微生物在中藥中的應用摘要：中藥是中華民族的瑰寶，幾千年來中醫藥為我國人民的健康做出了巨大的貢獻，形成了系統的中醫藥理論和大量經實踐檢驗的成藥驗方。中藥作為天然藥物正逐步引起世界的關註。微生物是壹切肉眼看不見或看不清的微小生物，包括細菌、病毒、真菌以及壹些小型的原生動物、顯微藻類等在內的壹大類生物群體，它個體微小，卻與人類生活關系密切。利用微生物廣泛涉及健康、食品、醫藥、工農業、環保等諸多領域。微生物在中藥領域有著廣泛的運用。微生物可運用於中藥菌體發酵、中藥炮制等。關鍵詞：微生物 中藥 發酵技術 發酵中藥 中國是中醫中藥的起源，幾千年來中醫藥為我國人民的健康做出了巨大的貢獻，並逐漸積累，形成了系統的中醫藥理論和大量經實踐檢驗的成藥驗方。中藥行業是我國具有比較優勢的少數幾個產業之壹，在自然科學領域，我國最有實力、最有優勢、最有後勁的就是中醫藥。它是中華民族的瑰寶，也是世界傳統醫學中重要的組成部分，在預防和治療疾病方面發揮著重要的作用。正受到各國人民和研究人員的關註和重視。目前各國都在從中藥等天然產物中尋找有效藥源。微生物是壹切肉眼看不見或看不清的微小生物，包括細菌、病毒、真菌以及壹些小型的原生動物、顯微藻類等在內的壹大類生物群體，它個體微小，卻與人類生活關系密切。涵蓋了有益有害的眾多種類，廣泛涉及健康、食品、醫藥、工農業、環保等諸多領域。微生物學是生命科學中發展較快的學科之壹，在生命科學中地位越來越重要，成為各門學科都離不開的重要工具。在制藥藥現代化進程中，微生物顯示出了越來越重要的作用，充分利用現代微生物學成果可以更好地促進制藥的現代化，也為微生物學的發展開辟了新領域。1 微生物學理論促進了微生物相關中藥的發展對傳統微生物中藥的生物學研究加深了傳統微生物中藥的應用和產品開發，特別是多種中藥微生物純培養物代替原藥材的研究尤其引人註目，如靈芝、猴頭等各種藥用菌的栽培, 對保護環境、保護資源、滿足人民群眾用藥需求起到了十分巨大的作用。以金水寶為代表的從冬蟲夏草中分離的真菌純培養物代替冬蟲夏草的研究取得了巨大的經濟和社會效益, 掀起了以蝙蝠蛾擬青黴、蝙蝠蛾多毛孢、蛹蟲草、等蟲生真菌的研究熱潮。對壹些微生物和植物相互作用形成的中藥也有了更深入的認識, 如龍血竭的形成與真菌有密切的關系, 是龍血樹抵抗微生物侵染而產生的壹種植物抗毒素；僵蠶中的壹些有效成分是微生物、蠶、桑葉相互作用形成的。對天麻、茯苓等中藥的生物學研究促進了這些中藥品種栽培技術的發展。微生物相關中藥形成方式，可以分為以下幾種情況：1)以腐生生活方式形成的大型藥用真菌，如靈芝、猴頭、木耳、香菇等。這些真菌基本上都可以實現人工栽培。2)天然微生物發酵植物性中藥材料形成，如神曲、紅曲等，主要是酵母和絲狀真菌。3)植物和微生物***生形成的中藥, 如天麻是蜜環菌和天麻植物的***生體，天麻植物依靠蜜環菌提供營養；豬苓也是由於蜜環菌侵入豬苓菌核形成的***生體，由蜜環菌提供營養。4)寄生真菌侵染活體昆蟲形成的蟲菌復合體，其實質是昆蟲的致病菌。如冬蟲夏草、僵蠶、蛹蟲草等。5)微生物侵染植物後，植物抵抗微生物的侵染而形成的植物抗毒素，如龍血竭、沈香等[1]。微生物相關中藥活性成分的研究為這些中藥的質量標準化起到了重要的作用，也加深了對這些中藥藥理作用的認識。