮菌(固氮+激素)

生物固氮(主:根瘤菌) 工業固氮 高能固氮

106、N循環 硝化、反硝化、氨化作用

反硝化:氧氣不足NO3-→N2

自生固氮菌的分離原理:無氮培養基對固氮菌的選擇生長

物質基礎:線粒體、葉綠體中的DNA(質基因)

…線粒體

107、細胞質遺傳 典型代表 …葉綠體 花斑植株→三種

特點 母系遺傳(受精卵中的細胞質幾乎全來自卵細胞)

後代性狀不出現壹定分離比

(形成配子時,質基因不均等分配)

編碼區:編碼蛋白質 連續的

原核細胞 非編碼區 編碼區上遊:RNA聚合酶結合位點

基因結構 調控 編碼區下遊

108、基因的結構 真核細胞 非編碼區

基因結構 編碼區 內含子:非編碼序列

外顯子:能編碼蛋白質內含子>外顯子

原核基因無外顯子內含子之說

主要分布於微生物

剪刀:限制性內切酶 特異性(專壹性)

(200多種) 獲得粘性末端

109、基因的操作工具 針線:DNA連接酶:扶手(磷酸二脂鍵)不是踏板(氫鍵)

條件①復制保存②多切點③標記基因

種類:質粒、病毒

運輸工具:運載體 ①染色體外小型環狀DNA

②存在於細菌、酵母菌

質粒特點 ③質粒是常用的運載體

④最常用:大腸桿菌

⑤對宿主細胞的生存無

基因工程 (基因拼接技術、DNA重組技術、轉基因技術) 決定性作用

直接分離 常用鳥槍法

提取目的基因 人工合成(反轉錄法、根據已知AA序列合成DNA)

目的基因與運載體結合 同壹種限制酶

110、基因操作步驟 將目的基因導入受體細胞→細菌、酵母菌、動植物

CaCl2處理細胞壁 ( 受精卵好 繁殖速度快)

目的基因的檢測和表達:標記基因、目的基因是否表達?

逆轉錄 堿基互補配對

mRNA 單鏈DNA 雙鏈DNA

推測 推測 合成

氨基酸序列 mRNA序列 DNA堿基序列 目的基因

藥(胰島素、幹擾素、白細胞介素、乙肝疫苗)

111、基因工程的成果 治病:基因診斷與基因治療(基因替換)

新品種(轉基因) 食品工業(食物)

環境監測(DNA分子雜交 探針)

生物固氮、基因診斷、基因治療、單細胞蛋白(微生物菌體本身)、

單克隆抗體、生物導彈(單抗+抗癌藥物)

112、 間接聯系 核心 核膜

高爾基體 內質網 細胞膜

線粒體膜

間接(具膜小泡) (內吞外排說明雙向)

分泌蛋白:抗體、蛋白質類激素、胞外酶(消化酶)等分泌到細胞外

粗面內質網上的核糖體 內質網運輸加工 高爾基體加工 成熟蛋白質 胞外

113、生物膜系統(不等於生物膜):細胞膜、核膜及由膜圍繞而成的細胞器

離體→營養物質+激素 適宜溫度+無菌

植物組織培養 離體→愈傷組織→根芽(胚狀體)→植物體

選無病毒 尖(生長點) 紫草素

114、植物細胞工程 兩種不同→雜種細胞→新植物體

植物體細胞 去掉細胞壁→原生質體→雜種細胞→新植物體

雜交 種間存在生殖隔離 不能有性雜交

好處:克服遠源雜交不親和障礙 培育新品種

是其它動物細胞工程技術的基礎

動物細胞培養 液體培養基:動物血清

115、 動 取自動物胚胎或出生不久的幼齡動物的器官或組織

物 用胰蛋白酶處理

細 原代培養→傳代培養(細胞株→細胞系 遺傳物質發生改變)

