鑒別：
1.芳伯氨基的反應重氮化-偶合反應。磺胺嘧啶和磺胺甲惡唑都有此反應。
與芳醛的縮合反應。本類藥物的芳伯氨基可和芳醛（如對二甲氨基苯甲醛、香草醛、水楊醛等）在酸性溶液中縮合為有色的希夫氏堿。
如與對二甲氨基苯甲醛在酸性溶液中生成黃色希夫氏堿。
2.與硫酸銅的成鹽反應。本類藥物磺酰胺基上的氫原子比較活潑，具有酸性，可以和金屬離子（如Cu2+、Ag+、Co2+等）生成難溶性沈澱。
磺胺甲惡唑：草綠色。磺胺嘧啶：黃綠色→紫色。
3.N1取代基的反應。磺胺嘧啶和磺胺甲惡唑N1上均為含氮雜環取代，有壹定堿性，可以和有機堿沈澱劑生成沈澱。如磺胺嘧啶可和碘化鉍鉀試液、碘-碘化鉀試液生成紅棕色沈澱。
4.紅外光光光度法。
磺胺甲惡唑的含量測定：亞硝酸鈉滴定法。滴定前加溴化鉀2g作為催化劑，可加快滴定反應速度。為避免亞硝酸鈉在酸性條件下形成的亞硝酸揮發和分解，滴定時應將滴定管尖端插入液面下2/3處。永停法指示終點。
磺胺嘧啶片、磺胺二甲嘧啶片的片劑要檢查溶出度，用紫外分光光度法。
復方磺胺甲惡唑片的含量測定：雙波長分光光度法。關鍵是選擇測定波長（λ2）和參比波長（λ1）。波長選擇的原則是：幹擾組分在λ2和λ1處的吸收度應相等。測定組分在兩波長的ΔA盡量大……
復方磺胺甲惡唑片中磺胺甲惡唑的含量測定：測定波長（λ2）：257nm，在304nm波長附近（每間隔0.5nm）選擇等吸收點波長作為參比波長（λ1），要求ΔA=Aλ1-Aλ2=0.含量測定結果的計算公式為：
TMP的測定是以鹽酸-氯化鉀溶液為溶劑，以239nm作為測定波長（λ2），用SMZ對照液的稀釋液在295nm附近選擇等吸收波長作為參比波長（λ1）。
復方磺胺嘧啶片的含量測定：磺胺嘧啶（SD）的吸收波長為308nm，此波長處TMP無吸收，所以可直接測定SD的含量。
SD對TMP的測定有幹擾，所以采用雙波長分光光度法測定TMP含量。
美國藥典用高效液相色譜法測定。