藥理學研究促進了傳統微生物中藥在治療現代社會的高發病如癌癥、心腦血管疾病、病毒性疾病中的應用。多數微生物中藥都具有滋補保健的效果，如靈芝、冬蟲夏草成為保健食品開發的熱點。大多數藥用真菌都含有真菌多糖, 真菌多糖能增強免疫力、沒有直接的細胞毒作用，成為抗癌、抗病毒產品開發熱點。2 微生物發酵在中藥中的應用發酵工程是指采用工程技術手段，利用生物（主要是微生物）和有活性的離體酶的某些功能，為人類生產有用的生物產品，或直接用微生物參與控制某些工業生產過程的壹種技術。發酵工程微生物發酵制藥是指利用微生物技術，通過高度工程化的新型綜合技術，以利用微生物反應過程為基礎，依賴於微生物機體在反應器內的生長繁殖及代謝過程來合成壹定產物，通過分離純化進行提取精制，並最終制劑成型來實現藥物產品的生產。 中藥發酵制藥技術是在繼承中藥炮制學發酵法的基礎上，吸取了微生態學研究成果，結合現代生物工程的發酵技術而形成的高科技中藥制藥新技術，是從中藥(天然藥物) 制藥方面尋找藥物的新療效。傳統的中藥發酵多是在天然的條件下進行的，而現在的中藥發酵制藥技術是在充分吸收了近代微生態學、生物工程學的研究成果而逐漸形成的。其先進發酵工藝特點是：以優選的有益菌群中的壹種或幾種、壹株或幾株益生菌作為菌種，加入中藥提取液中，再按照現代發酵工藝制成產品，它是壹種含有中藥活性成分、菌體及其代謝產物的全組分發酵液的新型中藥發酵加工制劑。2.1古代中藥發酵技術應用歷史與現狀我國人民遠在 4000多年前就學會利用發酵來釀酒，此後又相繼利用發酵來生產醬、醋、豆豉和臭豆腐等食品。《本草經疏》曰：“古人用曲，即造酒之曲，其氣味甘溫，性專消導，行脾胃滯氣，散臟腑風冷。”說明中藥臨床應用之曲是在釀酒業發展的基礎上出現的，曲與酒相維系。後來人們在酒曲中加入其他藥物制成專供藥用的各類曲劑。《本草綱目》雲：“古人用麯，多是造酒之麯。後醫乃造神麯，專以供藥，力更勝之。”可見古人早已將微生物發酵應用於中藥炮制。即將藥材與輔料拌和，壹定溫度和濕度下通過微生物的發酵達到提高藥效、改變藥性、降低毒副作用等目的。直到現在，臨床仍在應用的發酵（制品）中藥，如六神曲、淡豆豉、建曲、沈香曲、半夏曲、紅曲、豆黃等，均是利用炮制環境中的野生微生物（多為黴菌、酵母、細菌等）進行多菌種固體發酵而成[2]。發酵技術應用歷史悠久，也是傳統中藥加工炮制的重要方法之壹，壹般主要是起到中藥復合炮制的作用。不同的培養基經同樣的發酵處理後會產生藥性的差異，可利用該特性生產不同適應證的中藥。例如，發酵淡豆豉時，以桑葉、青蒿發酵者，藥性偏於寒涼，多用於風熱感冒或熱病胸中煩悶之癥；以麻黃、紫蘇發酵者，藥性偏於辛溫，多用於風寒感冒頭痛之癥。在清代，根據輔料中藥及治療功能的不同，又制出了皂角曲、竹瀝曲、麻油曲、牛膽曲、開郁曲、海粉曲、覆天曲等10種藥曲。但是傳統的中藥發酵僅對自然界的菌種進行利用，且菌種不純，不能利用現代研究成果定向改變藥物的性能或有意識地根據藥物之間的特性進行有目的的組合。同時，對那些在自然界中不占優勢、生長條件要求比較嚴格的微生物來說，就不可能在藥物上生長起來。這極大地限制了微生物的作用。另外，是否會落入有害菌也不明確，使微生物在藥物中的潛在效能沒有最大限度地發揮出來。