方法 采用薄膜過濾法進行。
1.培養基及其制備方法
培養基應適合需氣菌、厭氣菌或真菌的生長，可按以下處方制備，亦可使用按該處 方生產的符合規定的脫水培養基。以下培養基制備時，均以115℃滅菌30分鐘。 1.需氣菌、厭氣菌培養基(硫乙醇酸鹽流體培養基) 酪腖（胰酶水解） 15g 氯化鈉 2.5g 葡萄糖 5g 新配制的0.1%刃天青溶液 1.0ml L－胱氨酸 0.5g (或新配制的0.2%亞甲藍溶液0.5ml) 硫乙醇酸鈉 0.5g 瓊脂 0.5～0.7g (或硫乙醇酸0.3ml) 水 1000ml 酵母浸出粉 5g 除葡萄糖和刃天青溶液外，取上述成分加入水內，微溫溶解後，調節pH為弱堿性， 煮沸，濾清，加入葡萄糖和刃天青溶液，搖勻，調節pH值使滅菌後為7.1±0.2，分裝， 滅菌。 在供試品接種前, 培養基指示劑氧化層的顏色不得超過培養基深度約1/5，否則,須 經水浴煮沸加熱, 只限加熱壹次。
2.選擇性培養基
(1) 對氨基苯甲酸培養基（用於磺胺類藥物的無菌檢查） 照上述需氣菌、厭氣菌 培養基及真菌培養基的處方及制法，各加對氨基苯甲酸0.125g，溶解後，搖勻,分裝,滅 菌。 (2) 聚山梨酯80培養基（用於油劑藥品的無菌檢查） 照上述需氣菌、厭氣菌培養基 及真菌培養基的處方及制法，各加10ml聚山梨酯80，搖勻，分裝，滅菌。
3.操作
按該藥品項下規定的方法處理後, 加入0.9%無菌氯化鈉溶液或其他適宜的溶劑至少100ml中, 混合後，通過裝有孔徑不大於0.45μm的薄膜過濾器，然後用0.9%無菌氯化鈉溶液或其他適宜的溶液沖洗濾膜至陽性對照菌正常生長。將需氣菌、厭氣菌培養基，真菌培養基用陽性對照管用培養基分別加至薄膜過濾器內（封閉式過濾器），或取出濾膜分成3等份,分別加入上述二種培養基中，按規定溫度和時間培養。陽性對照管應根據供試品特性加入相應對照菌液1ml(抗細菌藥物，以金黃色葡萄球菌為對照菌；抗厭氧菌藥物，以生孢梭菌為對照菌；抗真菌藥物，以白色念珠菌為對照菌)。陽性對照管細菌應在培養24～48小時，真菌應在培養24～72小時有菌生長。結果判斷當陽性對照管顯渾濁並確有細菌生長，陰性對照管呈陰性時，可根據觀察所得的結果判定。
結果判斷 如需氣菌、厭氣菌及真菌培養基管均為澄清或雖顯渾濁但經證明並非有菌生長,均應判為供試品合格；如需氣菌、厭氣菌及真菌培養基管中任何1管顯渾濁並確證為有菌生長，應重新取2倍量供試品，分別依法復試，除陽性對照管外，其他各管均不得有菌生長，否則應判為供試品不合格。
討論 目前，抗生素類藥物的應用非常廣泛，針對每種抗生素類藥物建立嚴格的質量標準，提高抗生素的質量就顯得尤為關鍵。所以對壹個新品種建立無菌檢查法時，對其方法進行驗證就顯得尤為必要。薄膜過濾法作為無菌檢查中的壹種方法，具有準確、方便、快捷的優點，是無菌檢查時所采用的壹種重要方法。試驗表明上述方法操作方便快捷、結果準確。所以，該無菌檢查方法驗證對保證結果的可信度和準確性具有重要意義。