法。由於中藥制劑中測定組分含量波動範圍較大,所以最好采用標準曲線定量。
(2)內標法:中藥制劑組成復雜,若使用內標法,會增加分離的難度,其組分很容易幹擾內標峰,所以中藥制劑含量測定中,當組成相對簡單,雜質不幹擾內標峰時,才使用內標法。
3.供試品溶液的制備 由於高效液相色譜法本身具有分離的功能,因此所用供試品壹般經提取制得,不在需要純化處理。但組成復雜的制劑,仍需采用萃取、柱色譜等預處理方法對供試品進行純化處理。
中藥制劑多含有糖,制備供試液時,宜使用高濃度的醇或其他有機溶劑提取測定組分,最好不使用水為溶劑,以免提出糖汙染色譜柱,提取的方法視制劑的情況而定,可采用萃取(用於液體制劑)、回流或超聲震蕩提取(固體制劑)等。
由於中藥制劑組成復雜,分析時應在分析柱前加預柱。分析完畢後壹般用水或低濃度的醇水先洗去糖等水溶性雜質,再用甲醇等有機溶劑將色譜柱沖洗幹凈。
示例桂枝茯苓丸中桂皮酸的含量測定。本品桂枝為君藥,采用高效液相色譜法測定其中桂皮酸的含量。
供試品的制備 精密稱取本品細粉約1g,置50ml量瓶中,加50%甲醇40ml,超聲震蕩提取30分鐘,放冷,加50%至刻度,離心10分鐘(1200r/min),取上清液用0.45μm的濾膜過濾,取續濾液備用。
對照品溶液的制備 精密稱取桂皮酸對照品適量,加50%甲醇定量稀釋成每ml中含0.01mg的溶液。
色譜條件 inersil 5ods-ⅱ柱(25cm×4.6mm);流動相:乙腈-0.1%磷酸(29:71);檢測波長285nm;流速1.0ml/min。
用外標法測定其含量。
桂皮酸對照品和樣品的色譜圖見圖。
展望
中藥制劑質量標準應該能夠說明質量與療效,即療效與物質基礎的關系,其分析檢測方法應包括理化指標、生物指標和療效指標。方法應簡便、快速,具有準確性和專屬性的特點。
只要有成品生產和銷售與使用,就需要有質量標準的監測和保證。
要改變目前我國研究制定中藥制劑質量標準的工作起步較晚,基礎較差,工作難度較大的局面,對中藥制劑質量工作重視與否,是開展中藥制劑質控工作的前提;制定、完善、健全中藥制劑質控標準,是進行中藥制劑質量控制工作的依據;增置,完善有關條件和措施及要求等則是加強和搞好中藥制劑質量控制工作的基本保證。為此,必須不斷地應用現代科學研究成果,在高起點上制定中藥制劑的質量標準,提高檢測技術水平,做到與國際接軌。
隨著中醫藥理論基礎研究的不斷深入,各種分析方法的進步,其總趨勢正向著儀器化、自動化、快速和微量的方向發展。
化學等價不等於生物等價,須進行體內藥物分析,如血藥濃度、組織中的濃度、脲中的濃度和排泄量、藥物代謝以及中藥制劑在體內可能輩實際利用的程度等方面,直接或間接地判斷療效,這也是進壹步合理用藥及研制開發新藥,使中藥趨於現代化的標誌之壹。