1.澱粉酶測定
為主要診斷依據，用蘇氏比色法（Somogyi）測定，正常兒均在64單位以下，而急性胰腺炎則高達500單位以上。血清澱粉酶值在發病3h後即可增高，並逐漸上升，24～48h達高峰以後又漸下降。尿澱粉酶也有同樣變化。正常小於64單位，但病後升高較慢，病變緩解後下降的時間比血清澱粉酶遲緩，且受腎功能及尿濃度的影響，故不如血清澱粉酶準確。其他有關急腹癥如腸穿孔、腸梗阻、腸壞死時，澱粉酶也可升高，很少超過300～500單位。
2.血清脂肪酶測定
於發病24h後始升高，持續高值時較長，可為晚期疾病的診斷方法。正常值為0.5～1U（Comfort）。
3.腹腔穿刺
嚴重病例有腹膜炎者，難與其他原因所致腹膜炎相鑒別時，如胰腺遭到嚴重破壞、血清澱粉酶反而不增高，此時腹腔液多可行腹腔空刺，根據腹腔滲液的性質（血性、混有脂肪壞死）及澱粉酶增高，有助於診斷。
4.B超檢查
對水腫型胰腺炎及後期並發胰腺囊腫者確診有價值，前者顯示胰腺明顯增大，後者顯示囊性包塊與胰腺相連。
5.澱粉酶和肌酐清除率比值
尿澱粉酶/血清澱粉酶×血肌酐/尿肌酐×100%=正常比值為1%～4%，大於6%提示為急性胰腺炎。