總大腸菌群可來自人和溫血動物的腸道和自然環境，包括壹大群能發酵乳糖、產酸產氣、37℃24小時需氧兼性厭氧的革蘭氏陰性桿菌。它們在伊紅-美蘭平板中的生長特征為:(1)深紫色，有金屬光澤；(2)紫黑色，無或稍有金屬光澤；(3)薰衣草菌落。
耐熱大腸菌群又稱糞大腸菌群，主要包括埃希氏菌和耐熱克雷伯氏菌[6]。它們是壹群大腸菌群，通過升高溫度可以在44.5℃生長。只有來自動物和人類糞便的大腸桿菌才能生長，而來自自然界的大腸桿菌不能耐熱生長[8-9]。
大腸桿菌，原名大腸桿菌，廣泛分布於人類和溫血動物的腸道內。是人和動物腸道內好氧菌的優勢菌群，是維持宿主健康部分生理功能所必需的。雖然大多數大腸桿菌是非致病性的，但當宿主免疫力下降或細菌侵入腸道外部組織或器官時，可引起腸外感染。有些血清型可產生毒素，為致病性大腸桿菌，可引起人類腹瀉。因此，飲用水中的大腸桿菌已成為腸道疾病的重要病原體之壹。[2]
它們的從屬範圍的邏輯關系如下
？《生活飲用水衛生標準》(2006年版)增加了對飲用水中大腸桿菌的檢測。
為提高實驗室檢測能力，近期，我實驗室開展了飲用水大腸桿菌檢測質量控制活動，質量控制活動達到了以下目標:
1.利用工作中分離的三種細菌，即耐熱大腸菌群、標準菌株產氣腸桿菌和標準菌株大腸桿菌，觀察EC-MUG培養基中不同大腸菌群的熒光，獲得陽性樣品的熒光視覺效果。
二是用酸浸泡試管，蒸餾水處理，自來水直接清洗，找出大腸桿菌熒光效應的影響因素。
第三，對比北京路橋EC-MUG培養基和青島海博EC-MUG培養基使用的試劑，評價實驗室使用的試劑好不好。
1材料和儀器
1.1 EC-MUG中號，購自北京路橋有限公司和青島海博。
1.2曙紅美蘭培養基，購自北京路橋有限公司..
1.3營養肉湯，購自北京路橋有限公司。
1.4培養箱，36℃1℃；44.5 0.5℃;波長為366納米的紫外線燈
2方法和結果
2.1方法原理
大腸桿菌能特異性產生β-葡萄糖醛酸酶，該酶能分解培養基上的EC-MUG熒光底物釋放熒光產物，使培養基在366 nm紫外光下產生特征熒光，該技術可用於檢測大腸桿菌。
2.2操作步驟和結果
上圖為44.5℃EC-MUG培養基中培養的產氣腸桿菌和大腸桿菌。在日光燈的背景下，產氣腸桿菌的液體是清澈的，說明產氣腸桿菌在44.5℃不能生長繁殖。大腸桿菌的液體濁度表明，大腸桿菌在44.5℃下可以生長繁殖。
在熒光燈觀察的背景下，用366nm紫外燈觀察培養的EC-MUG培養基。產氣腸桿菌在沒有藍光的情況下依然清晰；不同稀釋度的大腸桿菌菌液有明顯的藍光，藍光之間無明顯差異。因此，在觀察大腸桿菌發酵效果時，可以用366nm紫外燈在普通光下觀察，結果顯著。
上圖為上述培養的EC-MUG培養基在暗室中的實驗效果。大腸桿菌發酵後產生熒光，不同稀釋度的菌液無顯著差異。負效應和產氣腸桿菌有非常明顯的區別。產氣腸桿菌培養管熒光微弱，可能是EC-MUG培養基本身有熒光的事實！
這張圖是無菌蒸餾水和EC-MUG培養基的效果對比。1和2試管泡酸，5和6不泡酸。
暗室觀察，EC-MUG培養管中的產氣腸桿菌與蒸餾水相比有明顯的熒光。在實際觀察中，這種熒光比較弱，但還是會產生熒光。所以普通試管和蒸餾水產生的熒光可以忽略不計，但試劑本身產生壹定量的熒光是實驗事實。
所以為了減少個人觀察經驗的不足，建議在實驗的過程中，進行帶標簽的對比觀察，讓我們在腦海中有壹個熒光陰陽的直觀效果。
上圖耐熱大腸菌群是日常工作中檢測到的工作菌株。實驗室證實，它們能在伊紅美蘭平板上產生鐵銹樣金屬光澤大腸菌群，屬於耐熱大腸菌群。目前，該菌株在44.5℃的EC-MUG培養基中也能混濁生長。
