現代豬人工授精受精率高且穩定,很大程度上得益於壹次性耗材的應用。壹次性耗材的應用,減少了人工授精人員對耗材的清洗和消毒。因此,大大降低了豬場人工授精的衛生管理難度,保證了人工授精效果的可靠性。上世紀八九十年代,隨著我國大量引進國外豬種,曾經廣泛應用的豬人工授精技術逐漸被豬場放棄,直到上世紀九十年代末,我國南方壹些省份引進現代豬人工授精技術後,豬人工授精才重新被越來越多的豬場和個體配種站所采用。現代豬人工授精技術的主要特點,壹是操作過程的規範化,二是對每種授精用精液的相關指標都有具體的規定(當然這些指標還有待進壹步研究),三是壹次性人工授精供精的廣泛使用。我國廣大從事豬人工授精人員的平均技術素質和衛生觀念普遍較低,豬人工授精全過程的消毒環節,在很大程度上決定了人工授精效果的好壞。為此,筆者在推廣豬人工授精的實踐中,逐步建立了壹套豬人工授精免消毒方案。其中大部分借鑒了國外廣泛應用的現代豬人工授精技術方案。現介紹如下:
1.公豬采精免消毒方案
1.1 采精容器
壹次性紙杯或壹次性食品袋 傳統人工授精,采精杯采用有刻度的棕色玻璃杯或普通保溫杯,保溫杯使用前需用酒精消毒,玻璃杯采用幹熱或高壓蒸汽消毒。使用容積不小於 250 毫升的壹次性紙杯。這種紙杯應采用環氧乙烷或其他無殘留消毒方法進行消毒,然後包裝出廠,可保證安全無汙染。每頭公豬采精用壹個紙杯,用後丟棄。第二種是在保溫杯中放入兩層食品袋,將食品袋套在保溫杯內壁上,再翻轉到保溫杯外壁,將精液收集到保溫杯中的食品袋中。食品袋不重復使用。
1.2精液過濾用品--壹次性過濾器的應用
在傳統的人工授精中,用3-4層紗布蓋住精液收集杯口,以過濾掉公豬精液中的膠狀物質。紗布在使用前必須清洗幹凈並高壓滅菌,使用前用稀釋溶液沖洗。免消毒方案是用壹次性濾網過濾。壹次性濾網用環氧乙烷滅菌,然後成卷包裝,相鄰的兩個濾網用點斷式連接;也可以每 100 張包裝在壹個紙箱中。使用時不要接觸濾網中間部位,將濾網蓋在采精容器上,用橡皮筋固定在采精容器上,並使濾網中間下沈約 3 厘米,以免過濾速度慢時精液溢出。
2.無菌精液體積測量--電子天平(秤)的應用
精液體積測量應在精液采集後進行。測量人工授精用豬精液體積的傳統方法是使用量杯或帶刻度的精液收集杯,而量杯或收集杯必須經過消毒。免消毒的解決方案是使用電子天平測量精液重量,然後除以精液比重,得出精液體積。由於豬精液的比重為 1.016-1.030,約等於 1,因此只需稱量精液的重量(克),即可得出以毫升為單位的體積。采集精液後,將裝有精液的食品袋從保溫杯中提出,將保溫杯放在電子秤上並調至零位(除皮膚外),然後將裝有精液的食品袋放入保溫杯中稱重(食品袋的重量可忽略不計),得到的讀數(克)即為精液采集量(毫升)。稱量設備可以是靈敏度為 1g 或小於 1g 的電子秤或電子天平。
3.免消毒稀釋液配制--壹次性食品袋的應用
在三角燒瓶中配制稀釋液時,需要對燒瓶和量筒進行清洗和消毒。免消毒的解決方案是將壹層或兩層壹次性食品袋放入大燒杯或塑料杯中,然後加入稀釋劑粉末,再將燒杯(或塑料杯)放在電子秤上並去皮。從軟管連接的蒸餾水容器中將蒸餾水倒入杯中(最初放出的幾毫升水應由其他杯子接走),直到將水加到指定重量(如 1000g 即約 1000mL)。然後將杯子放入水浴鍋中加熱 20 分鐘左右,再輕輕搖晃使其完全溶解。有些稀釋粉末會在水中結塊,溶解速度較慢,需要延長加熱時間。稀釋粉末全部溶解後,應繼續在水浴中加熱至所需溫度。
4、免滅菌溶液的稀釋和分裝
4.1 原精液稀釋量的計算:
原精液總有效精子數=原精液體積(或重量克)×精子密度(單位:個/毫升)×活力。
稀釋原精液的份數=原精液中的精子總數/每份精液中的精子數。