中藥發酵研究開始於80年代，但僅是對真菌類自身發酵的研究，如靈芝菌絲體、冬蟲夏草菌絲體、槐耳發酵等，大都是單壹發酵。雖有報道加入中藥，但也僅是將中藥當做菌絲體發酵的菌質，同時研究發現，含有中藥的菌質對原發酵物的功效有影響，只是未見深入研究。目前，已有學者呼籲中藥發酵制藥可按新藥審批辦法規定開發新藥。同時也開展了另壹項研究，即生物轉化，我們認為它與中藥發酵是密不可分的。90年代初，日本人小橋恭壹發現中草藥成分如番瀉葉甙，可借助腸道細菌轉化為致瀉有效成分而起到治療作用。又有報道，在中藥有效成分與細菌的生物轉化過程，許多甙類、黃酮類、黃酮醇、黃烷酮類、香豆素類等均經過腸道菌進行了化學修飾。有作者指出 ,在中藥成分生物轉化的研究過程中 ,對代謝物提純、確定結構模式固然需要，但更應當推出微生物發酵。中藥成分的生物轉化是中藥創制新藥研究的重要方面。正在修訂中的我國新藥申報指導原則，已決定將生物轉化列入創新(壹類) 藥的研究。董玫等研究發現，六味地黃丸發酵液可顯著抑制小鼠肝癌 H22的生長，而等量的六味地黃丸煎劑則無明顯抑瘤作用。六味地黃發酵液還可以對抗環磷酸酰胺所致白細胞減少，且升高報細胞的作用明顯高於六味地黃煎劑。香港中醫博士吳誌勇成功發酵出黃芪液，經福建中醫學院測定，發酵的黃芪所含的黃芪多糖是普通煎、煮、熬水提法的5.04～0.365倍之間。據悉，衛生部藥品檢驗所動物試驗結果：發酵中藥只需1/28的量，即可與壹般煎、煮、熬的水提物壹份的量發揮同等的藥效。據報道，含有中藥成分的培養基對原發酵中藥的影響和多菌種混合發酵的研究將有望成為未來的研究熱點。國外對於中藥發酵的研究報道較少，主要在食品、酶工程，如日本的納豆，用Bacillus菌發酵大豆。由於Bacillus菌酶系豐富（包括澱粉酶、纖維素酶和蛋白酶），並能增加維生素K的含量，Bacillus subtilis菌環能消除小腸內致病菌，其提取物具有明顯的抗癌活性和降壓作用。中草藥發酵的研究有必要借鑒上述成功的經驗[4]。2.2中藥發酵制藥的特點中藥發酵制藥技術的典型特點就是生物轉化。可概括如下幾點：1)藥物的有效組分、活性物質最大限度的得以提取、利用；2)藥物進入人體後不能直接被利用的有效活性組分，因在體外得以完成而被直接利用，迅速發揮應有效能；3)優選的人體有益菌種本身具有補充或增強原有藥物的功能；4)中藥發酵制藥與原有藥物相比產生了新的活性物質，從而具有新的保健、預防或治療功能；5)是實現中藥現代化、具有高科技水平的又壹新技術，生產工藝可控，所得產物精確，制劑方便，便於與國際接軌[4]。2.3 中藥發酵的分類中藥發酵分為液體發酵和固體發酵。液體發酵是在借鑒抗生素生產工藝的基礎上，把菌絲體加入培養基中，將之與藥材混合後放置於適溫下進行發酵。液體發酵具有較高的物質傳遞效率，易於實現發酵工藝的自動化控制。固體發酵是以富含多種營養成分的農副產品如麥麩、甘蔗渣、玉米芯等作為發酵營養基質，用壹種或多種真菌作為發酵菌種，在壹定的溫度、濕度條件下進行發酵。固體發酵在發酵過程中既生長菌體，又形成各種次生代謝物質，難以將其分離，南京中醫藥大學莊毅教授將它們統稱為“菌質”。按應用方式又可將其分為“無渣式”和“去渣式”，前者不用經過提取可直接用藥，後者要經過有效成分的提取和制劑後才可用藥[3]。