在日光燈的背景下，用三個紫外燈的366nm紫外光波觀察，每個試管都有微微的藍光，但實際視覺觀察不是很強。手機照片顯示有微量熒光效果，產氣腸桿菌顏色似乎更深。可以判斷10試管全部為大腸桿菌陰性。
上圖為暗室中產氣腸桿菌和工作菌株耐熱大腸菌群的EC-MUG熒光效果。手機照片呈現強熒光，實際視覺效果較弱。如果沒有陽性對照比較，很容易誤認為大腸桿菌陽性結果。但在暗室中觀察，耐熱大腸菌群和產氣腸桿菌無差異，也可判定結果為陰性。
比較了產氣腸桿菌和實驗室耐熱大腸菌經EC-MUG高溫培養後的熒光效果。產氣腸桿菌在高溫下不能生長，液體清澈，熒光底物不能分解。我們實驗室的嗜熱大腸桿菌能在高溫下生長，所以液體是渾濁的。然而，該工作菌株不分解培養基上的MUG熒光底物以釋放熒光產物。與產氣腸桿菌(市售標準菌株)相比，判定為熒光陰性，因此本實驗室的這株嗜熱大腸菌有可能屬於耐熱克雷伯氏菌。(耐熱大腸菌群又稱糞大腸菌群，由埃希氏菌和耐熱克雷伯氏菌組成。不是細菌學分類命名，而是衛生菌領域的術語。)
？下圖顯示了在同壹處理過的試管中使用兩種不同試劑進行EC-MUG培養的效果:
暗室觀察熒光效果圖，北京陸橋產品陰陽對比明顯。
日光燈和紫外燈下，北京陸橋產品陰陽對比明顯。
在暗室觀察熒光效果圖，青島海博產品有明顯的陰陽對比。
日光燈下，紫外燈觀察熒光效果圖，青島海博產品陰陽對比明顯。
上圖是正常光照下的實驗培養結果照片。
通過比較北京路橋和青島海博兩種試劑，發現兩種試劑在試管中以不同方式培養大腸桿菌，稀釋倍數不同，產生的熒光效果相同。
討論
3.1，相關文獻和實驗結果，試管本身會產生微量熒光[3]。這個實驗中使用的試管分為兩部分。壹部分是把試管用酸浸泡七天以上，然後用蒸餾水沖洗。另壹部分直接用自來水清洗，兩種試管都經過165℃高溫滅菌2小時以上。這兩種類型的試管分別裝有蒸餾水對照、產氣腸桿菌(標準菌株)、耐熱大腸桿菌(工作菌株)和大腸桿菌(標準菌株)。同壹菌株在不同方法處理的試管中實驗結果沒有差異，說明壹般試管可能產生的熒光對實驗沒有影響。
3.2、EC-MUG培養基試劑本身培養後會溢出壹些熒光物質，如果沒有陽性對照進行比較，可能會被誤認為真陽性，造成假陽性結果。所以初級實驗人員或日常工作要帶標準菌株同步實驗，觀察實驗結果。
3.3.兩個試劑廠家生產的EC-MUG培養基從陽性結果看有明顯的熒光效應。在實際操作中，當日常飲用水中大腸桿菌檢測結果與陰性對照相同時，可報為未檢出大腸桿菌的結果。
3.4、GB/T 5750.12-2006大腸桿菌的檢測有多管發酵法、濾膜法和大腸桿菌酶底法。推薦的第壹種方法是多管發酵法，這種方法基於對總大腸桿菌發酵的乳糖蛋白腖的檢測和選擇性EC-MUG培養，減少了來自批量工作的工作量和工作費用。在日常飲用水的監測中，第壹種方法比第二種方法簡單易行。與第三種酶法相比，更經濟實用。所以第壹種多管發酵法在常規檢測工作中還是值得推廣的。
3.5.不同稀釋度的大腸桿菌在EC-MUG培養基中的熒光效果無顯著差異。因此，總大腸菌群發酵結束後，在接下來的實驗操作中，移液管要壹管壹用，不同的發酵管不能交叉汙染，防止陽性值過高。
參考
生活飲用水衛生標準GB5749-2006。北京:中國標準出版社，2007
[2]，zzzzzz .在水中，mmmmmmmj】。河南預防醫學雜誌2009 20(3):185-216。
[8] GGkkk。生活飲料[J]。預防醫學論壇報，2008，14(12):1163-1164。
[9] HHHHHHHH等.中國南方農業調查[J].龔* * *衛生與預防醫學，2014，25 (4): 11-13。
[J]gggg .環境科學與技術，2010，23 (1): 67-70
[3]