2017年檢驗技師考試免疫學考點總結
免疫學檢驗是檢驗技師考試的考點之壹。為了方便考生更好的復習關於免疫學檢驗的知識。下面是我為大家帶來的關於免疫學檢驗的知識，歡迎閱讀。
0、免疫學檢測技術的基礎是抗原抗體反應。
1、免疫：是機體識別和排斥抗原性異物的壹種生理功能
2、免疫防禦(對外);免疫自穩(防自身免疫病);免疫監視(防腫瘤)。
3、中樞免疫器官：骨髓、胸腺;外周免疫器官：淋巴結、脾臟(最大)、黏膜相關淋巴組織
4、B細胞：通過識別膜免疫球蛋白來結合抗原，介導體液免疫;B細胞受體=BCR=mIg
表面標誌：膜免疫球蛋白(SmIg)、Fc受體、補體受體、EB病毒受體和小鼠紅細胞受體。
成熟B細胞：CD19、CD20、CD21、CD22 (成熟B細胞的mIg主要為mIgM和mIgD)同時檢測CD5分子，可分為B1細胞和B2細胞。
B細胞功能檢測方法：溶血空斑形成試驗(體液免疫功能)。
5、T細胞：介導細胞免疫。***同表面標誌是CD3(多鏈糖蛋白);輔助T細胞的標誌是CD4;殺傷T細胞的標誌是CD8;T細胞受體=TCR。
T細胞和NK細胞的***同表面標誌是CD2(綿羊紅細胞受體);
CD3+CD4+CD8- = 輔助性T細胞(Th)
CD3+CD4-CD8+ = 細胞毒性T細胞(Tc或CTL)(T細胞介導的細胞毒試驗)
CD4+CD25+ = 調節性T細胞(Tr或Treg)
T細胞功能檢測：植物血凝素(PHA)刀豆素(CONA)刺激T細胞增殖。增殖試驗有：形態法、核素法。
T細胞亞群的分離：親和板結合分離法，磁性微球分離法，熒光激活細胞分離儀分離法
*E花環試驗是通過檢測SRBC受體而對T細胞進行計數的壹種試驗;
6、NK細胞：具有細胞介導的細胞毒作用。直接殺傷靶細胞(腫瘤細胞和病毒感染的細胞)
表面標誌：CD16(ADCC)、CD56。
測定人NK細胞活性的靶細胞多用K562細胞株，而測定小鼠NK細胞活性則常采用YAC-1細胞株。
7、吞噬細胞包括：單核-吞噬細胞系統(MPS，表面標誌CD14，包括骨髓內的前單核細胞、外周血中的單核細胞和組織內的巨噬細胞)和中性粒細胞。(表達MHCⅡ類分子)
8、人成熟樹突狀細胞(DC)(專職抗原呈遞功能)：表面標誌為CD1a、CD11c和CD83。
9、免疫球蛋白可分為分泌型(sIg，主要存在於體液中，具有抗體功能)及膜型(mIg，作為抗原受體表達於B細胞表面，稱為膜表面免疫球蛋白)
10、免疫球蛋白按含量多少排序：IgG>IgA>IgM>IgD>IgE五類(按重鏈恒定區抗原性(CH)排序)
免疫球蛋白含量測定：單向環狀免疫擴散法、免疫比濁法。
11、免疫球蛋白的同種型抗原決定簇位於恒定區(CH、CL)
12、抗體由漿細胞產生。抗體分子上VH和VL(高變區)是抗原結合部位。
13、IgG：血清中含量最高的免疫球蛋白(IgG1最高)，血液和細胞外液中的主要抗體。也是再次免疫應答的主要抗體，是唯壹能通過胎盤的抗體，大多數抗菌抗體、抗病毒抗體是IgG，某些自身抗體及超敏Ⅱ型抗體是IgG，免疫學檢測中第二抗體也以IgG為主。
14、IgA：分血清型(單體存在)及分泌型;分泌型IgA(sIgA)為二聚體，性能穩定，主要存在於胃腸道、支氣管分泌液、初乳、唾液、淚液中，局部濃度高，是參與黏膜局部免疫的主要抗體。
15、IgM：為五聚體，主要存在於血液中，是Ig中分子量最大的(又稱巨球蛋白)。個體發育最早合成和分泌的抗體。抗原刺激後體液免疫應答中最先產生的抗體，感染過程中血清IgM水平升高，說明近期感染。新生兒臍血中若IgM增高，提示有宮內感染。
16、IgE：為單體結構，正常人血清中含量最低。IgE為親細胞抗體，介導Ⅰ型超敏反應。特異性過敏反應和寄生蟲早期感染患者血清中可升高。
