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請教紫外吸收法測定核酸含量的有關問題

首先附上紫外分光光度計使用操作規程如下:

儀器:紫外分光光度計:紫外分光光度計

型號:UV2501

原產地:日本島津公司

型號:UV2501日本島津公司

主要附件:主機、計算機、不間斷電源

性能指標:

波長範圍:190-1100nm

波長範圍:≤ 0.15nm

網格:1200L/mm 精度:1200L/mm 分辨率:≤ 0.15nm

光柵:1200L/mm 精度:± 0.2nm

註意事項:

1.請勿將實驗藥品、試劑、器皿等放入儀器內

2.光度計的光源壽命有限,長時間不使用儀器,請關閉紫外光度計

3.實驗結束,及時登記《大型貴重儀器設備復原登記表》

實驗步驟:

1.打開主機,打開電腦,啟動紫外分光光度計程序,進行設置(方法如下)

2.將待測樣品放入比色皿中,進行測試

電腦軟件操作如下:

1.雙擊 2501,啟動紫外分光光度計,紫外分光光度計隨即啟動。啟動紫外分光光度計程序

2、掃描基線,按程序下的 "基線"(此時不放入樣品)

3、打開配置菜單,點擊參數,根據實際情況設置參數(如掃描範圍、步長、掃描速率等)

4、測量,按開始,然後測量樣品。測量

5.確定峰值位置:

(1)計算機確定:單擊 "Manipnlate "菜單中的 "Peak Pick "項,出現對話框,將光標移到對話框上方(此時箭頭變為" "),按住左鍵不放,將對話框拉到妳要讀出的峰高、峰位等大小。

() 2) 手動確定:單擊 "Mipnlate "菜單中的 "Data print "項,處理方法同上,讀出自己想要的峰位置。點擊 "Manipnlate "菜單中的 "Point pick "項,移動起點和終點位置線,人工確定峰的起點和終點位置

專門用於 RNA 測量的方法是將 10 微升 RNA 溶液放入比色皿中,選擇 260 nm 波長和 280 nm 波長對其吸光度值進行掃描。壹般來說,核酸的濃度是通過 260 納米波長的吸光度值來確定的,而 260/280 的比值則用來判斷是否有蛋白質汙染。理想的比率約為 1.8 至 2.0。

儀器在光度掃描後會直接在屏幕上生成濃度值,而無需通過後續的人工計算來獲得。

希望能對您有所幫助。

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