Fluorometry
3 註釋熒光分析又稱熒光光度分析，是光化學分析方法之壹。它是根據物質在光照射下產生的熒光強度來確定物質濃度的壹種分析方法。它廣泛應用於有機化合物的分析，特別是用於研究藥物的體內代謝，越來越多地應用於熒光的測定。
某些物質被紫外線或可見光激發後，能發出比激發光波長更長的熒光。物質的激發光譜和熒光發射光譜可用於物質的定性分析。當激發強度、波長、溶劑和溫度固定時，在壹定濃度範圍內，發射光的強度與溶液中物質的濃度成正比，可用於定量分析。熒光分析法的靈敏度壹般高於紫外分光光度法或比色法，濃度過大的溶液會產生 "自熄 "效應，以及由於溶液靠近液面時會吸收激發光，使發射光的強度下降，導致發射光的強度與濃度不成正比，因此熒光分析應在低濃度的溶液中進行。
所用儀器為熒光儀或熒光分光光度計，根據每種藥物下的規定選擇激發光和發射光的波長，配制對照溶液和供試液。
由於絕對熒光強度不易測定，所以熒光分析法是在壹定條件下，用對照品溶液測定線性範圍內的濃度，然後在每次測定前，用壹定濃度的對照品溶液校正儀器的靈敏度；再在相同條件下，讀取對照品溶液及其試劑空白和試劑溶液及其試劑空白的讀數，用下式計算被測物的濃度：
RRib
C = ───────────────×Cr
Rr-Rrb
其中
C 為試液的濃度；
Cr 為對照溶液的濃度；
R 是測試溶液的讀數；
Rib 是測試溶液試劑空白的讀數；
Rr 是對照溶液的讀數；
Rrb 是對照溶液試劑空白的讀數。
由於熒光分析法中濃度與讀數之間的線性關系較窄，（R-Rib）/（Rr-Rrb）應在 0.50 至 2.0 之間；如超過此值，則應調整溶液濃度後再測。
對於易發生光分解的物質，可選擇激發和發射波長與之相近的光穩定物質溶液，如藍色熒光可用硫酸奎寧水溶液稀硫酸溶液，黃綠色熒光可用熒光素鈉水溶液，紅色熒光可用羅丹明 B 水溶液等、先將其讀數與對照溶液進行比較，確定兩者之間的關系，再用試驗溶液代替對照溶液進行測定，以校準儀器，確定對照與試驗溶液之間的關系，校準儀器的靈敏度。