原精液稀釋後的體積(或重量)=可分裝的原精液稀釋份數(四舍五入取整數)×每份精液的體積(或重量)
註:每份精液中的有效精子數建議為20億;精液體積建議為80mL(最新建議後備母豬為80mL,經產母豬為100mL)。
4.2稀釋精液
用壹個塑料杯(1000-1500mL),放在電子秤上,去掉外皮後,從保溫瓶中取出精液袋,放入這個大塑料杯中,將精液袋翻到杯外。如果精液收集容器是壹次性紙杯,則應將紙杯中的精液倒入裝有食品袋的塑料杯中,然後放在電子秤上。此時也可稱量並記錄精液的重量。然後向杯中加入與精液溫度相同的稀釋液,直到達到計算出的最終重量。
4.3 精液的分配
傳統的人工授精壹般使用玻璃註射器進行授精,授精前要暫時吸入註射器,這種方法有很多缺點:壹是註射器需要消毒,多次打開盛裝精液的容器容易造成汙染;二是註射器容積小,不能滿足壹次人工授精對精液量的要求;三是在精液輸註過程中容易使精液形成渦流,造成精子損傷。而壹次性輸精瓶或輸精袋可以避免這些缺點。因此,精液分裝的免消毒方案如下:對於壹次性瓶分裝,可將塑料杯中稀釋後的精液分別加入不同的瓶中,使精液表面達到瓶子上相應的刻度(如100mL),然後旋上瓶蓋即可。壹次性人工授精袋可在人工授精袋上分設兩個掛孔,掛在精液分配專用支架上,將壹次性塑料漏鬥插入人工授精袋口,放在電子秤上,然後從皮膚上取下即可。塑料杯中的稀釋精液通過漏鬥緩緩加入人工授精袋中,待達到規定重量(如 100g)後,取下漏鬥和人工授精袋,掛上新的人工授精袋,再插入漏鬥,分裝另壹袋精液。用塑料熱封器密封袋口。將分離好的人工授精容器放入泡沫箱中慢慢冷卻 15-30 分鐘,然後將人工授精容器放入恒溫冰箱的架子上保存。
5.人工授精免消毒方案
5.1 清洗母豬外陰
過去,不少豬場在母豬交配或授精時,用清水或高錳酸鉀水清洗母豬外陰。但研究表明,母豬發情時,子宮會產生收縮波,使生殖道內產生負壓,從而可能將藥液吸入生殖道內。因此,用水清洗母豬陰戶可能會導致母豬子宮感染,而高錳酸鉀溶液吸入後會殺死進入的精子。因此,用液體清洗母豬外陰弊大於利。如果確實需要清洗母豬外陰,建議用濕抹布(或蘸有高錳酸鉀的濕抹布)擰幹後擦拭外陰,然後用消毒紙巾擦幹。壹般定位欄和衛生條件好的欄舍母豬外陰部汙染不嚴重,建議用幾張消毒紙巾(各大商場有售)充分擦拭母豬外陰部和外陰裂口後進行人工授精。實踐證明,這種清洗母豬外陰的方法安全可靠。
5.2塗抹紅黴素軟膏
在輸精器前端塗抹潤滑劑,有利於輸精器插入母豬陰道。過去常用的潤滑劑是液體石蠟或凡士林。它最大的缺點是包裝大,每包可用上千次,這樣多次開醮取用,很快就會被汙染。因此,建議使用紅黴素軟膏作為輸精管頭部的潤滑劑。紅黴素軟膏為小包裝,每管只能使用 15-20 次。紅黴素軟膏作為輸精管頭部的潤滑劑,具有價格低廉、易於購買、服用方便、汙染機會少等優點,還具有壹定的抗菌和抗汙染作用,效果非常好。冬季使用時,可將裝有紅黴素軟膏的塑料管放入熱水中浸泡,使軟膏軟化後再使用。
5.3壹次性授精器的應用
傳統人工授精中的授精器為橡膠授精器,多次重復使用,授精衛生管理難度大,這是傳統人工授精受胎率和產仔數不穩定的重要原因。使用壹次性授精器是現代人工授精成功的關鍵。壹次性人工授精器可分為初產母豬用壹次性人工授精器(帶海綿頭和螺旋橡膠頭)和經產母豬用人工授精器(海綿頭)。海綿頭授精器可以很好地卡住子宮頸,對母豬產生良性刺激,防止精液倒流。
總結
據估計,在中國使用人工授精的豬場中,只有壹半取得了成功,另壹半則完全失敗或效果不理想。采用壹次性用品和規範的操作程序,實現豬人工授精全過程的免消毒是提高豬人工授精效果的必要措施,能有效提高豬場人工授精的成功率。從而使人工授精的母豬受胎率和產仔數高於原種雜交,效果更可靠、更穩定。