17、補體：具有酶樣活性的球蛋白(肝細胞、巨噬細胞產生);激活途徑主要有三種：經典途徑(以結合抗原後的IgG或IgM類抗體為主要激活劑(雙鏈DNA)，C1～C9全部參與)、替代途徑(病原微生物細胞壁成分(脂多糖)直接激活補體C3，然後完成C5～C9的激活過程)、MBL途徑(由急性炎癥期產生的甘露糖結合凝集素(MBL)與病原體結合後啟動激活)。
18、補體系統中C3含量最多，C2含量最少。
19、滅活：加熱56℃30分鐘，補體喪失活性
20、補體清除免疫復合物的方式：吞噬調理;免疫粘附;免疫復合物抑制。
21、完全抗原=反應原性+免疫原性。半抗原=反應原性(無免疫原性)
22、抗原抗體結合力(分子間引力)：靜電吸引、範德華力、氫鍵、疏水作用力(最強)
23、抗原抗體反應的四大特點：特異性、可逆性、比例性、階段性;受反應條件(如溫度、pH、電解質、抗原抗體比例等)的影響。
24、抗體過量前帶;抗原過量後帶(鉤狀效應)
25、抗原抗體反應可分為兩個階段：第壹階段為抗原與抗體發生特異性結合的階段，此階段反應快，僅需幾秒至幾分鐘，但不出現可見反應;第二階段為可見反應階段，此階段反應慢，往往需要數分鐘至數小時。
26、顆粒性抗原出現凝集反應。可溶性抗原出現沈澱反應。單價抗原與相應抗體結合不出現沈澱現象。
27、木瓜酶水解IgG為2Fab+Fc;胃蛋白酶水解IgG為F(ab)2+nFc。
28、最常用於免疫動物的佐劑是弗氏佐劑，弗氏佐劑分為弗氏完全佐劑(弗氏不完全佐劑加卡介苗)和弗氏不完全佐劑兩種。
29、R(兔子)型抗血清是用家兔及其他動物免疫產生的抗體，抗原抗體反應比例合適範圍較寬，適於作診斷試劑。
H(馬)型抗血清是用馬等大動物免疫獲得的抗體，抗原抗體反應比例合適範圍較窄，壹般用作免疫治療。
30、抗血清常見保存條件：2-8℃保存;冷凍保存(最常用);真空幹燥保存(5-10年)。
31、雜交瘤細胞放入液氮(-196℃)前，需要逐步降溫。復蘇細胞時，從液氮罐內取出凍存管，立即浸入37℃水浴。
32、凝集反應分為兩個階段：①抗原抗體的特異性結合;②出現可見的顆粒凝聚。
33、直接凝集反應的原理是細菌、螺旋體和紅細胞等顆粒性抗原，在適當的電解質(0.85%氯化鈉)參與下可直接與相應抗體結合出現凝集。抗原=凝集原，抗體=凝集素。
34、玻片凝集試驗：主要用於抗原的定性分析，AB0血型的測定。
試管凝集試驗：肥達氏試驗、外斐試驗、輸血交叉配血試驗;
35、紅細胞包被抗原，用以檢測抗體的血凝反應，稱為正向間接血凝反應(PHA)。
紅細胞包被抗體，用以檢測抗原的血凝反應，稱為反向間接血凝反應(RPHA)。
36、間接血凝抑制試驗：可用於檢測抗體、自身抗體、變態反應性抗體，也可測定抗原。
37、金黃色葡萄球菌A蛋白(SPA)
38、血凝試驗可在微量滴定板或試管中進行，將標本倍比稀釋，壹般為1:64，同時設不含標本的稀釋液為對照孔。凡紅細胞沈積於孔底，集中呈壹圓點的為不凝集。如紅細胞凝集，則分布於孔底周圍。
39、明膠凝集試驗(間接)：HIV-1抗體和抗精子抗體檢測
40、抗球蛋白試驗，又稱Coombs試驗，是檢測抗紅細胞不完全抗體的壹種很有用的方法。包括直接Coombs試驗(檢測紅細胞上的不完全抗體)和間接Coombs試驗(遊離在血清中的不完全抗體)
41、沈澱反應分兩個階段：第壹階段為抗原抗體發生特異性結合，幾秒到幾十秒即可完成，出現可溶性小的復合物，肉眼不可見。第二階段為形成可見的免疫復合物，約需幾十分鐘到數小時才能完成，如沈澱線、沈澱環。
42、免疫比濁：最適pH為6.5～8.5，磷酸鹽緩沖液。
43、對流免疫電泳：抗體流向負極，抗原流向正極
