(5)取3支試管，每支試管加入濾液5mL，取3支試管作測量管，加入空白對照溶液5mL，取3支試管作空白管，加入應用標準溶液5mL，在上述每支試管中加入0.5ml 0.1%亞硝酸鈉溶液作標準管(6)，混勻，靜置3min (7)，在每支試管中加入0.5%氨基磺酸胺溶液。靜置2min(8)，分別加入0.1% N-(1萘基)-乙二胺二鹽酸鹽溶液2.5mL，混勻，靜置10min (9)，與721分光光度計在550nm波長下比色。用空白管將光密度調至零點，讀取標準管並測定管的光密度，計算出遊離磺胺的含量。(10)的公式如下:管光密度的測定遊離磺胺含量= - 0.00375 mg/ml × 40標準管光密度2。組織磺胺濃度測定法(1)采血後，處死動物，取肌肉、肝臟和腎臟組織2g。(2)將組織切成塊，在研缽中加入5mL蒸餾水研磨，取上清液，用蒸餾水沖洗殘渣，回收至帶刻度的試管中，得到16mL。(3)加入4ml 15%三氯乙酸，混勻，靜置，過濾。(4)取濾液，處理並測定相同血藥濃度。(5)公式如下:管光密度的測定= - 0.00375 mg/ml × 10標準管光密度V， 實驗結果時間編號1 2 3平均值25分鐘0.160 0.160 0.160表1:30分鐘1h 2h 3h 0.258/0.450 0.640 0 0.189 0.238 0.2160 . 484樣品濃度25min 0.293表三:藥物濃度(mg/ml) 30min 1h 2h 3h肝臟0.384/0.8161.1700.886腎臟4.3肌肉7.09 VI。結果討論和總結。
1，股動脈分離手術。由於缺乏手術機會、經驗和動手能力，分離股動脈需要花費很長的時間和精力。所以10分鐘的血樣不是及時取的，而是25分鐘取的。股動脈的分離和采血要註意:註意動靜脈的區分和股動脈采血時的鈍性分離；心臟附近穿線結紮時不要刺破神經；少穿肌肉和皮膚；分離時註意神經的分離。采血後註意清理血管內的血液，避免堵塞血管；下次采血時血不能流出，用手指輕輕按壓，排出血管內的血塊。2、分光光度計的使用操作。因為測定吸光度要用壹套比色杯，但在實際操作中，比色杯使用混亂，吸光度的測定存在較大誤差。分光光度計使用註意事項:(1)為了防止光電池疲勞。不測量時，必須打開比色皿的黑盒蓋，切斷光路，以延長光電管的使用壽命。(2)手持比色皿時，手指只能握住比色皿的磨砂玻璃面，不要接觸比色皿的透光面，以免汙染。(3)清洗比色皿時，壹般先用水沖洗，再用蒸餾水沖洗。每次實驗後立即清洗比色皿。(4)測量有色溶液的吸光度時，壹定要用有色溶液多次沖洗比色皿內壁，以免改變有色溶液的濃度。另外，在測定壹系列溶液的吸光度時，通常是按照從稀到濃的順序測定，以減少測量誤差。(5)在實際分析工作中，通常根據溶液濃度的不同，選擇不同槽厚的比色皿，將溶液的吸光度控制在0.2 ~ 0.7。3.實驗錯誤總結:在(1)25分鐘和30分鐘時，由於股動脈分離不當，從耳動脈取血。但由於抽血時間長，血樣加到蒸餾水中有很多血塊，所以前兩次測得的血藥濃度較小。但在采血壹小時時，由於操作不當，多取了血樣，使得1h測得的數據過大，無法讀取吸光度數據。(2)實驗操作中沒有嚴格的要求。加樣時用的是移液管而不是精確的移液管，所以藥物的體積壹定是導致數據不準確的重要因素。
(3)吸光度的測量存在較大誤差。吸光度值要控制在0.2-0.7之間，測出來的值會比較準確，但是有些測出來的數據超出了這個範圍，所以有誤差。4.總結雖然實驗數據很不準確，令人失望，但在這次實驗中，我學到了股動脈的分離技術和動物體內磺胺濃度的測定方法，對實驗團隊和工作有了進壹步的了解和認識。雖然實驗前已經預習過，但還是遇到了很多意想不到的錯誤，這讓我更加意識到熟能生巧的意義。另外，我壹定要多做實驗，提高自己的實驗能力，還要在失敗中積累經驗，不斷總結，不斷反思，這樣才能做好研究。感謝您的閱讀，祝您生活愉快。
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實驗2動物體內磺胺濃度的測定
實驗2動物體內磺胺濃度的測定
系:理學院專業:農藥科學。:09310110020姓名:王毅
實驗2動物體內磺胺濃度的測定
1，用途
掌握測定動物血液和組織中磺胺類藥物濃度的方法&重氮化偶合比色法。
2.原則
不同時間采集的血樣中帶有遊離氨基的磺胺嘧啶，在酸性介質中用亞硝酸重氮化後，可與N-(1萘基)乙二胺偶合生成紫色偶氮染料。以同時處理的磺胺嘧啶標準溶液為對照，用721分光光度計比色法測定不同時間組織和血中磺胺嘧啶濃度。
第1頁
由於亞硝酸不穩定，實驗中采用三氯乙酸和亞硝酸鈉反應制備亞硝酸。殘留的過量亞硝酸鹽影響測定，用氨基磺酸胺分解除去。
3.實驗材料
1，實驗動物
壹只兔子。2、設備和儀器
721光譜儀、臺秤、止血鉗、眼鉗、手術刀、手術剪、保定架、註射器、燒杯、三角燒瓶、試管、漏鬥、研缽、濾紙等。3.藥物和試劑
10%磺胺嘧啶鈉註射液
第2頁
15%三氯乙酸溶液0.1%亞硝酸鈉溶液0.5%氨基磺酸胺溶液
0.1% N-(1萘基)-乙二胺溶液磺胺嘧啶鈉貯存標準溶液磺胺嘧啶鈉應用標準溶液。
