以乳酸為底物的反應稱為順向反應，以丙酮酸為底物的反應稱為逆向反應。順向反應的優點是：
(1)此法所需的氧化型輔酶Ⅰ(NAD+)較逆向反應需用的還原性輔酶Ⅰ(NADH)穩定，易得純品，含抑制LDH的雜質少，價格也較低；
(2)乳酸鈉(或乳酸鋰)底物比丙酮酸底物穩定；
(3)過量乳酸對LDH的抑制低於過量丙酮酸對LDH的抑制。
逆向反應的優點：
(1)NADH用量少，只是正向反應所用NAD+的3％；
(2)酶反應速率也比乳酸鹽法快，單位時間內吸光度的變化較大，能使用比較少的樣品在較短的時間內進行測定；
(3)酶活力隨時間的線性關系較長；
(4)用NADH或丙酮酸鹽啟動反應，其反應速度相同，而由乳酸鹽到丙酮酸鹽的反應中，LDH活力取決於使用的啟動劑。