“啤酒花油”是由上海華光啤酒廠生產的外用制劑，用於促進慢性潰瘍和燒傷的愈合。為考察“啤酒花油”的安全性，本文擬觀察小鼠壹次口服“啤酒花油”後的毒性反應和死亡情況，以及短期接觸“啤酒花油”後皮膚完整和破損的大鼠的毒性反應。
1材料
1.1動物:昆明小鼠，體重18 ~ 22 g，雌雄各半；SD大鼠，體重170 ~ 230 g，雌雄各半，由第二軍醫大學實驗動物中心提供。
1.2藥品:“啤酒花”和中性植物油(溶劑)由華光啤酒廠提供。根據實驗要求，將“啤酒花”溶解在中性植物油中，制備不同濃度的“啤酒花油”。
2實驗方法
2.1小鼠口服LD50 [1]
根據預試驗結果，小鼠按體重在366 ~ 970 mg/kg範圍內分為7組，每組10只。♀每組5只大鼠)，給藥間隔為0.85，灌胃給藥體積為每10 g體重0.1 ml。另設溶劑對照組，僅給予中性植物油0.8 ml/只。
禁食12小時後，小鼠灌胃給藥。給藥後觀察動物的毒性反應，及時記錄死亡人數。立即解剖死亡動物，觀察內臟器官的病理變化。對不死動物連續觀察9天，然後處死，解剖，觀察器官變化。
LD 50用Bliss法計算，用計算機“NDST程序”運算。
2.2大鼠皮膚急性毒性試驗[2]
實驗動物分為完整皮膚和破損皮膚兩部分，每部分又分為大、中、小三個劑量組，劑量間隔為0.7，每組10只大鼠。另設溶劑對照組，每組6只大鼠。
在氯胺酮(90 mg/kg ip)麻醉下，對大鼠背部進行脫毛(用剃刀小心地剪掉背部的毛發)，脫毛範圍約為4.5 cm×7 cm(約為體表的65，438+00%)。均勻塗抹不同濃度的“啤酒花油”和溶劑，約0.6 ml/脫毛面積，用無毒塑料薄膜覆蓋，包紮。損傷皮膚組，大鼠在背部脫毛區用針尖切開表皮，然後塗上不同濃度的“啤酒花油”。給藥後，觀察動物的全身毒性。死亡動物立即進行屍檢，肉眼觀察各臟器的病理變化。10天後處死大鼠，大體解剖觀察全身各器官的變化。
3個結果
3.1小鼠口服LD 50。
小鼠口服後，死亡動物在約0.5 ~ 2小時內出現氣短、煩躁等癥狀，隨後出現肢體抽搐，死前有明顯抽搐。死亡壹般發生在給藥後1 ~ 6小時內，個別死亡發生在12 ~ 48小時內。死後立即屍檢顯示，小白鼠死前因肌肉僵硬，心臟停止收縮。內臟重要器官(心、肺、肝、脾、腎、消化道等)未見充血、水腫及明顯器質性改變。).大部分活體動物都有短暫的氣短，24小時內活動稍差，食欲下降。24小時後(部分病例為48小時)逐漸恢復活動和進食，壹般情況良好，無其他不良反應發生。連續觀察9天後處死小鼠，大體解剖未見病理變化。溶劑對照組10小鼠給藥後未見明顯毒性反應，觀察10天後處死，大體解剖未見異常發現。
各劑量組死亡率見表1，死亡率無明顯性別差異。
Bliss法計算的LD 50為577.06 mg/kg，95%可信限範圍為505.74 ~ 658.43mg/kg。
3.2大鼠皮膚急性毒性試驗
各劑量組大鼠的死亡率和給藥前後體重的變化如表2所示。
表1小鼠口服“啤酒花油”後LD 50的計算(Bliss法)
劑量(毫克/千克)
對數劑量(x)
動物數量(僅限)
死亡動物數量(僅限)
死亡率(%)
概率單位(y)
九百七十
2.987
10
10
100
6.75
824
2.916
10
八
80
6.20
701
2.846
10
七
70
5.66
596
2.775
10
六
60
5.11
506
2.704
10
四
40
4.56
430
2.633
10
2
20
4.01
366
2.563
10
3.46
表2“啤酒花油”對大鼠皮膚的毒性反應
組
不
藥物濃度(%)
動物數量(僅限)
死亡動物數量(僅限)
重量(克，x秒)
用藥前後
結束
矯正/整體
皮膚
皮膚
A
53.67
10
206 19
210 24
B
37.57
10
207 21
220 20
D
溶劑
六
198 19
206 22
破裂
損害
皮膚
皮膚
A
53.67
10
2
200 20
204 23
B
37.57
10
202 18
207 21
C
26.30
10
198 19
199 24
D
溶劑
六
206 22
208 20
在皮膚完整的大鼠中，兩組和溶劑對照組無明顯毒性，用藥後飲食和活動無明顯變化。各組局部未見明顯紅腫等刺激反應，1周後脫毛區開始長出長毛。連續觀察10天後處死大鼠，大體解剖未見明顯器官異常變化。
高劑量組有2只大鼠在服藥後4 ~ 24小時內死亡，死前有明顯呼吸困難和輕度肌肉抽搐。死後屍檢無明顯異常。此外，高劑量組的2只大鼠和中劑量組的1只大鼠在服藥後8 ~ 12小時內出現壹過性呼吸困難。其他各組和溶劑對照組均未出現明顯的毒性反應，僅少數動物在用藥當天有壹點食欲不佳。連續觀察10天，大鼠飲食和活動正常，體重變化不明顯。鼠皮受損區傷口第二天開始結痂，無明顯紅腫、潰爛、感染。傷口愈合時間約65438±0周，無明顯疤痕。觀察10天後，部分大鼠脫毛區開始長毛，10天後處死。大體解剖未發現異常變化。
4討論
啤酒花素是從啤酒花中提取的有效成分，主要由啤酒花和啤酒花組成。現有研究資料表明，啤酒花具有壹定的抗菌和促進肉芽組織增殖的作用。本實驗結果表明，當藥物面積占體表面積的10%時，大鼠受損皮膚能很好地耐受濃度為26.30%和37.57%的“啤酒花油”，且受損皮膚傷口愈合快，無感染。這兩個濃度分別是臨床藥物濃度的5倍和7倍(臨床藥物濃度為5%)。完好皮膚也能耐受臨床藥物濃度10倍的“啤酒花油”，無明顯中毒反應。中性植物油作為溶劑，用在受損皮膚和完好皮膚上，無明顯毒性反應。小鼠口服該藥的LD 50為577.06 mg/kg，為低毒物質。以上結果提示“啤酒花油”在臨床應用上是安全的。