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牛肉膏蛋白腖瓊脂培養基的操作步驟

調節pH值前,先用精密pH試紙測量培養基的原始pH值,如果pH值偏酸,則用滴管向培養基中逐滴加入1 mol/L NaOH,邊加邊攪拌,並隨時用pH試紙測量pH值,直到pH值達到7.6為止;反之,則用1 mol/L HCl調節。註意 pH 值不要調得過高,以免回調,否則會影響培養基中各離子的濃度。

對於壹些需要更精確 pH 值的微生物,可使用酸度計進行 pH 值調節(使用方法請參閱相關說明)。根據實驗要求,培養基的配制可分為試管或三角燒瓶兩種。分裝裝置如圖五-1所示。

分裝過程中,註意不要使培養基沾在試管口或瓶口上,以免沾汙棉塞,造成汙染。

(1)液體分裝 分裝高度以試管高度的 1/4 左右為宜。

(2)固體分裝分裝試管,其分裝量不超過試管高度的1/5,滅菌後做成斜面,如圖五-2所示。三角燒瓶的分裝量以不超過三角燒瓶容積的壹半為宜。

(3)半固體分裝壹般以試管高度的1/3為宜,滅菌後豎直待冷凝。在燒杯中加100毫升水,放入牛肉膏、蛋白腖和氯化鈉,用蠟筆在燒杯外做記號,然後放在火上加熱。待燒杯中的成分溶解後,加入瓊脂,並不斷攪拌,以免粘底。待瓊脂完全溶解後補足損失的水分,用 10%鹽酸或 10%氫氧化鈉調節 pH 值至 7.2~7.6,分裝到各種試管中,加入棉塞,用高壓滅菌器滅菌:每平方厘米 1.05 千克,121 攝氏度下保持 15 ~ 30 分鐘。

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