適用範圍:本方法采用高效液相色譜法測定心腦安顆粒中葛根素的含量。
本方法適用於心腦安顆粒中葛根素含量的測定。
方法原理:供試品研細末,用甲醇超聲提取,過濾,高效液相色譜法(HPLC)測定,紫外吸收檢測器在254 nm波長處檢測葛根素的吸收值,計算葛根素的含量。
試劑:
1.甲醇(色譜醇)
2.二次重蒸餾水
3.磷酸
4.三乙胺
5.甲醇
儀器:
1 高效液相色譜儀
1.2 色譜柱:填料為十八烷基矽鍵合矽膠。
1.3 紫外吸收檢測器
2 色譜條件
2.1 流動相:甲醇+水(20:80,含 0.0024% 磷酸和 0.0012 三乙胺,pH 4.5);流速:1.0 ml/min:
2.2 檢測波長:254 nm
2.3 溫度:30°C:30°C.
樣品制備:
1.制備對照品溶液
精密稱取葛根素對照品10mg,置100mL量瓶中,加甲醇溶解並稀釋至刻度,搖勻,精密量取2mL,置25mL量瓶中,加甲醇至刻度,搖勻,作為對照品溶液。
2.供試品溶液的制備
供試品溶液的制備
將心痛定顆粒制備成細粉,稱取0.3g,置於50ml量瓶中,加入甲醇50ml,精密稱定,超聲處理15min,置室溫。補充甲醇至原重量,加入流動相稀釋至刻度,搖勻,過濾,棄去初濾液。取濾液 5 ml 置 25 ml 量瓶中,加流動相稀釋至刻度,作為供試品溶液。
註:"精密稱量 "是指重量應精確到稱量重量的千分之壹。"精密測量 "是指體積的精度應符合國家標準對移液器體積精度的要求。
操作步驟:用移液管分別吸取上述對照品溶液和供試品溶液各 20μL 於高效液相色譜儀中,用紫外吸收檢測器測定波長為 254nm 的葛根素吸收值,計算葛根素的含量。
參考文獻:中國醫院藥學雜誌,離子對色譜法測定心腦樂顆粒中的葛根素,2002,22(5),P261.