銀耳壹級種培養基分為瓊脂培養基和木屑培養基。木屑培養基配方和制作方法與原種、栽培種相同，下面介紹適於銀耳壹級種的10種瓊脂培養基配方。
（1）PDA培養基
馬鈴薯250克，葡萄糖25克，硫酸鎂0.5克，維生素B110毫克，瓊脂20克，水1000毫升。
將馬鈴薯洗凈去皮（已發芽的要挖掉芽眼），稱取250克切成薄片，置於鋁鍋中加水煮沸30分鐘，用4層紗布過濾取汁，用水補足1000毫升；再稱取瓊脂20克，用剪刀剪碎後加入馬鈴薯汁液內，繼續加熱，並攪拌，使瓊脂全部溶化；加入葡萄糖，稍煮幾分鐘後，用2層紗布過濾，調節酸堿度為pH5.6；趁熱分裝入試管內，裝量為試管長度的2/5，管口塞上棉塞，立放於試管籠上。分裝時，應註意不要使培養基粘在試管口和管壁上，以免發生雜菌感染。
（2）PSA培養基
馬鈴薯200克，蔗糖20克，磷酸二氫鉀3克，瓊脂20克，水1000毫升。
制作方法與培養基配方之壹相似，只是在加入葡萄糖更換為蔗糖，同時加入磷酸二氫鉀，煮沸融化後過濾取汁，趁熱裝入試管中，塞好棉塞，直立放於試管籠上。
（3）CMA培養基
米粉60克，葡萄糖10克，瓊脂20克，水1000毫升。
配制時先把玉米粉調成糊狀，再加入1000毫升水，攪拌均勻後，文火煮沸20分鐘，用紗布過濾取汁。再加入瓊脂、葡萄糖等，全部溶化後，調節pH為5.6，然後分裝入試管內，塞好棉塞。
上述3種培養基配方，適於培養銀耳芽孢萌發，有利於與耳友菌絲混合發育生長。
（4）銀耳木屑菌種2瓶（750毫升），過磷酸鈣1克或磷酸二氫鉀3克，瓊脂25克，水1000毫升。
配制時將菌種瓶中的菌絲體挖出，置於1000毫升水鍋中，燒開後再煮10～15分鐘，過濾去渣取用濾汁，不足1000毫升的加水補足。再加入瓊脂煮溶，放入過磷酸鈣或磷酸二氫鉀攪勻。最後分裝入管，塞上棉塞，立放於試管籠中。
（5）銀耳適生樹的木屑50克，磷酸二氫鉀3克，蔗糖30克，瓊脂20克，水1000毫升。
配制時將木屑入鍋加水煮30分鐘，過濾取汁液，再補足水1000毫升，其他操作同上。
（4）、（5）兩種培養基，適合銀耳芽孢萌發菌絲。
c（6）馬鈴薯澱粉40克，葡萄糖10克，蛋白腖5克，氯化鈉5克，磷酸二氫鉀0.5克，瓊脂22克，水1000毫升。
配制時，稱取馬鈴薯澱粉，加入少量清水調成糊狀，補足水至1000毫升；煮沸後再加入瓊脂，用文火加熱，並不斷攪拌溶化，用多層紗布過濾，取其濾汁，其他操作同上。
（7）玉米粉50克，蛋白腖10克，瓊脂20克，水1000毫升。
配制時，玉米粉加水250毫升煮沸20分鐘，用6層紗布過濾去渣，取其濾汁；補足清水1000毫升，其他操作同上。
（6）、（7）兩種培養基，適於銀耳純白菌絲培養。
（8）麥麩200克，葡萄糖20克，瓊脂20克，水1000毫升。
配制時，先將麥麩放在鋁鍋中，加水1000毫升，用文火煮沸5分鐘，用6層紗布過濾去渣，取用汁液。其他操作同上。
（9）黃豆粉40克，葡萄糖20克，磷酸二氫鉀3克，瓊脂20克，水1000毫升。
配制時，將黃豆粉調成糊狀，再加入1000毫升水，攪至瓊脂全部溶化；再加入葡萄糖和磷酸二氧鉀，充分攪拌均勻；趁熱分裝於試管中，塞好棉塞，立放於試管籠中。
（8）、（9）兩種配方適合培養羽毛狀耳友菌絲生長發育。
（10）硫酸鎂0.5克，磷酸二氫鉀0.6克，磷酸氫二鉀1克，蛋白腖2克，葡萄糖20克，瓊脂15克，蒸餾水1000毫升。
配制時，將配方中化學藥品置於燒杯中，用少量水溶化；量取1000毫升蒸餾水，將瓊脂碎片煮溶；再將溶化的化學藥品倒入瓊脂液中攪勻；補足水至1000毫升，其他操作按常規。
本配方適於銀耳芽孢與耳友菌絲交合。