44、免疫固定電泳也用予尿液中本-周蛋白的檢測及?、?分型，腦脊液中寡克隆蛋白的檢測及分型。
45、RIA(放免)核素(125Ⅰ)標記抗原，競爭抑制(標記抗原和非標記抗原競爭限量抗體);IRMA(免疫放射)核素標記抗體，非競爭結合(過量標記抗體，反應速率比RIA快，靈敏度明顯高於RIA。)
RIA可以測定大分子和小分子抗原，但IRMA則只能測定至少有兩個抗原決定簇的抗原。
46、常用的熒光素有：異硫氰酸(FITC)黃綠色，最常用;四乙基羅丹明(RB200)橘紅色;四甲基異硫氰酸羅丹明(TRITC)橙紅色;藻紅蛋白(R-RE)橙色。其他：銪(Eu3+)
47、熒光標記蛋白的常用方法：攪拌法和透析法。
熒光抗體效價鑒定：抗原含量為1g/L時，抗體效價>1：16
48、時間分辨熒光免疫測定(TRFIA)以鑭系元素(如：銪)化合物為熒光標記物。
49、偏振免疫測定的偏振波長是485nm(藍光)。
50、辣根過氧化物酶(HRP)：底物(1)鄰苯二胺(OPD)，(2)四甲基聯苯胺(TMB) ELISA中應用最廣泛的底物。
堿性磷酸酶(ALP)：底物：對-硝基苯磷酸脂(p-NPP)
?-半乳糖苷酶(?-Gal)：底物：4-甲基傘酮基-R-D半乳糖苷(4-MUU)
51、異相法：先分離，後測定;均相法：不分離，直接測。
52、酶聯免疫吸附試驗(ELISA)：
必要的試劑：①固相的抗原或抗體;②酶標記的抗原或抗體;③酶反應的底物。
抗原測定：蛋白大分子抗原用得最多的是雙抗體夾心法(HBsAg)。只有單個抗原決定簇的小分子，則使用競爭抑制法。
抗體測定：通常使用間接法(HCV、HIV)、雙抗原夾心法(HBsAb)、競爭法(HBcAb、HBeAb)和捕獲法(IgM)等
*待測孔最後顯示的顏色深淺與標本中的待測抗原或抗體呈正相關的是：雙抗體夾心法、雙位點壹步法、間接法測抗體;
53、化學發光底物有：直接化學發光劑：吖啶酯和三聯吡啶釕;酶促反應發光劑：(標記酶HRP)魯米諾及其衍生物、(標記酶為堿性磷酸酶)AMPPD;
54、免疫印跡實驗中常選用多克隆抗體。
55、外周血單個核細胞的分離的分層液常用：Ficoll(由上到下為血漿，單個核細胞，粒，紅)和Percoll(由上至下：死細胞，單個核細胞，淋，紅，粒)。
56、純淋巴細胞群的采集有：黏附貼壁法，吸附柱過濾法，磁鐵吸引法，Percoll分離液法。
57、T細胞和B細胞的分離：E花環沈降法，尼龍毛柱分離法
58、淋巴細胞活力測定：臺盼藍染色法，死細胞為藍色。
59、CD4是HIV受體，HIV感染時CD4/CD8比值明顯降低。
60、CD4/CD8升高常見於自身免疫性疾病;而CD4/CD8降低常見於病毒感染、惡性腫瘤和再生障礙性貧血等。
61、(ELISA)雙抗體夾心法是用於細胞因子測定的最常用方法。
62、流式細胞儀：前向散射光(FS)反映顆粒的大小。側向散射光(SS)反映顆粒內部結構復雜程度、表面的光滑程度。熒光(FL)反映顆粒被染上熒光部分數量的多少。
63、免疫熒光標記最常用的熒光染料：異硫氰酸熒光素(FITC)亮綠色熒光。德州紅紅色熒光。藻膽蛋白類橙色至紅色熒光。
64、臨床上常用三色熒光抗體標記將CD3-CD16+CD56+淋巴細胞確定為NK細胞。
65、AIDS患者的壹個特征性免疫診斷指標表現為：T淋巴細胞總數減少，T細胞亞群CD4Th/CD8Tc比例倒置，Th/Tc<1.0，Th細胞數量顯著下降甚至測不出，而Tc細胞數量可正常或增加，NK細胞減少或活力下降，B淋巴細胞群則處於正常範圍。
65、強直性脊柱炎HLA-B27
66、SLE患者以IgG、IgA升高較多見。類風濕關節炎患者以IgM增高為主。
