05級
學生編號
054120150
姓
王瑞
畢業論文題目
梓醇對D-半乳糖誘導的衰老神經元的影響
畢業論文的起止時間
2009年2月至2009年6月
講師姓名
張秀麗
職稱
博士生和講師
背景介紹:
隨著全球中老年人的比例和絕對數量不斷增加，人口中與衰老相關的疾病發病率顯著增加，與衰老相關的疾病成為科學家面臨的重要挑戰。由於這類疾病常伴有嚴重的認知障礙和精神障礙，甚至癱瘓和感覺障礙[1]，嚴重危害老年人的健康，也給家庭和社會帶來沈重的負擔。因此，探索大腦衰老的機制，研究延緩衰老過程的有效藥物，防治老年病，已成為當今社會和醫學界的重要課題。
在眾多老年病中，神經退行性疾病的患病率呈逐年上升趨勢，已成為影響人們健康水平和生活質量的重大社會問題。神經退行性疾病，如阿爾茨海默病(阿爾茨海默病)、帕金森病、肌萎縮側索硬化和亨廷頓舞蹈病等，是壹類中樞神經系統異常變性引起的進行性性功能障礙和衰退性疾病。其中，老年期癡呆患病率占老年人口的4.6%，其中半數為老年原發性退行性癡呆。流行病學調查還顯示，65歲以上人群中，老年原發性退行性癡呆的發病率為2.9%。該病具有復雜的病理生理過程，受基因調控和各種環境因素的影響，其病因和發病機制尚不清楚。臨床上沒有有效的措施控制這類疾病的進展，患者最終會喪失生活能力甚至死亡。目前，我國人口老齡化速度居世界首位，老年人口已超過6543.8+0億，迫切需要尋找有效的藥物防治老年疾病。
中國傳統醫學歷史悠久，療效顯著。它是中國傳統文化的燦爛瑰寶。在幾千年的實踐和發展中，它形成了自己獨特的理論體系。尤其對於疑難病和慢性病，中醫有其獨特性。中藥具有多靶點、多效應的特點，既能改善癥狀緩解癥狀，又能提高機體抗病能力治愈疾病，副作用少，藥源豐富。中醫藥在幾千年治療老年癡呆癥和記憶力減退的臨床經驗中積累了許多寶貴的知識。自20世紀80年代以來，由於化學藥物開發存在技術難度大、價格高、毒副作用明顯、環境汙染嚴重等現實問題，中藥研究受到廣泛關註。
地黃是壹種常用的滋補中藥，是玄參科植物地黃的新鮮根莖或幹燥塊根。最早見於《神農本草經》，被列為上品[5]。地黃在我國有1000多年的藥用歷史，應用廣泛，對免疫、血液、內分泌、心腦血管、神經系統、抗菌消炎等有壹定療效。單味地黃[7]和以地黃為主的復方在治療衰老及相關疾病方面的應用歷史也很悠久。現代藥理實驗發現其主要活性成分為環烯醚萜苷類和地黃。
梓醇是地黃中含量最高的環烯醚萜苷，屬於環氧醚類單萜。目前，我們實驗室已經證明梓醇對細胞和動物具有神經保護作用，可能成為延緩衰老和治療阿爾茨海默病、帕金森病等神經退行性疾病的潛在藥物。由於衰老是各種神經退行性疾病的根本因素，因此研究梓醇的抗衰老作用對此類疾病的預防和治療具有重要意義[8-9]。
實驗前期發現梓醇可以改善D-半乳糖誘導的衰老小鼠的記憶喪失，同時改善腦組織的抗氧化能力和能量代謝障礙。因此，本研究利用D-半乳糖誘導的神經元衰老模型，進壹步研究了梓醇的抗衰老機制，為該藥物的研發和臨床應用奠定了壹定的基礎。
研究意義:
關於1和D-半乳糖誘導衰老神經細胞模型的報道很少。闡明該模型的作用機制有助於抗衰老藥物的篩選和機理研究。
2.梓醇對衰老動物模型有明顯作用，細胞模型的研究有助於闡明梓醇抗衰老作用的分子機制。
研究內容:
采用小鼠腦神經元原代培養，用D-半乳糖體外誘導神經元衰老，研究梓醇對神經元的影響，測定細胞形態學觀察、細胞活力和雕亡等綜合指標。
在實驗過程中，利用免疫組織化學染色和熒光染色技術、流式細胞儀、熒光顯微鏡、紫外分光光度計和熒光酶標儀，研究了梓醇在體外的神經保護機制。
預期成果和水平:梓醇對D-半乳糖誘導的小鼠腦神經元衰老有保護作用。
因此，本研究采用原代培養的SD大鼠皮層神經元，從超微結構、細胞周期分析、SA-β-半乳糖苷酶化學染色等方面觀察D-半乳糖培養對神經元的擬衰老反應，並從生化方面研究梓醇的抗衰老作用。
研究的重點和難點:
1.掌握原代神經元細胞培養和免疫組化的實驗技術。
2.闡明D-半乳糖誘導神經元衰老的濃度和時間範圍。
3.初步探討D-半乳糖誘導神經元衰老的機制。
4.闡明梓醇對D-半乳糖誘導的衰老神經元的影響。