在容器中加入壹部分所需的水，根據培養基的配方稱取各種原料，依次加入溶解，最後補足所需的水。蛋白腖、肉醬等物質需要加熱溶解，加熱過程中蒸發的水分要等原料全部溶解後再補充水分。
配制固體培養基時，先將配制好的液體培養基煮沸，再加入稱好的瓊脂，繼續加熱至完全融化。並不斷攪拌，以免糊糊糊底。
2.調節pH值？
用pH試紙(或pH電位計或氫離子濃度比色計)檢測培養基的pH值。如不符合要求，可用10%HCl或10%NaOH調節，直至調整到配方要求的pH值。
第三步:過濾
趁熱用濾紙、紗布或棉花過濾準備好的培養基。用紗布過濾時，最好折疊成六層。用濾紙過濾時，可以將濾紙折疊成瓦邊形狀，鋪在漏鬥上過濾。
4、包裝
過濾後的培養基要分裝。如果要制作斜面培養基，必須用試管包裝。如果要制作平板培養基或液體或半固體培養基，必須將培養基裝在錐形瓶中。
包裝時，壹手松開彈簧夾使培養基流出，另壹手拿著幾個試管或錐形瓶依次取培養基。包裝時註意不要讓培養基粘在管口或瓶口，以免浸濕棉塞造成雜菌汙染。
裝入試管的培養基的量取決於試管和錐形瓶的大小和需要。壹般制作斜面培養基時，每支15×150 mm試管會盛3 ~ 4 ml左右(1/4 ~ 1/3管高)。如果制作深層培養基，每支20×220 mm試管可容納約12 ~ 65433。壹般每個錐形瓶裏裝的培養基應該是其體積的壹半。
5.加個棉塞？
重新包裝後，需要用棉塞塞住管口或瓶口。棉塞的主要作用是過濾空氣，避免汙染。棉塞要用普通的鮮幹棉，不能用脫脂棉，以免因為脫脂棉吸水而使棉塞無法使用。
制作棉條時，要根據棉條的大小，將棉條攤到合適的厚度，抓壹塊手掌大小，鋪在左手拇指和食指形成的圓孔中，右手食指插入棉條中間，左手食指和拇指同時微微握住，就形成了1長的棒狀棉條。
棉條制成後，應迅速插入管口或瓶口，棉條應緊貼內壁，不留縫隙，防止空氣中的微生物沿褶皺侵入。棉塞不能太緊或太松。在塞住棉塞後，便攜式棉塞、管和瓶子不掉落是合適的。棉塞的三分之二要在管或瓶中，上端露出壹點棉花，便於抽取。試管和裝有棉條的錐形瓶要用厚紙蓋好，用繩子系好，準備滅菌。
6.制作斜面培養基和平面培養基。
培養基滅菌後，如制作斜面培養基和平面培養基，必須在培養基未凝固時進行。
(1)制作斜面培養基。在實驗平臺上放1塊長0.5 ~ 1 m，厚1 cm的木板。試管頭放在木條上，使管內培養基自然傾斜，凝固後成為傾斜的培養基。
(2)平板培養基的制作。將滅菌後的錐形瓶和裝有培養基的培養皿放在實驗平臺上，點亮酒精燈，右手握住錐形瓶底部，左手拔下棉塞，在酒精燈上輕微灼燒瓶口，左手打開培養皿蓋子，右手快速將培養基倒入培養皿中，每皿倒入約65，438+00 ml，以蓋住皿底為度。
鋪好培養基後，靜置約15分鐘。培養基凝固後，堆疊五個培養皿，倒置，平放在培養箱中，24小時後檢查。如果培養基不生長雜菌，可以用來培養微生物。
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