如何檢測食品中的伊塔崎菌？上帝保佑

壹.阪崎腸桿菌（Enterobacter sakazakii）是腸桿菌科的壹種，1980 年由嗜黃腸桿菌更名為阪崎腸桿菌。阪崎腸桿菌可引起嚴重的新生兒腦膜炎、小腸結腸炎和貧血，死亡率超過 50%。微生物學家目前尚不清楚阪崎腸桿菌的汙染源，但許多病例報告表明，嬰兒配方粉是迄今發現的主要感染途徑。人們已經註意到並報道了阪崎腸桿菌的生物特性及其對人類健康的危害。例如，2008 年 10 月，味之素配方粉被發現含有阪崎腸桿菌這種致病菌。阪崎腸桿菌是奶粉（牛奶）產品中新發現的壹種致病菌。世界各地都有關於阪崎腸桿菌引起嬰兒和早產兒腦膜炎、敗血癥和壞死性結腸炎病例的報道。多項研究表明，嬰兒配方奶粉是目前發現的導致嬰兒和早產兒腦膜炎、敗血癥和壞死性結腸炎的主要感染途徑，在某些病例中，阪崎腸桿菌導致的死亡率可高達 40% 至 80%。阪崎腸桿菌已引起世界許多國家有關當局的關註。據報道，國外乳制品巨頭曾因此被召回。繼2002年美國FDA在壹些國際乳業巨頭生產的嬰幼兒配方奶粉中檢出阪崎腸桿菌後，2003年又有壹家國際乳業巨頭主動召回了壹批在美國生產的罐裝早產兒配方奶粉，其中檢出了極少量的阪崎腸桿菌，從此阪崎腸桿菌成為世界關註的焦點。但國內很少有企業有能力自檢，因為國內沒有專門的檢測手段，要購買壹套國內從未有過的檢測設備也不是馬上就能做到的。目前，國外的奶粉（牛奶）產品巨頭都有檢測手段，惠氏中國聲稱，確保在中國銷售的每壹個產品在上市前都經過阪崎腸桿菌的檢測。美贊臣中國也聲稱擁有此類檢測設施。國外奶粉中發現阪崎腸桿菌不分地區，中國奶粉企業面臨著另壹個重大問題。2005 年 5 月 20 日，由中國檢驗檢疫科學研究院和天津出入境檢驗檢疫局牽頭制定的奶粉中阪崎腸桿菌檢測行業標準在北京通過審定。該標準的出臺解決了我國嬰幼兒配方奶粉中阪崎腸桿菌檢測無標準、無檢測方法的問題，並於10月開始實施。該標準規定了阪崎腸桿菌的改良傳統檢測方法、普通 PCR 方法和熒光 PCR 方法。據了解，阪崎腸桿菌是近年來在乳制品中新發現的致病菌。它是壹種存在於自然環境中的 "條件致病菌"，已被世界衛生組織和許多國家確定為導致嬰幼兒死亡的重要條件致病菌，可引起任何年齡人群的疾病，尤其是早產兒、低出生體重兒或免疫力低下的嬰兒，嚴重時可導致敗血癥、腦膜炎或壞死性小腸結腸炎。繼2002年美國FDA在當地壹些國際乳業巨頭生產的嬰兒配方奶粉中檢出阪崎腸桿菌後，2003年又有壹家國際乳業巨頭公司主動召回了壹批在美國生產的早產兒罐裝專用配方奶粉，其中檢出了極少量的阪崎腸桿菌，成為世界關註的焦點。2005 年 5 月，我國通過了行業標準《奶粉中阪崎腸桿菌的檢測方法》的審定，對奶粉中的阪崎腸桿菌進行了嚴格檢測。今年以來，廣州、中山、汕頭檢驗檢疫部門多次在進口食品用奶粉中檢出阪崎腸桿菌。二、控制阪崎腸桿菌危害的幾點建議 (1) 制定嬰幼兒配方奶粉中阪崎腸桿菌的微生物標準，建立有效的控制措施，將其危害降到最低。(2) 制定嬰幼兒配方奶粉加工、使用和處理指南，研究降低阪崎腸桿菌汙染水平的方法，降低生產環境和配方奶粉中阪崎腸桿菌的濃度和流行風險；為高風險人群生產更多的商業無菌配方奶粉替代品。(3) 制定有效的環境監測計劃，將腸桿菌科細菌而非大腸桿菌作為工業生產線的衛生指標菌。(4) 建立實驗室監測網絡，調查和研究阪崎腸桿菌的來源和傳播途徑；加強相關學科的基礎研究，包括生態學、分類學和菌株毒力。(5) 用商用無菌液體或開水配制熟食。餵養嬰幼兒後剩余的預制食品應放入冰箱冷藏，食用前再加熱。我國應根據實際情況制定相應的管理辦法，加強阪崎腸桿菌檢測和控制技術的研究，進壹步提高嬰幼兒配方奶粉的標準，確保我國嬰幼兒的健康和安全。三、阪崎腸桿菌檢測必備儀器--熒光pcr儀：實時熒光定量PCR檢測系統也叫實時熒光定量核酸擴增檢測系統（英文全稱是Real-time Quantitative PCR Detection System），簡稱實時熒光qPCR，qPCR是以實時熒光定量PCR為核心及其配套的檢測分析軟件系統。qPCR 的核心是實時熒光定量 PCR 儀器及其配套的檢測分析軟件系統。聚合酶鏈式反應（PCR）的原理因其靈敏性、特異性和快速性而於 1993 年獲得諾貝爾化學獎。