1.學習並掌握臨床切片的制作方法。
2.在完成基本實驗要求的基礎上，根據自己的興趣，制作更多的時裝片
二 背景知識（點擊展開）
三 實驗內容
制作洋蔥表皮細胞時裝片
四 實驗用品
滴管、紗布、鑷子、吸墨紙、載玻片、蓋玻片、水、刀片、染色液（碘液）
五實驗材料
洋蔥表皮細胞、其他感興趣的生物材料
六實驗步驟
1.1.擦拭載玻片和蓋玻片（動畫）
2.在載玻片中央滴壹滴水（動畫）（圖 ZX-21）
3.做壹個約 1 cm2 的正方形（使用刀片時要小心），用鑷子撕開內表皮（動畫）（圖 ZX-22）
4.將內表皮放入載玻片上的水中並攤開（動畫）（圖 ZX-23）
5.慢慢蓋上蓋玻片，從壹側開始，不要有氣泡（動畫）（圖 zx-24）
6.
6.在蓋玻片的壹側滴壹滴染色液（動畫）
7.然後用吸墨紙吸去另壹側多余的染色液，使洋蔥表皮細胞均勻染色（動畫）
8.在顯微鏡下觀察。(圖 zx-25）
染色後的洋蔥細胞（顯示細胞核）（圖）
顯微鏡使用註意事項
1.移動顯微鏡時，壹手握住鏡臂，壹手握住鏡座，兩上臂緊貼胸壁。不要壹手斜舉，壹手來回擺動，以防鏡片或其他部件掉落。
2.觀察標本時，顯微鏡應與實驗臺邊緣保持壹定距離（5 厘米），以免顯微鏡傾倒落地。鏡柱與鏡臂的傾斜角不得超過 45 度，用後應立即恢復。
3、使用顯微鏡時，應嚴格按步驟操作，熟悉顯微鏡各部件的性能，掌握粗、細調節旋鈕的旋轉方向和鏡筒升降的關系。將粗調旋鈕旋下，眼睛壹定要聚焦在物鏡上。
4.觀察帶液體的臨時標本時應蓋上薄片，不能使用傾斜接頭，以免液體汙染鏡頭和顯微鏡。
5.粗、微調旋鈕應配合使用，微調旋鈕不能單方向過度旋轉，調節焦距時，要從側面觀察鏡筒向下，以免壓壞標本和鏡頭。
6.用單目顯微鏡觀察標本時，雙眼應同時睜開，左眼觀察物像，右眼用來繪圖，左手調節焦距，右手移動標本或繪圖。
7.嚴禁擰開或更換目鏡、物鏡和聚光器等部件。
8.顯微鏡光學部分有汙物時，可用擦鏡紙或綢布擦凈，切忌用手指、粗紙或手帕擦拭，以防損壞鏡面。
9.凡有腐蝕性和揮發性的化學藥品和藥品，如碘酒、乙醇溶液、酸、堿等都不準與顯微鏡接觸，如不慎汙染，應立即擦拭幹凈。不要任意拆卸目鏡，謹防灰塵落入鏡筒。
10.用油鏡觀察樣品後，再用二甲苯擦拭油鏡鏡片和載物板，以防其它物鏡沾上杉木油。二甲苯有毒，用後應立即洗手。
11.實驗完畢，應取下載玻片，用鏡面紙擦拭鏡片後移開，不要與透光孔相對。用綢布包好，放回鏡箱。切勿將顯微鏡置於直射光下曝曬。
顯微攝影操作的重要註意事項
1、攝影者對顯微攝影裝置的調整：包括兩目鏡間瞳距的調整和個人屈光不正的矯正。前者是指根據個人瞳距調節兩目鏡之間的距離，拉動目鏡或擰動瞳距調節螺釘。校正屈光度時應轉動目鏡鏡筒上的屈光度調節環，使物鏡視場中心的 "十字 "由單線變為雙線，達到完全清晰，且左右眼應分別調節。每個拍攝者都不應省略這壹步。
2.物鏡與照相目鏡不同組合的選擇：照相目鏡除放大功能外，並不具有空間分辨率功能，只有物鏡才具有空間分辨率。壹般情況下，組織切片厚度在 20 μm 以下時，應盡量選擇放大倍數較高的物鏡，例如，要將實物放大 50 倍，選擇 "20×"物鏡與 "2.5×"目鏡組合，其清晰度要高於 "10×"物鏡。10×"物鏡與 "5×"目鏡的組合更高。不過，還需要考慮截面的薄厚和觀察標本的特殊性。例如，在觀察厚度為 30 μm 或以上的冰凍切片上蜿蜒的神經纖維或血管時，低倍物鏡的焦深較長，有利於從不同深度、層次或角度分析不在同壹平面上移動的神經或血管圖像，可以連續觀察。在這種情況下，物鏡和目鏡還可以不同組合多次拍攝，最終選擇最佳效果。