2.4發酵在中藥研究中的應用2.4.1利用中藥培養基發酵藥用真菌菌物界估計逾十萬種，可供藥用的高等真菌約20余種，利用潛力巨大。國內20世紀60年代興起深層培養（或發酵），2世紀80年代中國醫學科學院藥物研究所進行的冬蟲夏草大規模發酵培養研究，也僅是對菌類自身發酵的研究，如靈芝、冬蟲夏草、香菇發酵等，且大多是單壹發酵。目前對靈芝、雲芝、冬蟲夏草、灰樹花、密環菌、金針菇、香菇、姬松茸、茯苓等很多菌種的發酵技術已日趨成熟。莊毅曾提出了菌質的概念，即用壹定的藥用菌菌種接種在壹定的固體基質上，在壹定環境條件下，經過壹定時間發酵（發酵周期），在特定的質量指標控制下達到發酵終點而產生菌質。可采用現代技術將有效真菌與中草藥組成的不同發酵基質構成各種發酵組合，在壹定條件下進行發酵，產生各種性質不同的菌質。可以利用中藥作為培養基的組成部分，構建藥性菌質，比較發酵前後中藥相關成分的變化，為中藥與藥用真菌的結合尋找突破點，並開發具有良好功效的藥物。王玉紅等在發酵培養基中添加適量的黃芪以促進靈芝的生長和靈芝多糖的產生，結果其多糖的組分發生了變化，有可能產生了新的物質。尤建良等將中藥抗癌復方“康復靈”（主要含黨參、麥冬、薏苡仁、豬苓、淮山藥等）以靈芝菌進行生物發酵，結果表明靈芝中藥制劑發酵液的抑瘤率達47.87%比單獨的靈芝發酵液、單味中藥制劑和靈芝發酵液中藥制劑混合液均有明顯提高。2.4.2中藥發酵用於藥材的炮制發酵法壹直是中藥炮制方法之壹，它借助微生物的作用，改變中藥原有藥性，提高療效，降低毒副作用，擴大適應癥。微生物在生長過程中產生的各種酶，將藥物的成分分解轉化為新的活性成分或將毒性成分分解而降低藥物的毒副作用。現代中藥加工中用發酵法炮制中藥，如五倍子，這種中藥具有收斂止瀉、止血的功能，但其主要成分鞣酸在腸道中與蛋白質結合會降低其活性。研究人員用含根毒菌等物質的酵曲發酵五倍子，能顯著提高其收斂作用，降低副作用。香港中醫吳誌勇博士與內地教授林陸山合作，運用生物工程技術發酵中藥獲得成功。它徹底改變了煎、煮、熬、煉、蒸、浸的傳統加工工藝，並使藥效提高，發酵黃芪所含的黃芪多糖最多為傳統工藝的5倍，且動物實驗證明發酵黃芪的用量為傳統方法制成的藥的1/28，即可產生相同的藥效。（1）提高有效成分提取率中草藥中植物類藥材占90％，藥材有效成分多存在於胞漿中，植物細胞壁是由纖維素、半纖維素、果膠質、木質素2 發酵在中藥研究中的應用2.1中藥發酵用於藥材的炮制等物質構成的致密結構。在中藥有效成分提取過程中，當胞漿中的有效成分向提取介質擴散時，必須克服細胞壁及細胞間質的雙重阻力，使有效成分浸出受阻。微生物可利用中藥中的成分為營養進行分裂、生長、繁殖和代謝，在代謝過程中分泌蛋白酶、纖維素酶、半纖維素酶、果膠酶、澱粉酶等幾十種胞外酶進入培養基，使細胞破裂，細胞間隙增加，減小細胞壁、細胞間質等傳質屏障對有效成分從胞內向提取介質擴散的傳質阻力。體外試驗證明對盾葉薯蕷采用預發酵，有效組分薯蕷皂苷元的產率明顯提高。（2）中藥發酵可提高中藥藥效在發酵的過程中，對中草藥細胞進行破壁使有效物質溶出，提高了活性成分的濃度。並且，將許多人體不能直接吸收利用的大分子有效活性物質降解成小分子的活性物質，使發酵中藥在人體中可以較快的被吸收，且吸收較完，治療效果好。