由於其在病原體檢測方面的獨特優勢，發達國家在相關方法和儀器的研發上非常迅速，成為分子生物學診斷的主流，至今仍處於學術和應用的前沿，發展至今已有三代產品：第壹代 PCR 定性檢測技術和設備由基因擴增熱循環儀（DNA Thermal Cycler）+電泳儀+紫外分析儀+定性試劑組成。第壹代PCR定性檢測技術和設備由DNA熱循環儀、電泳儀、紫外分析儀和定性試劑組成；第二代PCR-DNA端點定量PCR檢測由DNA熱循環儀、熒光儀和端點定量試劑組成，分為端點ELISA-PCR和端點Flour-PCR兩種PCR產品。第三代產品是實時 qPCR-DNA/RNA 實時熒光定量檢測，qPCR 靈敏度高。第三代產品為實時 qPCR-DNA/RNA 實時熒光定量檢測。qPCR 具有靈敏度高、線性範圍寬、精密度和重現性好等突出優點，是世界公認的用於臨床和科研的最先進的核酸分子診斷技術，受到美國 FDA 的認可和推崇。檢測項目包括：食品及其他病原體和疾病病毒及其他病原體，如淋球菌 NG、巨細胞病毒 CMV、結核分枝桿菌 Mtb、禽流感、阪崎腸桿菌、口蹄疫、新城疫、豬瘟、大腸桿菌 O157:H7、沙門氏菌、炭疽桿菌、枯草芽孢桿菌、沙門氏菌及其他細菌。細菌、炭疽桿菌、胸膜肺炎放線桿菌、寄生蟲病等。PCR 儀的應用範圍非常廣泛，幾乎所有生命科學領域都有涉及：食品檢測、臨床檢驗、疾病控制、檢驗檢疫、科研實驗室、食品安全、化妝品檢測、環境衛生等。國內多家試劑生產商已生產出數十種熒光定量 PCR 試劑盒，包括肝炎、性病、優生優育、呼吸道疾病、禽流感、阪崎腸桿菌、口蹄疫、新城疫、豬瘟、大腸桿菌 O157∶H7、沙門氏菌、炭疽桿菌、胸膜肺炎放線桿菌、寄生蟲病等。購買方便，價格低廉，可以獲得相關的國家認證。值得壹提的是，鑒於當前疫情的頻發和實時熒光定量 PCR 技術的實際應用，國內外已在相關行業強制應用實時熒光定量 PCR 檢測技術，並相繼制定了國際、國家、行業標準作為法律依據。例如SN/T 1632.3-2005 奶粉中阪崎腸桿菌熒光定量 PCR 法檢測方法 GB/T 19438.1-2004 禽流感病毒通用熒光 RT-PCR 檢測方法 GB/T 19438.2-2004 H5 亞型禽流感病毒熒光 RT-PCR 檢測方法 ISO22174-2005 食品病原菌 PCR 檢測方法與價格昂貴的進口儀器相比、選擇質量和性能與進口儀器相當，價格僅為進口儀器的三分之壹甚至五分之壹的優質國產熒光定量 PCR 儀器是我國廣大用戶的必然選擇，也是國家衛生主管部門、衛生部臨床檢驗中心和國家食品藥品監督管理局所倡導的。使用質量和性能與進口儀器相當的國產熒光定量 PCR 儀器，可以為國家節約大量外匯，讓更多的用戶擁有先進的實時熒光 PCR 技術和設備，同時也可以促進國產儀器的技術進步，推動民族工業的發展，利國利民。西安天隆科技股份有限公司生產的TL988型實時熒光定量PCR儀，經國家藥品監督管理局指定的檢測中心檢測合格，國家質檢總局認定具有CNAL全球互認檢測資質，性能達到國際同類產品先進水平，並通過了兩個國家藥物臨床基地的臨床試驗，獲得了國家食品藥品監督管理局SFDA頒發的醫療器械註冊證書。通過了兩個國家藥物臨床試驗基地的臨床試驗，獲得了國家食品藥品監督管理局SFDA頒發的醫療器械註冊證，符合中華人民共和國衛生部頒發的《臨床基因擴增檢驗實驗室管理規範》和《臨床基因擴增檢驗實驗室規範》。2005 年至今，我國研究人員圍繞阪崎腸桿菌的分類、致病機理、危害評估、減少汙染措施、檢測方法儀器和標準等方面開展了研究。相關研究論文包括阪崎腸桿菌的生物學特性與健康危害》，裴曉燕，劉秀梅，中國疾病預防控制中心營養與食品安全所乳制品中的阪崎腸桿菌可導致嬰兒死亡，中國食品產業網 2008 年 5 月 28 日 10：56 乳制品檢測用實時熒光定量 PCR 儀的研制，彭年才、蘇明權、張振喜，中國乳業，CN23-1177/TS200705：62-64；乳制品中阪崎腸桿菌的快速檢測，彭年才、李明，食品安全導報，CN11-5478/R 2008.07 嬰幼兒奶粉中阪崎腸桿菌的快速檢測及其檢測，彭念才，張振喜，蘇明全，中國乳業，CN 11-4768/S，2008.08.乳制品中高危害性食源性致病菌阪崎腸桿菌的快速檢測分析，彭念才，內蒙古乳業，P18-20，2008，03