67、M蛋白(MP)是B淋巴細胞或漿細胞單克隆異常增殖(>30g/L)所產生的壹種在氨基酸組成及順序上十分均壹的異常單克隆免疫球蛋白。多無免疫活性，故又稱副蛋白。臨床上多見於多發性骨髓瘤、高丙種球蛋白血癥、惡性淋巴瘤、重鏈病、輕鏈病等
68、M蛋白-最基本方法：血清蛋白區帶電泳技術
M蛋白-粗篩試驗：血清免疫球蛋白定量(單向瓊脂免疫擴散法和免疫比濁法)
M蛋白-鑒定，首選方法：免疫固定電泳(IFE)技術(區帶電泳技術與特異性抗血清的免疫沈澱反應相結合)是臨床最常用的方法。
69、IgD降低見於原發性無丙種球蛋白血癥、矽肺
70、CSF中的濃度：IgG>IgA>IgM。神經系統腫瘤時，以IgA和IgM升高為主。
(感染、血管病變、系統性疾病=IgG升高)
71、本-周蛋白即尿中遊離的免疫球蛋白輕鏈。尿中可測得，血中呈陰性(原因是本-周蛋白分子量小，極易迅速自腎臟排出，血中含量並不升高)
72、冷球蛋白又稱冷免疫球蛋白，在-4℃時發生沈澱，於37℃時又復溶解。采血是冷球蛋白檢測的關鍵，宜在體溫條件下采集和保存靜脈血。
73、補體結合試驗(CFT)，梅毒的診斷，華氏反應。
74、非均相熒光免疫測定：時間分辨熒光免疫測定法。
均相熒光免疫測定：熒光偏振免疫測定法。
75、鏈球菌感染：ASO(膠乳凝集試驗、免疫散射比濁法)
76、傷寒沙門菌有菌體(O)抗原、鞭毛(H)抗原和表面(Vi)抗原。肥達反應，效價?1:80為陽性
77、卡氏肺孢菌，又稱卡氏肺孢子蟲，為類真菌。
78、Ⅰ型超敏反應：由特異性IgE抗體介導產生，其發生速度最快。(青黴素、支氣管哮喘)
提高Th1細胞活性，減少IL-4的分泌，可降低IgE的產生，阻斷IgE介導的Ⅰ型超敏反應。
參與Ⅰ型超敏反應：肥大細胞、嗜堿性粒細胞、嗜酸性粒細胞。
79、Ⅱ型超敏反應：又稱細胞毒型或細胞溶解型超敏反應，它是由靶細胞表面的抗原與相應IgG或IgM類抗體結合後，在補體(細胞溶解)、巨噬細胞(吞噬)和NK細胞(ADCC作用)參與下，引起的以細胞溶解或組織損傷為主的病理性免疫反應。(輸血反應、新生兒溶血癥、自身免疫性溶血性貧血、藥物過敏性血細胞減少癥、肺出血腎炎綜合征、甲狀腺功能亢進)
80、Ⅲ型超敏反應：由可溶性免疫復合物沈積於局部或全身多處毛細血管基底膜，通過激活補體，並在血小板、嗜堿性粒細胞、中性粒細胞等的參與下，引起的以充血水腫、局部壞死和中性粒細胞浸潤為主要特征的炎癥反應和組織損傷。(Arthus反應、類Arthus反應、血清病、鏈球菌感染後腎小球腎炎、類風濕關節炎、SLE)/81、Ⅳ型超敏反應：又稱遲發型超敏反應(DTH)，是效應T細胞與特異性抗原結合後，引起的以單個核細胞浸潤和組織損傷為主要特征的炎癥反應。(細胞免疫)效應性CD4+Th1細胞識別抗原後活化，可釋放IFN-?、TNF、淋巴毒素(LT)、IL-3、GM-CSF、單核細胞趨化蛋白-1(MCP-1)等多種細胞因子。
常見Ⅳ型超敏反應性疾病：感染性遲發型超敏反應(結核分枝桿菌、病毒、原蟲)、接觸性皮炎、移植排斥反應。(結核菌素皮試、斑貼試驗)
82、變性的IgG可刺激機體產生抗變性IgG抗體(類風濕因子)
83、ITP患者血清中存在有抗血小板抗體，該抗體可以縮短血小板的壽命。
84、抗乙酰膽堿受體抗體：對重癥肌無力(MG)具有診斷意義。
85、毒性彌漫性甲狀腺腫患者血清中有抗促甲狀腺激素受體(TSHR)的IgG型自身抗體。(甲狀腺功能的'亢進)
86、多發性肌炎是以損害肌肉為主要表現的自身免疫性疾病，如果同時有皮膚損害，則稱為皮肌炎。
87、75%的PSS患者有抗核抗體陽性，抗Scl-70抗體是PSS的特異性抗體，80%～95%的局限性硬皮病患者抗著絲點抗體陽性。
88、自身免疫病(AID)的特征：高滴度自身抗體，病理特點為免疫炎癥損傷與抗原分布壹致，能建動物模型。
