(1)獲取真核生物的目的基因壹般選擇從cDNA文庫中獲取.
(2)將目的基因導入微生物細胞時,需要用Ca2+(或CaCl2)處理微生物細胞,使之處於易於吸收周圍環境中DNA分子的感受態.
(3)質粒上含有青黴素抗性基因,所以可以用含有青黴素的選擇培養基篩選含有目的基因的大腸桿菌;對培養基應采用高壓蒸汽滅菌.
(4)檢測目的基因是否翻譯形成相應的蛋白質,應采用抗體-抗原雜交方法檢測.大腸桿菌是原核生物,沒有內質網和高爾基體,不能對胰島素原進行加工,因此不能產生具有活性的胰島素.
故答案為:
(1)cDNA
(2)Ca2+ 或CaCl2
(3)青黴素高壓蒸汽
(4)抗體抗原雜交(或抗體抗原特異結合)否 大腸桿菌無內質網和高爾基體
,5,利用基因工程生產胰島素的過程如下圖,據圖回答:
(1)獲取胰島素基因,應選擇從______文庫中獲取.
(2)將重組質粒導入大腸桿菌中,壹般用______處理大腸桿菌使其處於感受態.
(3)對含有目的基因的大腸桿菌篩選,應制備選擇培養基,除營養成分外還應加入______,對培養基應采用______滅菌.
(4)轉基因大腸桿菌是否產生了胰島素原,應采用______方法檢測.大腸桿菌能否產生有活性的胰島素?______,原因是______.