動物細胞模型怎麽做,具體說明如下:
1、準備材料
實驗器材,細胞培養皿、細胞刮刀、移液管、滴管、顯微鏡、超凈工作臺等。試劑,DMEM培養基、胎牛血清、青鏈黴素、磷酸鹽緩沖液(PBS)、0.25%胰蛋白酶等。細胞種源,動物細胞系或組織樣本。
2、制備細胞培養液
配制DMEM培養基,添加適量胎牛血清和青鏈黴素。用磷酸鹽緩沖液(PBS)清洗細胞培養皿,並加入適量細胞培養液。
3、細胞計數
首先,要用移液管取適量細胞培養液,滴入細胞計數板。觀察並計數細胞數量,然後,計算出每毫升細胞數量。
4、接種細胞
將細胞培養皿放置在超凈工作臺中,用75%酒精擦拭皿外壁,保持皿內無菌。用移液管取適量細胞培養液,滴入細胞培養皿中。用細胞刮刀輕輕刮取細胞,使細胞均勻分布在培養液中。將培養皿放入二氧化碳培養箱中,保持溫度在37℃,濕度為95%。
5、觀察細胞生長
實驗人員要每天觀察細胞生長情況,記錄細胞數量和形態變化。調整二氧化碳培養箱的參數,保持適宜的pH值和氣體濃度。
6、收集細胞樣本
當細胞生長到壹定密度時,用0.25%胰蛋白酶消化細胞。用移液管將消化後的細胞收集到離心管中。離心去除上清液,用磷酸鹽緩沖液(PBS)清洗細胞沈澱。重新懸浮細胞,進行下壹步實驗或保存。
7、保存細胞系
實驗人員要將收集到的細胞懸浮液轉移到細胞培養皿中。加入適量胎牛血清,使血清濃度為10%。將培養皿放入低溫冰箱中,進行長期保存。
8、驗證細胞系
對保存的細胞系進行復蘇和傳代。通過顯微鏡觀察細胞的形態和生長情況。進行必要的生物學檢測和功能實驗,以驗證細胞的性質和特點。