4.檢測方法
1和磺胺嘧啶鈉的血藥濃度測定
(1)取動物，稱重，固定，剪斷，分離股動脈，準備近端和遠端結紮。
切斷股動脈，收集0.5mL空白血，放入裝有15.5 mL蒸餾水的燒瓶中，混勻，靜置15min。
第3頁
(2)單劑量耳靜脈註射(100mg/kg)加2.3ml 10%磺胺嘧啶鈉註射液。(3)取樣:
靜脈註射取樣時間:給藥後25分鐘、30分鐘、65±38±0小時、2小時、3小時股動脈采血0.5毫升。(4)在65438±05.5ml蒸餾水中加入每份血樣0.5mL，混勻，放置65438±05分鐘；加入15%三氯醋。
4毫升酸，混合均勻，放置2分鐘，過濾。
(5)取3支試管，每支試管加入5mL濾液，即為測量管。
取3支試管，加入5mL空白對照溶液，取3支試管作空白管，加入5mL應用標準溶液作標準管。
第4頁
(6)在上述各管中加入0.1%亞硝酸鈉溶液0.5毫升，混勻，放置3 min。(7)加入0.5毫升0.5%氨基磺酸胺溶液，混合均勻，靜置2分鐘。
(8)分別加入2.5毫升0.1% N-(1萘基)-乙二胺二鹽酸鹽溶液，充分混合，放置10分鐘(9)用721分光光度計在550納米波長下比色。
用空白管將光密度調至零點，讀取標準管並測定管的光密度，計算出遊離磺胺的含量。(10)公式如下:
測量管子的光密度
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遊離磺胺含量= - 0.00375 mg/ml × 40標準管光密度。
2、組織磺胺藥物濃度測定方法
(1)采血後，處死動物，取肌肉2g，肝臟2g，腎臟2g。
(2)將組織切成塊，在研缽中加入5mL蒸餾水研磨，取上清液，用蒸餾水沖洗殘渣。
並在帶刻度的試管中回收，* * *得到16mL。
(3)加入4ml 15%三氯乙酸，混勻，靜置，過濾。(4)取濾液，處理並測定相同血藥濃度。(5)公式如下:
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測量管子的光密度
遊離磺胺含量= - 0.00375毫克/毫升* 10標準管光密度。
動詞 （verb的縮寫）實驗結果
時間沒有。1 2 3平均值25min 0.160 0.160 0.160 0.160表1:30min 1h 2h 3h 0.258/0.450 0 0.640 0 0.189 0.210//0.. 484樣品濃度25min 0.293表三:藥物濃度(mg/ml) 30min 1h 2h 3h肝臟0.384/0.8161.1700.886腎臟4.3肌肉7.09 VI。結果討論和總結。
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1，股動脈分離手術。
由於缺乏手術機會、經驗和動手能力，分離股動脈需要花費很長的時間和精力。所以10分鐘的血樣不是及時取的，而是25分鐘取的。
股動脈分離采血的註意事項；
股動脈采血時註意動靜脈的區分和鈍性分離；心臟附近穿線結紮時不要刺破神經；少穿肌肉和皮膚；分離時註意神經的分離。采血後註意清理血管內的血液，避免堵塞血管；下次采血時血不能流出，用手指輕輕按壓，排出血管內的血塊。
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2、分光光度計的使用操作。
因為測定吸光度要用壹套比色杯，但在實際操作中，比色杯使用混亂，吸光度的測定存在較大誤差。使用分光光度計的註意事項:
(1)以防止光電池疲勞。不測量時，必須打開比色皿的黑盒蓋，切斷光路，以延長光電管的使用壽命。
(2)手持比色皿時，手指只能握住比色皿的磨砂玻璃面，不要接觸比色皿的透光面，以免汙染。
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(3)清洗比色皿時，壹般先用水沖洗，再用蒸餾水沖洗。每次實驗後立即清洗比色皿。
(4)測量有色溶液的吸光度時，壹定要用有色溶液多次沖洗比色皿內壁，以免改變有色溶液的濃度。另外，在測定壹系列溶液的吸光度時，通常是按照從稀到濃的順序測定，以減少測量誤差。
(5)在實際分析工作中，根據溶液濃度的不同，通常選用不同槽厚的比色皿，將溶液的吸光度控制在0.2 ~ 0.7。3.實驗中的錯誤總結:
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在(1)25分鐘和30分鐘時，由於股動脈分離不當，從耳動脈采血。但由於采血時間較長，血樣加入蒸餾水中時已經有很多血塊，所以前兩次測得的血藥濃度較小。但在采血壹小時時，由於操作不當，多取了血樣，使得1h測得的數據過大，無法讀取吸光度數據。
(2)實驗操作中沒有嚴格的要求。加樣時用的是移液管而不是精確的移液管，所以藥物的體積壹定是導致數據不準確的重要因素。
(3)吸光度的測量存在較大誤差。吸光度值要控制在0.2-0.7之間，測出來的值會比較準確，但是有些測出來的數據超出了這個範圍，所以有誤差。