本品不應與鹽酸四環素、卡那黴素、多粘菌素E、磺胺嘧啶鈉、三磷酸腺苷、輔酶a等混合使用。，以免沈澱或降低藥效。
3.氯黴素和青黴素壹般不合用，因為在繁殖期氯黴素是抑菌劑，青黴素是殺菌劑，合用會影響青黴素的抗菌活性，降低其藥效。但是這個問題還是有爭議的，有不同的看法，因為兩者結合對於革蘭氏陽性菌、陰性菌混合感染和顱內感染都有很好的臨床效果。溶液，如有必要，應先青黴素2 ~ 3小時後氯黴素。
2.由於本品能抑制某些肝酶的活性，可幹擾甲苯磺丁脲、苯妥英鈉和雙香豆素在人體內的生物轉化，增強甲苯磺丁脲和苯妥英鈉的作用，增強雙香豆素和華法林的抗凝作用。
5.嬰兒、肝腎功能障礙患者、妊娠末期孕婦和哺乳期婦女慎用。
使用青黴素前除皮試外，還應註意以下幾點:
1.在有搶救設備的正規醫療單位註射青黴素。壹旦出現過敏反應，可以得到及時有效的搶救治療。如果在註射過程中任何時候感到頭暈、心慌、出汗、呼吸困難，請立即告訴醫生和護士。
4.註射青黴素後，在醫院觀察至少20分鐘，無不適即可離開。
3.千萬不要在極度饑餓的情況下使用青黴素，以防空腹時身體對藥物的耐受性降低，誘發針暈等不良反應。
2.兩次註射間隔時間不宜過近，以4 ~ 6小時為宜。靜脈滴註青黴素時，初始速度不宜過快，每分鐘不宜超過40滴。觀察10 ~ 20分鐘無不良反應再調整輸液速度。
5.如果當天有青黴素註射史，在家感到頭暈、心慌、出汗、呼吸困難，應及時送醫院治療。
氨芐西林註意七點:
氨芐青黴素(包括含氨芐青黴素的兩性黴素等。)是分解最快、過敏反應發生率最高的青黴素類藥物之壹。特別是在酸性環境和高血藥濃度下，更容易因氨芐青黴素分解產物和堆積而引起過敏性藥疹和過敏性休克，甚至危及生命。臨床使用氨芐西林時，不僅要做皮試，還要註意以下幾點:
第壹，皮試陰性不代表不過敏。氨芐青黴素的過敏反應多為延遲性，連續用藥數天後可出現過敏性藥疹，導致過敏性休克。對於過敏性藥疹，停藥後用西斯明、苯海拉明、地塞米松即可解決。對突然出現呼吸困難、寒戰發熱、血壓下降、心率加快等癥狀者，應立即停藥並輸氧，用腎上腺素、地塞米松、葡萄糖酸鈣等藥物搶救。
二是應短期使用，不宜長期大量給藥，以免血藥濃度持續升高，導致過敏原的形成和積累，出現過敏反應。
第三，要用足量的生理鹽水充分溶解後再靜脈滴註。壹般來說，4克氨芐西林應溶於300毫升左右的生理鹽水(0.9%氯化鈉註射液)中。切勿溶於糖，尤其是高滲糖(濃度大於5%的葡萄糖註射液)進行靜脈滴註。因為糖是酸性的，不僅能降低氨芐青黴素的抗菌殺菌能力，還能促進其自身分解，增加致敏幾率。
第四，痛風、尿毒癥、糖尿病酮癥酸中毒、乳酸酸中毒患者應盡量少用或不用氨芐西林。原因也是氨芐青黴素在酸性環境下能促進自身分解，增加致敏的可能性。
第五，患者本身過敏，應避免。
第六，靜脈給藥通常是慢慢地而不是很快地進行，靜脈滴註應以每分鐘不超過60滴的速度進行，以避免因血藥濃度迅速升高而出現分解過敏的可能。
第七，使用前要找到對該藥敏感的致病菌感染的確切證據，避免盲目濫用，以免造成菌群失調和黴菌感染，增加治療難度。
禁忌癥:本品對青黴素過敏者禁用。青黴素不穩定，可分解為青黴酸和青黴烷酸。前者可聚合成青黴噻唑酸聚合物，與多肽或蛋白質結合形成青黴噻唑酸蛋白，是壹種快速過敏原，也是引起過敏反應的主要原因。後者還可與體內半胱氨酸形成遲發性過敏原——青黴烯酸蛋白，與血清病樣反應有關。