檢測還原糖的試劑是斐林試劑。
壹、斐林試劑介紹
斐林試劑(Fehling's solution)是壹種可以鑒別還原性物質的試劑,壹般由氫氧化鈉與硫酸銅溶液配成,由德國化學家赫爾曼·馮·斐林在1849年發明的。斐林試劑常用於鑒定可溶性的還原性糖的存在,可與還原性糖反應生成磚紅色沈澱。
斐林試劑是二價銅離子的酒石酸鉀鈉配合物,可以被脂肪醛或還原性糖還原為氧化亞銅。斐林試劑為深藍色溶液, 在與脂肪醛或還原性糖***熱時, 藍色消失,析出紅色的氧化亞銅沈澱。
在氧化亞銅析出過程中, 反應液的顏色可能經過由藍色→綠色→黃色→紅色沈澱的逐漸變化,反應較快時,直接觀察到紅色沈澱。
二、斐林試劑的配置方法
配制方法:0.1 g/mL NaOH(甲液)和0.05 g/mL CuSO4(乙液)。甲液配制方法是將50g氫氧化鈉和137g酒石酸鉀鈉溶於500 mL蒸餾水中(貯於帶橡皮塞的瓶中)。乙液配制方法是將34.5g結晶硫酸銅溶於500mL水中,加0.5 mL硫酸。混合均勻。
斐林試劑的使用方法:壹般將斐林試劑甲液和乙液等體積混合(或在2 mL甲液中滴4~5滴乙液),再將混合後的斐林試劑倒入待測液,水浴加熱或直接加熱(高中人教版生物必修壹中為60℃水浴加熱)。
如待測液中存在還原糖,則呈現磚紅色沈澱;如待測液中不存在還原糖,則仍然呈藍色。
斐林試劑的反應機理和應用局限性
壹、反應機理
斐林試劑與還原糖反應的具體機理是,還原糖的醛基和開環的醛基能夠與斐林試劑中的萘胺發生差向異構化反應。在該反應中,硫酸作為催化劑,促使氧化和還原反應迅速進行。最終生成吲哚酮衍生物,產生藍色或紫色的絡合物。
二、應用局限性
斐林試劑可以用於快速、簡便地檢測還原糖的存在,常用於食品、飲料等樣品中的還原糖含量測定。
然而,斐林試劑並不是壹種特異性的檢測方法,它可以與其他具有還原性的物質發生反應。因此,在實際使用過程中,需要註意對可能幹擾的物質進行分離和排除,以確保準確性和可靠性。
斐林試劑檢測還原糖的原理是通過還原糖與試劑中的萘胺反應生成深藍色的絡合物。斐林試劑的組成和性質以及還原糖的性質決定了其反應的發生和結構變化。斐林試劑的應用廣泛,但也存在壹定的局限性,需要在具體實驗設計和分析中註意其特異性和幹擾物質的排除。