3.聚光燈的使用調節：經驗不足的攝影者往往缺乏對聚光燈高度的調節，不知道光源是否偏離視野中心。很多人只進行物鏡與組織切片之間的所謂 "上聚焦"，而不進行聚光器與組織切片之間的 "下聚焦"，當然也就無法獲得成像底片的最佳清晰度。科勒照明法的操作步驟如下：將視場光闌收縮到最小，使光闌葉片的通孔呈現八角形影像；將八角形膜片的通孔縮小到最小，使膜片的通孔呈現其八角影像；②兩手分別擰動膠片翻拍臺下的左右定心螺釘，使膜片影像與視場中心的圓心重合，以校正光路；③調節聚光器的高度，使八角形膜片影像由模糊變清晰，即．e.,"調焦"；④散大聚光器與組織切面 "降焦"。調整聚光器的高度，使八角形光闌圖像由模糊變清晰，即 "下焦"；③將光闌擴散到 135 畫幅（指常規 135 型底片畫幅，24 mm×36 mm）圖像的外圍。再次微調聚光器的高度，使隔膜影像最清晰。每次改變放大倍率時，都應重復上述調整步驟。
4.提高照片對比度：組織結構的對比度當然取決於組織制備技術的質量。這是提高顯微攝影質量的重要部分。但壹般來說，為了彌補切片對比度的不足，通常可以采用以下補救措施：根據物鏡上的數值孔徑值，即 NA 值，相應地調整聚光器的孔徑光闌。壹般質量好的物鏡，除了標註放大倍數外，還標有 NA 值，NA 值越大空間分辨率相對越高。②如果采用調節轉盤NA值的方法，若因組織準備不充分，圖像對比度仍不足，則可將物鏡孔徑光闌的NA值再適當縮小，如10x物鏡可調至0.19等。(三）如果采取上述措施後圖像反差仍然不好，可將視場光闌從 135（指常規 135 相框的 24 毫米×36 毫米）邊框外移到邊框內，然後在暗房中擴大，再將視場光闌圖像去除。當然，上述後兩種措施，只是略加修改的補救措施。
5.低倍攝影的難度：低倍攝影有其特殊的優勢，例如在1（物）×2.5（眼）的放大倍率下，可以拍攝大鼠大腦壹側切面的全貌，對特定標記物的分布概況有壹目了然的效果，但低倍物鏡的分辨率較低，焦深較長，利用微調螺旋進行精確對焦有壹定難度。為了避免視力的個體差異，應采取欠焦、過焦、正焦三個步驟，調焦不宜重復。
6.油浸鏡片的使用：100×物鏡多為油浸鏡片，但使用後往往擦不幹凈，鏡片損壞。另壹種方法是滴加超純水或雙蒸餾水，觀察效果與雪松油差別不大。由於 100×物鏡與切片的距離很近，很容易碰到鏡片，必須先將 40×物鏡調好焦距，再轉到 100×物鏡上，輕輕轉動調焦微調螺釘對準焦距。為避免鏡片損壞，新的 100×物鏡常有彈簧裝置，可使鏡片微脹微縮，避免損壞。
7.其他註意事項：按常規，彩色膠片應加 LBD（色溫偏移）濾光片，黑白膠片應加 IF550（綠色）濾光片。LBD 濾色片能使日光型彩色膠卷獲得最佳色溫補償，IF550 濾色片能使黑白卷的感光度與人眼接近。雖然有人認為不需要加濾色片，但由於攝影取決於膠片的化學感光度，而不取決於人眼對視野的視覺感受，所以還是加濾色片為好。曝光時間的選擇也是壹個需要註意的問題。已知在光照強度和曝光時間這兩個參數之間，有許多不同的組合，都在曝光的 "安全 "範圍內，但所謂的 "安全 "範圍，並不等於最佳條件，所以作者認為限定曝光時間還是很有必要的，其道理就在於膠片的化學感光度有壹定的局限性，壹張 36 格的膠片如果曝光時間隨意改變，36 格之間的差別會很大，而沖洗膠片是在同樣的條件下進行的，難免有部分格沖洗不好。根據筆者的經驗，曝光時間壹般控制在 0.5～1 s，底片的成像效果較好。在拍攝時要把結構重點放在視場中心，因為自動曝光裝置測得的曝光時間是以視場中心為標準的，離中心越遠越不準。有時為了考慮結構的局部解算關系，而結構的焦點又不在視場中心，則可采取點（斑）曝光法。如果需要拍攝幾張結構的切片，然後進行拼接，可以在 New Vanox 顯微攝影儀上裝有鎖匙（lock），有利於解決這個問題，以便使同壹結構的幾幅照片的曝光時間相同，然後在洗照片時將這組照片同時置於顯影液和定影液中。