1、試劑
酒精、苯醇、二甲苯、苯蠟、 純蠟。
2、器材
鑷子、解剖刀、解剖剪、包埋盒、洗脫瓶、酒精燈、冰、切片機、烘片機、浸蠟瓶。
二、步驟
1.取材
將舌鰨性腺從酒精中取出放在實驗臺上，用鑷子夾住性腺的壹端進行橫切，取材長度2-3mm，放入包埋盒中脫水。註意編號
2.脫水
將包埋盒放入盛有酒精的洗脫瓶中按酒精濃度梯度脫水?
70%酒精（45min/1h）→80%酒精（45min/1h）→90%酒精（45min/1h）→100%酒精（40min）
3.透明
1:1苯醇（40min) →二甲苯（30min）?
4. 浸蠟（恒溫箱62℃、1天）
1:1苯蠟（45min/1h）→純蠟1（45min/1h）→純蠟2（45min/1h）
包埋時間表：
步驟：
70%酒精（45min/1h）→ 80%酒精（45min/1h）→90%酒精（45min/1h）? → 100%酒精（40min）→ 1:1苯醇（40min)? → 二甲苯（30min）→? 1:1苯蠟（45min/1h） → 純蠟1（45min/1h）→純蠟2（45min/1h）
5.包埋
用加熱的鑷子將材料放入包埋盒中，橫切面向下，倒入熔融的石蠟，用加熱的鑷子迅速將材料按所需的切面擺放整齊，待包埋盒表面的石蠟凝固後將包埋盒平放入冰中，使石蠟迅速凝固。最後從包埋盒中取出蠟塊，以便保存。將樣品編號封於蠟塊上，以免樣品混淆。
6.修塊
將已包埋好的含有包埋材料的蠟塊用單面刀切成梯形小塊，並可粗視到材料切面
7.切片
用切片機將蠟塊切成連續的蠟帶。切片時先把切片刀夾在刀架上，再把載蠟器夾在固定裝置上（註意安裝切刀的角度，刀口運行方向與材料切面平行），然後調整好所需厚度，5微米，轉動切片機切片。
8.粘片
切下來的切片經過目檢，將符合要求的切片粘在潔凈的載玻片上。粘片時先在載玻片上塗上少量甘油蛋白（可用蛋青和甘油各50ml，加1g 水楊酸混合而成），加幾滴蒸餾水，然後用鑷子小心把切片放在水上，在40℃下，用撥針將切片伸直、展平，並烘幹。
9.染色
見染色流程
切片染色流程
1、二甲苯Ⅰ 15min
2、二甲苯Ⅱ 15min
3、1:1苯醇 ? 5min
4、無水乙醇 ? 2min
5、90%乙醇 ? 2min
6、80%乙醇 ? 2min
7、70%乙醇 ? 2min
8、50乙醇 2min
9、30%乙醇 ? 2min
10、自來水 ? 2min
11、蒸餾水 ? 2min
12、蘇木素 ? 10min
13、自來水 ? 5min
14、蒸餾水 ? 2min
15、鹽酸分化液 ? 5s
16、自來水 ? 10min
17、蒸餾水 ? 2min
18、30%乙醇 2min
19、50乙醇 ? 2min
20、70%乙醇 2min
21、80%乙醇 2min
22、伊紅 40s
23、90%乙醇 2min
24、95%乙醇 2min
25、無水乙醇Ⅰ ? 2min
26、無水乙醇Ⅱ ? 2min
27、1：1苯醇 2min
28、二甲苯Ⅰ 5min?
29、二甲苯Ⅰ 5min
10.樹膠封片、鏡檢、保存
附：
· 固定的目的
1迅速阻止組織、細胞的死後變化，防止自溶與腐敗，使之盡量保持生前的狀態與結構。
2使細胞內的蛋白質、脂肪、糖、酶等成分轉變為不溶性物質，以保持其原有狀態。
3使組織內各種物質成分產生不同的折光率，以便染色後易於鑒別和觀察。
4使組織塊硬化，從而在脫水、包埋、切片、染色等過程中不易損壞。
5使組織成分對染料有不同的親和力，經過染色處理後易於辨認。
6防止細胞過度收縮或膨脹而失去其原有形態結構。
· 固定的註意事項及影響因素
1固定液的用量
應充足，壹般為組織塊體積的10-20倍左右。瓶底墊上脫脂棉或幾層濾紙更好。以便固定液能從上下左右前後滲入組織塊。軟組織或較大塊組織可以經2-3小時固定後，再修整成小塊重新投入新配制的固定液內繼續固定。
2固定時間
應根據組織的種類、性質、大小，……滲透力的強弱而定。
如：壹般組織，以10%福爾馬林固定24h……
適當地增加溫度可縮短固定時間。
· 常用固定液：
固定液特點：
①有較強的滲透力，能迅速的滲入組織內部；
②不使組織過度收縮或膨脹，並能使組織內待觀察的成分凝固因為不溶性物質；
③能使組織達到壹定的硬度並獲得較佳的折光率和對某種染料具有較強的親和力。
（1）單純固定液
甲醛 10ml
蒸餾水? 90ml
優點：滲透能力強，固定均勻，組織收縮小。
缺點：但經乙醇脫水後收縮較大。
· 酒精脫水註意事項 ：
1壹般從70%酒精開始，由低濃度到高濃度逐步處理，如果固定液為酒精溶液，那就從與固定液中相同濃度的酒精開始脫水。
2對壹些柔軟組織，如胚胎組織，應從70%酒精以下50%或30%開始脫水。
3脫水的時間根據組織的種類、體積大小和厚度而定，壹般與組織的大小成正比。
脫水必須在有蓋瓶子內進行，特別是高濃度酒精。
脫水兼透明脫水劑：脫水後直接可以浸蠟
10玻片的清洗
新的載、蓋玻片：必須經清潔液處理後方能使用，方法是先用自來水沖洗或洗衣粉擦拭沖洗後，再入清潔液浸泡壹天以上，取出經清水沖洗，轉入95%酒精內浸泡脫脂後，用幹凈的棉布及綢布擦幹備用，壹般玻璃儀器可放入幹燥箱內烤幹備用。
經染色並封片後的載玻片：可先在酒精燈上加溫以除去或放入大量廢二甲苯浸泡壹周左右，蓋玻片即能與載玻片自然分離，然後投入堿皂水中煮沸，用自來水沖洗後，按新玻片處理法處理。
浸蠟步驟：
1:1二甲苯和石蠟(30-45min)→石蠟(30-45min)→石蠟(30min)
包埋步驟：
將熔化好的石蠟倒入包埋組或包埋盒，用加溫的鑷子將組織塊切面朝下放入，做好標記，冷卻，完全凝固後，修整蠟塊。
包埋溫度：與浸蠟溫度接近或高2℃左右。