細胞培養技術也叫細胞克隆技術,生物學上的正式術語是細胞培養技術。無論對於整個生物工程技術還是生物克隆技術之壹,細胞培養都是必不可少的過程,細胞培養本身就是細胞的大規模克隆。細胞培養技術可以將壹個細胞經過大量培養後轉化為簡單的單細胞或分化很少的多細胞,這是克隆技術必不可少的環節,細胞培養本身就是細胞克隆。細胞培養技術是細胞生物學研究方法中壹項重要且常用的技術。通過細胞培養,可以獲得大量細胞,研究細胞信號轉導、細胞合成代謝、細胞生長和增殖。
首先,動物細胞培養
在所有的體外細胞培養中,動物細胞培養是最困難的。以下是它需要的特殊條件。
⑴血清:動物細胞的體外培養往往需要血清。最常用的是小牛血清。血清提供生長必需的因子,如激素、微量元素、礦物質和脂肪。在這裏,血清等於動物細胞體外培養的天然營養液。
⑵支持:大多數動物細胞都有貼壁的習慣。體外培養通常使用玻璃和塑料作為支持物。
⑶氣體交換:細胞培養過程中要不斷調整二氧化碳和氧氣的比例,不斷維持所需的氣體條件。
二、植物細胞培養
⑴光照:體外培養的植物細胞對光照條件要求不高,因為細胞生長所需的物質主要由培養基供給。然而,光不僅與光合作用有關,還與細胞分化有關。例如,光周期可以調節性細胞分化和開花,因此在以獲得植株為目的的早期植物細胞培養過程中,光照條件尤為重要。通過植物細胞的體外培養獲得重要物質(如藥物)的過程,其中大部分細胞懸浮在反應器中。
⑵激素:植物細胞的分裂和生長需要植物激素的調節,促進生長的生長素和有絲分裂素是最基本的激素。植物細胞的分裂、生長、分化和個體生長周期受相應的激素調控。相對於動物細胞,植物細胞體外培養的激素需求原理已經了解,其應用技術已經相當成熟,已經有了壹套培養基。同時解決了植物細胞對水、營養、激素、滲透壓、pH、微量元素的需求。
第三,微生物細胞培養
微生物多為單細胞生物,野外生存條件較為簡單。因此,人工培養微生物的條件比動植物細胞簡單得多。其中厭氧微生物的培養比好氧微生物更復雜,因為嚴格厭氧需要維持二氧化碳等非氧惰性氣體的濃度,而好氧微生物只需要通過不斷攪拌提供無菌氧氣。微生物對培養條件的要求不如動植物細胞,玉米漿、蛋白腖、麥芽汁、酵母膏成為微生物良好的天然培養基。對於壹些特殊微生物的營養需求,可以在這些天然培養基的基礎上添加。