儀器與試藥日本島津高效液相色譜儀CLASSLC10A，SPD10A紫外檢測器，CR6A數據處理機。頭孢呋辛酯原料（廣州某藥廠提供），甲醇（色譜純），磷酸二氫胺（分析純）。
色譜條件色譜柱，DickmaC18柱（5μm，150mm×46mm）；流動相A：0.2mol/L磷酸二氫胺溶液，流動相B：甲醇；流速，1.3mL/min，梯度洗脫；檢測波長，278nm；進樣量，20μL。 頭孢呋辛酯的主要雜質是頭孢呋辛酯Δ3異構體（熱降解產生），反頭孢呋辛酯異構體（光解產生），以及其他各種合成中帶入的副產物和其他雜質。據報道，ICP已就新藥研制中關於雜質的檢查達成***識：凡含量大於0.1%的雜質原則上都在控制之列。很明顯，頭孢呋辛酯原料中，Δ3異構體、反頭孢呋辛酯異構體的含量均已大於0.1%，若采用CHP2000收載的限度方法，僅控制了總雜質的量，對單個雜質沒有作出限度規定，似不甚合理。
BP2000對幾個主要雜質的限度分別作出規定，但采用的是簡單的歸壹化法，由於雜質含量與主成分含量相差較大，很難同時準確測量主成分峰面積和雜質峰面積，而參數的設置，對大峰和小峰面積測量準確度的影響，也會造成計算誤差。有專家提出，采用自身對照法，既克服了簡單歸壹化法的缺點，又解決了缺乏雜質對照品的問題。取樣品溶液分別於60℃水浴1h及254nm紫外照射24h，混合溶液，分別采用梯度洗脫法和恒定洗脫法進行分離，兩法均可分離出頭孢呋辛硫酸鹽（異構體B、A）、頭孢呋辛酯Δ3異構體、反頭孢呋辛酯（異構體B、A）等雜質。梯度洗脫法較恒定洗脫法具更佳峰形及分離度，可分離出更多的雜質，如二α頭孢呋辛乙醚異構體等雜質.