王林等人用麻黃、萊菔子、金銀花、連翹四味中藥發酵靈芝菌，發現這四味中藥對靈芝菌的生物量有明顯的促進增加作用，且使靈芝發酵液的止咳、祛痰作用高於其與中藥混合發酵前。董枚等也報道，將傳統方六味地黃湯發酵，其發酵液對小鼠肝癌具有顯著的抑制作用。六味地黃發酵液0.3g/kg連續給藥兩周，可顯著抑制小鼠肝癌Hzz的生長，抑瘤率為30，而同等劑量的六味地黃煎劑無明顯的抑瘤作用，而且六味地黃發酵液組的白細胞數比煎劑組多(P<0.01)。在免疫調節方面，六味地黃發酵液的功效明顯優於六味地黃煎劑。陳永強等經實驗發現，甘草經微生物產生的β-葡萄糖醛酸酶水解後甘草酸轉化為甘草次酸，甘草次酸可被腸道直接吸收，短期內在血液中達到較高的藥物濃度，迅速作用於靶部位，並且通過微生物的作用，甘草的細胞間質及細胞壁得到分解，促進甘草其它有效成份的釋放。通過微生物對甘草的轉化作用，甘草的急性抗炎、鎮痛效果都顯著增強。（3）中藥發酵產生新的活性物質有些中藥經過多菌種混合發酵後還可產生新的活性物質，產生新的功能，為活性物質的篩選提供新的途徑。雲南大學與昆明植物研究所李國紅等人，聯合采用枯草芽孢桿菌對三七根進行發酵後，在對其中的皂苷成分的研究中發現，從發酵後的三七中分離到了人參皂苷RH4。這種化合物未在發酵前檢測到，說明這種化合物是通過發酵產生的，可能是在發酵的過程中，三七須根的某些皂苷被微生物轉化為人參皂苷RH4。（4）減毒增效 微生物有可能將中藥中的有毒物質進行分解，從而降低藥物的毒副作用。大黃生用瀉下作用峻烈，易引起腹痛、惡心等胃腸道反應。大黃瀉下成分主要是結合型蒽醌衍生物，其中以二蒽醌番瀉苷的作用最強。在中醫臨床中，為了緩和大黃的瀉下作用及對胃腸道的不良反應，常用不同的炮制方法，使結合型蒽醌分解或破壞，從而緩和瀉下作用和其它副作用。雲南中醫學院的學者戴萬生等人，用發酵法炮制大黃，改變了大黃的蒽醌類成分的含量。蒽醌類成分經酵母發酵後，總蒽醌含量僅略有降低，較傳統方法保存了更多的大黃總蒽醌，而起瀉下作用的結合型蒽醌含量降低。另外，作為抗菌、抗腫瘤的主要有效成分的遊離型蒽醌的含量增加了6倍左右，起到減毒增效的作用[5,6]。2.5 發酵中藥的優勢試驗證明，發酵的中藥與煎、煮、熬、灼、蒸、浸法提取的中藥有以下幾點不同：（1）中藥發酵是在常溫、常壓條件下進行的生物轉化過程，最大限度地保護了中藥的活性成分，如對熱敏感的揮發油和維生素等成分，如薄荷、當歸等。（2）中藥中有效成份不被破壞並充分利用，如蛋白質、氨基酸，維他命、微量元素等。經檢驗：發酵中藥中含有18種氨基酸、大量的亞麻酸、多肽類小分子活性蛋白、20多種維他命和微量元素等。（3）發酵中藥的分子量較小，吸收較快、較完全、治療效果較好。如臨床中治療跌打損傷，若筋骨無斷裂，98％能1～2次治愈；痔瘡98％壹次根治。經中央衛生部藥物檢驗所試驗證實：發酵中藥的藥效是普通水提法中藥的4～28倍。（4）目前很多中藥不能進入國際市場的主要原因之壹是重金屬超標，而發酵中藥所含的重金屬不會產生毒性，如朱砂不會釋放出水銀（汞），（5）發酵法既環保又可“廢物”再用，通常中藥提取有效成分後藥渣棄掉，汙染環境。