胞 滅活的病毒做誘導劑+物理、化學方法

工 動物細胞融合 最重要用途:制備單克隆抗體

程 理論基礎:細胞膜的流動性

單克隆抗體→指單個B淋巴細胞經克隆形成的細胞群產生的化學性質單壹、特異性強的抗體(優點:特異性強、靈敏度高)。每壹個B淋巴細胞只分泌壹種特異性抗體(***百萬種) *雜交瘤細胞 *生物導彈

116、微生物包含了除植物界和動物界以外的所有生物

質粒(小型環狀DNA)控制抗藥性、固氮、抗生素生成

核區(大型環狀DNA)控制主要遺傳性狀 有的細菌有莢膜、芽孢、鞭毛

碳源:無機/有機碳源 自養/異養

117、 微生物生長 氮源:加不加額外的氮源

所需的營養物質 生長因子:(維生素、氨基酸、堿基→構成酶和核酸)

水:

無機鹽:

固體培養基:分離、鑒定、計數

物理性質 半固體培養基:運動、保藏菌種

液體培養基:工業生產

118、培養基 天然培養基:工業生產

化學性質 合成培養基:分類鑒定

選擇培養基 青黴素→選出酵母菌、黴菌等真菌

用途 NaCl:金黃色葡萄球菌

鑒定培養基:伊紅美藍→大腸桿菌→深紫色和金屬光澤

自己設計實驗:把混合在壹起的圓褐固氮菌、硝化細菌、大腸桿菌區分開,並篩選純種。

酶合成的調節 誘導酶:基因和誘導物控制

119、微生物代謝調節 酶活性的調節 結構改變 可逆 快速 準確

必需物質,壹直產生 氨基酸、核苷酸、維生素

初級代謝產物 無種的特異性 多糖、脂類

120、代謝產物 非必需物質,壹定階段 抗生素、毒素

次級代謝產物 有種的特異性 四素 色素、激素

121、微生物群體生長曲線: 3

2 4

1

(1)調整期:代謝活躍,開始合成誘導酶 初級代謝產物收獲的最佳時期

(2)對數期:形態和生理特性穩定,代謝旺盛;科研用菌種,接種最佳時期

(3)穩定期:次級代謝產物收獲最佳時期,芽孢生成(種內鬥爭最劇烈)

及時補充營養物質,可以延長穩定期

(4)衰亡期:多種形態,出現畸形,釋放次級代謝產物 生存環境惡劣

與無機環境鬥爭最激烈的是4衰亡期。

營養物質消耗有害代謝產物積累PH不適宜導致3.4時期的出現。

註意:前三個時期類似“S”型增長曲線,但是多了衰亡期

122、影響微生物生活的環境因素

PH值:影響酶的活性、細胞膜的穩定性,從而影響微生物對營養物質的吸收

溫度:影響酶和蛋白質的活性

O2濃度:產甲烷桿菌

123、高壓蒸汽滅菌法:1/5、1/2、2/3、75% 由裏向外、細密、不重復

溶化後分裝前必須要 調節pH

細菌培養的過程:培養基的配制→滅菌→擱置斜面→接種→培養觀察

實例:谷氨酸發酵(黃色短桿菌、谷氨酸棒狀桿菌)

概念:

菌種選育:誘變育種、基因工程、細胞工程

培養基的配制:成分、比例,pH適宜

124、發酵工程 內容 滅菌:去除雜菌

擴大培養和接種:菌種多次培養達到壹定數量

發酵過程:(中心階段)控制各種條件,生產發酵產品

分離提純 菌體:過濾、沈澱(單細胞蛋白即微生物菌體本身)

代謝產物:蒸餾、萃取、離子交換

應用 醫藥工業:生產藥品和基因工程藥品

食品工業:傳統發酵產品、食品添加劑、單細胞蛋白等

125、 C/N=4/1 菌體大量繁殖但產生的谷氨酸少(P79)

記住 C/N=3/1 菌體繁殖受抑制,但谷氨酸的合成量大增

溶氧不足: 產生乳酸或琥珀酸

pH呈酸性: 產生乙酰谷氨酰胺(P95)

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