89、抗DNP抗體(抗核蛋白抗體)通常完全被DNA和組蛋白吸收，是形成狼瘡細胞的因子。
90、ANA陽性的熒光現象分：核膜型、均質型、斑點型、核仁型。ANA常為自身免疫病的初篩試驗。
91、ENA是可提取核抗原的總稱，分子中不含DNA。
92、抗dsDNA抗體對SLE有較高的特異性。抗Sm抗體也是SLE的特異性標誌之壹。此兩項常為SLE確診指標。(對疑為SLE的患者，應先進行ANA和抗dsDNA抗體的檢測，當ANA和(或)抗dsDNA抗體陽性時，再作抗ENA抗體譜的檢測。如有抗Sm抗體和(或)抗RNP抗體陽性，可實驗室診斷為SLE)
93、抗核RNP抗體：為MCTD(混合性結締組織病)的診斷指標。
94、抗SSA/抗SSB抗體：為幹燥綜合征(SS)的診斷指標。(當ANA陽性而抗dsDNA抗體陰性，抗ENA抗體譜中抗SsA抗體和(或)抗ssB抗體陽性，可實驗室診斷為幹燥綜合征。)
95、抗Jo-1抗體：多發性肌炎(PM)患者常為陽性。
96、抗Scl-70抗體：進行性系統性硬皮癥(PSS)的診斷指標。
97、NCA：原發性小血管炎的特異性血清標誌物
98、內風濕性關節炎(RA)：自身抗體有RF、抗角蛋白抗體(AKA)、抗環瓜氨酸肽抗體(anti-CCP)。
99、Farr法測定dsDNA抗體的特異性高，為公認標準法，當抗dsDNA抗體結合率大於20%時對SLE有意義。
100、抗線粒體抗體(AMA)：原發性膽汁性肝硬化
101、巨球蛋白血癥：以分泌IgM的漿細胞惡性增殖為病理基礎的疾病。好發於老年男性，主要表現骨髓外浸潤，以肝、脾和淋巴結腫大為主要體征並伴有血黏滯過高綜合征，如表現為視網膜出血。(血清呈膠凍狀難以分離，電泳時血清有時難以泳動，集中於原點是該病的電泳特征)
102、異常免疫球蛋白檢測的應用原則
初篩實驗：區帶電泳分析、免疫球蛋白定量檢測和尿本-周蛋白定性檢測。
確證實驗：免疫電泳、免疫固定電泳、免疫球蛋白亞型、血清及尿中輕鏈蛋白的定量檢測。
103、HIV誘導的免疫應答
1.體液免疫應答HIV感染後，機體可產生：中和抗體、抗P24殼蛋白抗體、抗gp120和抗gp41抗體
2.細胞免疫應答：CD8+T細胞應答、CD4+T細胞應答。
104、HIV抗原檢測：核心抗原p24(ELISA)
105、免疫印跡法判斷標準為：①HIV抗體陽性：至少有兩條膜帶(gp41/gp120/gp160)或至少壹條膜帶與p24帶同時出現;②HIV抗體陰性：無HIV抗體特異性條帶出現;③HIV抗體可疑：出現HIV特異性條帶，但帶型不足以確認陽性者。
CD4+T細胞計數是反映HIV感染患者免疫系統損害狀態的最明確指標。當CD4+T細胞低於500/?l，則易機會性感染;低於200/?l，則發生AIDS。
106、CEA大於60?g/L時可見於結腸、胃、肺癌。手術6周後CEA水平正常。
107、AFP原發性肝癌。PSA前列腺癌
108、糖類抗原有：CA125：上皮性卵巢癌和子宮內膜癌;CA15-3：乳腺癌;CA19-9：胰腺癌、結直腸癌。
109、神經母細胞瘤和小細胞肺癌(基因有P53，RB)的標誌物：神經元特異性烯醇化酶(NSE)
110、排斥反應有：宿主抗移植反應(HVGR)和移植物抗宿主反應(GVHR)。
111、移植物存活與HLA配型的關系是：①供、受者HLA-A和HLA-B相配的位點數越多，移植物存活幾率越高;②供、受者HLA-DR位點相配更重要，因為HLA-DR和HLA-DQ基因有很強的連鎖不平衡，DR位點相配的個體，通常DQ位點也相配;③不同地區HLA匹配程度與移植結果的關系有著不同的預測價值。
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