二、試劑
1）甲苯
2）1%羧甲基纖維素溶液：1g 羧甲基纖維素鈉，用50%的乙醇溶至100ml。
3）pH5.5醋酸鹽緩沖液：
0.2mol/L 醋酸溶液 11.55ml 95% 冰醋酸溶至1L；
0.2mol/L 醋酸鈉溶液 16.4g C2H3O2Na或27.22g C2H3O2Na.3H2O溶至1L；
取11ml 0.2mol/L 醋酸溶液和88ml 0.2mol/L 醋酸鈉溶液混勻即成PH 5.5醋酸鹽緩沖液。 4）3,5-二硝基水楊酸溶液：稱1.25g二硝基水楊酸，溶於50ml 2mol/LNaOH和125ml水中，再加75g酒石酸鉀鈉，用水稀釋至250ml（保存期不過7天）。 5）葡萄糖標準液（1mg/mL）
預先將分析純葡萄糖置80℃烘箱內約12小時。準確稱取50mg葡萄糖於燒杯中，用蒸餾水溶解後，移至50mL容量瓶中，定容，搖勻（冰箱中4℃保存期約壹星期）。若該溶液發生混濁和出現絮狀物現象，則應棄之，重新配制。
三、操作步驟
葡萄糖標準曲線：分別吸1mg/mL的標準葡糖糖溶液0、0.1、0.2、0.4、0.6、0.8mL於試管中，再補加蒸餾水至1mL，加DNS溶液3ml混勻，於沸騰水浴中加熱5min，取出立即泠水浴中冷卻至室溫，以空白管調零在波長540nm處比色，以OD值為縱坐標，以葡萄糖濃度為橫坐標繪制標準曲線。
稱10g土壤置於50ml三角瓶中，加入1.5ml甲苯，搖勻後放置15min，再加5ml 1%羧甲基纖維素溶液和5ml pH5.5醋酸鹽緩沖液，將三角瓶放在37℃恒溫箱中培養72h。培養結束後，過濾並取1ml濾液，然後按繪制標準曲線顯色法比色測定。（為了消除土壤中原有的蔗糖、葡萄糖而引起的誤差，每壹土樣需做無基質對照，整個試驗需做無土壤對照；如果樣品吸光值超過標曲的大值，則應該增加分取倍數或減少培養的土樣。）
四、結果計算
纖維素酶活性以72h，1g幹土生成葡萄糖毫克數表示。 纖維素酶活性=（a樣品－a無土－a無基質）×n／m
其中：a樣品、a無土、a無機質分別表示其由標準曲線求的葡萄糖毫克數；n為分取倍數；m表示烘幹土重。