發酵法經過反復發酵，約95％被利用，中藥渣（即纖維）經過纖維素酶的水解及多酶體的裂解代謝，大部分變成單糖（葡萄糖），可被機體利用，未被利用的纖維素可潤腸通便，起到腸道清道夫的作用，有的便秘患者服用了發酵中藥後意外地解決了便秘的問題[5]。2.6中藥發酵技術中的關鍵技術目前中藥發酵技術無論在基礎理論方面還是在方法上的研究仍處於起步階段，對單味藥材發酵和傳統復方發酵開發得都很少，故少有投入生產的發酵新藥。同時中藥發酵技術也面臨壹些問題，如中醫藥自身體系的模糊性、中藥成分的復雜性、中藥發酵機理的不明確性、微生物生長特性的多樣性以及在中藥發酵過程中如何貫徹中醫理論的指導等。因此，對中藥發酵關鍵技術的正確把握關系到其發展方向和前景，筆者認為，今後以下幾方面的工作有待深入研究。2.5.1中藥發酵機理：目前微生物發酵中藥的機理已有壹些基礎和推斷，但由於中藥化學成分的復雜性和作用機理的不明確性，中藥的有效成分、壹些非有效成分及特殊的基質環境與微生物的相互作用尚有待研究；針對具體的中藥及復方，明確其發酵作用機理，揭示發酵中藥的科學內涵，其發酵體系的特點和作用機理仍待進壹步研究。2.5.2 中藥發酵***性技術：加強對單味中藥、中藥提取物、中藥復方發酵技術、微生物培養的系統研究，並進行成分的分離、鑒定和相關藥理試驗，明確微生物的性質以及變化過程，建立起統壹的能應用於大多數中藥發酵的通用方法與***性技術體系，為實現發酵中藥的現代化、科學化、國際化提供新的途徑和方法。2.5.3 優良菌種選育技術：菌種的選育是中藥發酵的關鍵和基礎。因此，應該加大發酵菌種的選育和評價工作，使更多優良的菌種能夠最大限度作用於中藥，從而為更多有價值的發酵中藥產品的研制奠定基礎。2.5.4 現代復合微生物發酵技術：多菌種發酵較單壹菌種發酵具有更強的生物轉化能力，但也是發酵研究的難點。傳統中藥發酵多是自然界混合菌種天然發酵的結果，因那時人們並不知道微生物和發酵的關系，從而很難人為控制發酵過程。如何應用現代微生物工程的相關技術，進行中藥多菌種發酵，提高發酵生產的可控性、穩定性，提高發酵中藥的有效性和安全性，是進行現代發酵中藥研究的又壹關鍵技術。2.5.5 發酵中藥篩選模型和多維評價體系：中藥具有品種多樣性、化學成分復雜性、藥效作用多向性的特點，中藥復方具有整體性、系統性、復雜性、非加和性等特點。因此，中藥及其復方在發酵過程中如何遵循中醫藥理論的指導，進行發酵後選用何種評價指標和評價模型，建立發酵中藥篩選模型和多維評價體系，是發酵中藥研究的又壹技術難點[7]。3 微生物在組培中藥材次生代謝產物的形成中的應用用組織培養方法來生產中藥的有效成分是解決中藥資源緊張的重要手段，是中藥現代化的重要內容之壹。在組織培養中用發根農桿菌誘導組培物產生發狀根(hairy root)，由發狀根形成次生代謝產物已成為利用中藥組織培養物產生次生代謝產物的常用方法。到目前為止已建立了80多種植物的發狀根無性系，其中不少是藥用植物。Yosh ikawa等的研究表明，人參的發狀根在無外源激素的條件進行培養，人參皂苷，可達幹質量的0.95%，而天然栽培根僅為0.4%，因此人參發狀根完全有可能代替天然人參作藥用。黃遵錫從短葉紅豆杉誘導出發狀根，選育出的5株無性系20 d後生物量增加9倍，紫杉醇的量是愈傷組織的1.3～8.0倍。