按照計數法驗證試驗確定的程序配制供試品溶液。用稀釋劑稀釋到1:10，1:l0？、l:10？具有相同稀釋水平的測試溶液。根據細菌數報告規則，取相應稀釋度的試液1ml，置於直徑90mm的無菌培養皿中，註入15 ~ 20ml溶解的營養瓊脂培養基、玫瑰紅鈉瓊脂培養基或酵母膏蛋白腖葡萄糖瓊脂培養基，溫度不超過45℃，混勻，固化，倒置培養。為每個稀釋水平的每種培養基準備至少2個平板。
陰性對照試驗
取1ml試驗用稀釋液，置於無菌皿中，註入培養基中，凝固，倒置培養。每種計數介質準備兩個平板，不能有細菌生長。
文化和計數
除另有規定外，細菌培養3天，黴菌和酵母菌培養5天，逐日觀察菌落生長情況，計數菌落數。如有必要，培養時間可適當延長至7天，用於菌落計數和報告。菌落擴散並生長成塊的平板不應計數。計數菌落數後，計算試液各稀釋水平的平均菌落數，按細菌數報告規則報告細菌數。如果兩個平板在相同稀釋水平下的平均菌落數不小於15，則兩個平板的菌落數不能相差l倍以上。
細菌計數用壹般營養瓊脂培養基；用玫瑰鈉瓊脂培養基計數黴菌和酵母菌；酵母計數用酵母膏蛋白腖葡萄糖瓊脂培養基。特殊情況下，如果黴菌和酵母菌在營養瓊脂培養基上生長，細菌在玫瑰鈉瓊脂培養基上生長，應分別計數黴菌、酵母菌和細菌的菌落。然後將營養瓊脂培養基中的黴菌和酵母菌數或玫瑰鈉瓊脂培養基中的細菌數與營養瓊脂培養基中的黴菌和酵母菌數或細菌數進行比較，取菌落數高的培養基中的細菌數作為計數結果。
含蜂蜜、蜂王漿的液體制劑，在玫瑰鈉瓊脂培養基中測定黴菌數，在酵母膏蛋白腖葡萄糖瓊脂培養基中測定酵母菌數，合並計數。
細菌數量報告規則
細菌和酵母菌應選擇平均菌落數小於300cfu的稀釋等級，黴菌應選擇平均菌落數小於100cfu的稀釋等級作為細菌數報告的依據(取兩位有效數字)。通過將最高平均菌落數乘以稀釋倍數來報告1g、lml或10cm？測試樣本中包含的細菌數量。
如果每個稀釋等級的平板中沒有菌落生長，或只有最低稀釋等級的平板有菌落生長，但平均菌落數小於1，則
取含lg、lml或10cm的各濾膜的當量？將供試品溶液加入適量稀釋劑中，混勻，過濾。如果測試樣本是1g，lml還是10cm？當所含細菌數較多時，可選用合適稀釋度的試液lml進行試驗。用pH7.0的無菌氯化鈉-蛋白腖緩沖液或其他合適的沖洗溶液沖洗濾膜。沖洗方法和量與“計數法驗證”相同。洗滌後取出濾膜，將細菌表面附著於營養瓊脂培養基、玫瑰鈉瓊脂培養基或酵母膏蛋白腖葡萄糖瓊脂培養基平板上進行培養。為每種培養基準備至少壹個濾膜。
陰性對照試驗
取試驗稀釋液lml，按上述薄膜過濾法操作作為陰性對照。陰性對照不應有細菌生長。
文化和計數
培養條件和計數方法同平板法，每張濾膜上菌落數不得超過100cfu。
細菌數量報告規則
相當於1g，lml還是10cm？供試品的菌落數報告細菌數；如果濾膜上沒有菌落生長，