2.根據檢測原理和使用的儀器，目前抗生素的檢測方法可分為三大類:微生物法、免疫法和理化儀器法。
(1)微生物測定的原理是根據抗生素對微生物生理功能和代謝的抑制作用，定性或定量測定樣品中的抗菌藥物殘留。微生物法的優點是成本低，壹般實驗室都可以操作。缺點是耗時長，肉眼可以判斷顯色狀態，容易出現誤差，不能準確判斷泛紅的人，操作復雜。
(2)免疫分析技術最突出的優點是操作簡單、速度快、分析成本低。免疫分析在檢測牛奶中具有樣品量小、前處理簡單、容量大、儀器化程度低、靈敏度高等優點。這是在奶牛場和牛奶公司檢測抗生素殘留最廣泛、快速和靈敏的方法。目前，已經建立了壹些抗生素的免疫測定法，如磺胺二甲嘧啶、氯黴素、沙拉沙星、鏈黴素、四環素和莫能菌素。該方法適用於大量樣品的現場監測和篩選，具有廣闊的應用前景。但是，免疫測定法直接測定也存在樣品信息量太少、假陽性、理化分析技術選擇性低等缺點。當樣本中含有與某些抗生素結構相似的化合物時，可能會出現免疫交叉反應和假陽性結果。
(3)理化儀器最常用的分析方法是高效液相色譜和質譜。高效液相色譜法是目前廣泛使用的理化檢測方法，由於其分離速度快、效率高、自動化操作，已成為大多數抗生素殘留的常規分析方法。由於牛奶樣品中藥物殘留少，背景幹擾往往很嚴重，壹般采用柱前衍生化反應來提高紫外檢測器檢測殘留的靈敏度。目前，高效液相色譜法已被用於測定紅黴素、慶大黴素、羧芐青黴素和非那西丁的殘留量。