在植物與微生物的相互作用中，真菌能誘導植物中特定次生產物的積累，使植物產生對這些病原微生物的抗性。丹參是壹種重要的藥用植物，利用丹參毛狀根和丹參轉化細胞生產丹參酮等次生代謝物成為研究的熱點。大麗輪枝菌.激發子V44和酵母提取物分別誘導丹參毛狀根和丹參轉化細胞後，過氧化物酶活力顯著提高，且有利於次生代謝產物的積累[1]。藥用植物內生真菌在中藥栽培和中藥新資源開發方面的應用內生菌(endophyte)主要指在其生活史的某壹階段存在於健康植物的組織中、不形成明顯侵染的壹類微生物。內生菌可以促進宿主的生長、發育，增強對不良環境的抵抗力，甚至會促進宿主植物某些代謝產物的形成。深入研究中藥內生菌，對研究中藥的活性成分和栽培可能具有重要作用。內生真菌與宿主植物某些活性成分的形成有密切關系，對於不同地方的相同物種來說，其內生真菌類群是不同的，這可能是形成中藥道地性的原因之壹。開唇蘭小菇、石斛小菇、蘭小菇等3 種小菇屬內生真菌對蘭科瀕危藥用植物鐵皮石斛、金線蓮的生長有促進作用。接種3 種內生真菌後，鐵皮石斛苗的生長量高於對照3～5倍，石斛小菇、蘭小菇對鐵皮石斛原球莖增殖也有明顯促進作用；接種3種真菌的金線蓮苗，側芽及側根數均顯著高於對照。在植物試管苗培養基中分別加入20%真菌菌絲及10 mg/L發酵液的醋酸乙酯提取物，結果發現3種菌的菌絲體及蘭小菇的醋酸乙酯提取物能顯著提高鐵皮石斛原球莖的增殖率；石斛小菇的菌絲體對金線蓮的生長和側芽增殖有顯著促進作用；開唇蘭小菇和蘭小菇的醋酸乙酯提取物分別對金線蓮側芽發生數及生長有顯著促進作用，說明3 種內生真菌對鐵皮斛、金線蓮的促生長作用與菌絲內及分泌到菌絲外的代謝產物有關。菌根是植物和真菌的***生體，是植物普遍存在的現象，菌根菌能促進菌根植物吸收礦質營養和水分，通過刺激或增加寄主植物產生次生代謝物，如抗生素、植保素、酚類化合物、苯丙烷類代謝酶系、木質素、過氧化物酶、水解酶等，提高寄主植物的抗病和抗逆能力。用VA菌根真菌Glomusm osseae 接種韭菜進行試驗, 結果接種株比未接種株的株高、鮮質量、幹質量、葉綠素質量分數都增加，抗凍性增強。但在中藥栽培研究中應用菌根技術尚未引起人們足夠的重視，報道的文獻比較少[1]。展望我國有悠久的重要使用史，微生物應用於中藥業有悠久的歷史，中藥炮制采用微生物發酵法具有壹般方法所無法比擬的優勢，可以為開發新藥、提高藥物療效、降低藥物毒副作用的研究提供新的手段，為中藥的發展開辟新的研究空間。進行中藥發酵研究也具有成熟的現實條件，應當成為我國中藥現代化研究的內容之壹，從而更好的為人類服務。發酵中藥所包含的成分極其復雜，對其成分分離純化有較大的難度，今後應加強純化條件的研究，並科學地優化，提高純化水平。同時，應加強新劑型的研究開發，針對不同的適應癥開發出相適應的劑型。 發酵中藥是現代生物技術和中藥研究的完美結合，必將為中藥新藥研究開發開辟新的道路，拓展更廣闊的發展空間，並在中藥新藥研究開發中占有越來越重要的地位。發酵中藥還有利於推進中藥現代化和國際化進程，提高我國中藥行業的國際競爭力，為中藥走向世界、造福全人類做出新的貢獻。
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