油鏡下觀察糞便中微生物的個體形態。
二。實驗原理
微生物的細胞小而透明，在普通光學顯微鏡下很難識別。必須對它們進行染色，使染色後的細胞與背景有明顯的色差，這樣才能更清楚地觀察到它們的形態和結構。因此，微生物染色技術是觀察微生物形態結構的重要手段。
革蘭氏染色反應是細菌分類和鑒定的重要特征。它是由丹麥醫生格拉姆於1884年創立的。革蘭氏染色不僅可以觀察細菌的形態，還可以將所有細菌分為兩類:藍紫色染色反應的革蘭氏陽性菌，用G表示；染色反應為紅色(雙重染色色)的革蘭氏陰性菌用G-表示。細菌對革蘭氏染色的不同反應是由它們細胞壁的不同組成和結構引起的。革蘭氏陽性菌的細胞壁主要由肽聚糖形成的網狀結構組成。在染色過程中，用乙醇處理時，由於脫水，網狀結構中的孔徑變小，通透性降低，使結晶紫-碘絡合物滯留在細胞中，不易脫色，所以呈現藍紫色。革蘭氏陰性菌細胞壁中肽聚糖含量低，但脂質物質含量高。用乙醇處理時，脂質物質溶解，細胞壁的通透性增加，使結晶紫-碘絡合物容易被乙醇提取和脫色，再用重染液(藏紅花)的顏色染色，所以呈現紅色。
革蘭氏染色需要四種不同的溶液:堿性染料初染液；媒染劑；脫色劑和復染色劑。堿性染料的初染液如《細菌單染法基本原理》中所述，而革蘭氏染色所用的初染液壹般為結晶紫。媒染劑的作用是增加染料與細胞的親和力或附著力，即幫助染料以某種方式固定在細胞上，使其不易脫落。碘是壹種常用的媒染劑。脫色劑用於對染色細胞進行脫色。不同類型的細胞有不同的脫色反應，有的可以脫色，有的不能。95%的酒精常用作脫色劑。二次染液也是堿性染料，顏色與壹次染液不同。二次染色的目的是使脫色後的細胞染上與壹次染色液不同的顏色，而未脫色的細胞仍保持壹次染色的顏色，細胞分為G和G-兩組。常用的二次染液是藏紅花。
三。實驗材料
1.應變:？
2.設備:顯微鏡、載玻片、染色槽等。
3.染色液:草酸銨結晶紫染色液、盧戈碘溶液、95%乙醇、0.5%沙黃染色液。
四。實驗步驟
1.塗抹少許糞便，用蒸餾水浸泡，在載玻片上滴壹滴浸泡液，晾幹，固定。固定時，通過火焰1-2次即可，不要太熱，以載玻片不燙手為宜。
染色
(1)在初染中加入壹滴草酸銨結晶紫，約壹分鐘，然後用水洗。
(2)將碘溶液滴入媒染中，洗去殘留的水，覆蓋約壹分鐘，水洗。
(3)脫色:用白底沖洗掉載玻片上的水，用95%的酒精滴洗，直到流出的酒精剛好不出現紫色，約20-30分鐘，立即用水沖洗掉酒精。
(4)用藏紅花溶液染色65438±0-2分鐘，用水洗滌。
(5)鏡檢幹燥後，放入油鏡中觀察。革蘭氏陰性菌為紅色，革蘭氏陽性菌為紫色。基於分散細菌的革蘭氏染色反應，過於密集的細菌往往是假陽性。
革蘭氏染色的關鍵是嚴格掌握酒精脫色的程度。脫色過度，可將陽性菌誤染為陰性菌。脫色不夠時，陰性菌可被誤染為陽性菌。此外，細菌的年齡也影響染色結果。比如陽性細菌培養時間過長，或者已經死亡，部分細菌自行溶解，往往是陰性。
動詞 （verb的縮寫）預防措施
1.革蘭氏染色成功的關鍵是脫色時間。如果脫色過度，革蘭氏陽性菌可脫色，誤認為革蘭氏陰性菌。如果脫色時間過短，革蘭氏陰性菌會被誤認為革蘭氏陽性菌。因此，必須嚴格控制脫色時間。
2.培養菌齡18-24小時為宜。如果細菌太老，革蘭氏陽性菌往往會因細胞死亡或自溶而轉陰。
糞便中的主要細菌是大腸桿菌。