大多數貓頭鷹棲息在樹上，有些種類棲息在巖石和草地上。
貓頭鷹絕大多數是夜行動物，白天臥，晚上出。白天在樹的洞穴或屋檐下不容易看到它們，但有些物種，如斑鷸“Xiliú”、條紋貓頭鷹和雕鸮，白天也是不安分和孤獨的，經常外出活動。壹直在夜間活動的物種，壹旦在白天活躍起來，往往會像醉漢壹樣飛來飛去。
貓頭鷹的食物主要是老鼠，也有昆蟲、鳥、蜥蜴、魚等動物。它們都有吐“食丸”的習慣，具有消化能力，食物往往是整個吞下，食物中不易消化的骨頭、羽毛、毛發、甲殼素等殘渣整合成塊，形成壹小團通過食道和口腔吐出，稱為食丸，也叫唾液。科學家可以根據對可食用藥丸的分析，知道他們的飲食習慣。