1、原理:葉綠體中的色素能溶解在有機溶劑丙酮或無水乙醇中嗎?色素的提取
每種色素在層析液中的溶解度不同,隨層析液在濾紙上的擴散速率不同?色素的分離
2.步驟:
(1)色素的提取 研磨
(2)濾紙條的制備
(3)濾液細線的畫法:勻、直、細,反復多次
(4)色素的分離:濾液細線不能接觸色譜溶液
(5)觀察和記錄:從上到下依次為:橙黃色(胡蘿蔔素)、黃色(葉黃素)、藍綠色(葉綠素a)、黃綠色(葉綠素b)。
考試提示:
(1)葉片有什麽要求?為什麽要去掉葉柄和粗大的顳脈?綠色,最好是深綠色。因為葉柄和葉脈中的色素含量很少。
(2) 二氧化矽的作用是什麽?不加二氧化矽對實驗有什麽影響?
使研磨充分。不添加二氧化矽會使濾液和色素帶的顏色變淺。
(3)丙酮的作用是什麽?可以用什麽代替?能否用水代替?
溶解顏料。可以用酒精等有機溶劑代替,但不能用水代替,因為色素不溶於水。
(4) 碳酸鈣的作用是什麽?不加碳酸鈣對實驗有什麽影響?
在研磨過程中保護葉綠體中的色素不被破壞。如果不加碳酸鈣,濾液會變成黃綠色或棕色。
(5)為什麽研磨要快?為什麽要充分?過濾時為什麽要用濾布而不是濾紙?快速研磨,是為了防止丙酮的大量揮發;只有充分研磨,才能使顏料大量溶解在丙酮中。顏料不能通過濾紙,但可以通過尼龍布。
(6)為什麽濾紙條要剪掉兩個角?為了防止色譜溶液在兩邊過快擴散。
(7)為什麽不能用鋼筆或圓珠筆畫線?因為鋼筆水或圓珠筆油中含有其他顏料,會影響顏料的分離效果。
(8)為什麽濾液的細線要筆直?為什麽要多次重畫?防止顏料帶重疊;增加顏料的用量,使顏料帶顏色更深壹些。
(9) 為什麽濾液線不能接觸層析液?防止色素溶解到層析液中。
(10) 為什麽濾紙條上的色素會分離?
因為不同的顏料在層析液中的溶解度不同,它們隨層析液在濾紙條上的擴散速度也不同。
(11) 什麽色素的色素帶最寬?它在色譜溶液中的溶解度略大於哪種顏料?
最寬的色素帶是葉綠素 a,它的溶解度比葉綠素 b 稍大。
(12) 濾紙條上哪兩種色素的間距最大?胡蘿蔔素和葉黃素。
(13) 哪條色素帶最窄?為什麽?
第壹條色素帶,因為類胡蘿蔔素是葉綠體中含量最少的四種色素。
高三生物控制實驗條件的方法
1、隔離氣體:密封玻璃容器可用石蠟,隔離空氣和液體可用油膜;
排氣或充氣可根據升溫或降溫。
2、增加水中氧氣:打氣或吹風或放綠色植物;減少水中氧氣:容器密封或覆蓋油膜或涼水。
3、去除容器中的二氧化碳:NaOH溶液;增加容器中的CO2:NaHCO3溶液。
4、去除葉片中原有的澱粉:置於黑暗環境中。
5、去除葉片中的葉綠素:酒精水浴加熱。
6、沈澱或溶解物質:水溶性按溶解度,脂溶性可用丙酮或酒精。
7、去除植物光合作用對呼吸作用的幹擾:給植物遮光;
8、如何得到單色光:棱鏡分散或透明膜過濾。
9、實驗中控制溫度的方法:
①、還原糖、DNA的鑒定:沸水浴加熱。
②、酶促反應:水浴保溫。
③、用酒精溶解葉片中的葉綠素:酒精要水浴加熱。
④、細胞、組織培養和微生物培養:恒溫培養。
⑤、降溫,冷卻;升溫,加熱。
10、維持 PH:緩沖溶液(HCO3-/H2CO3、HPO43-/H2PO42-);降低加酸或生理酸性鹽,升高加堿或生理堿性鹽。
11、血液抗吸:加檸檬酸鈉(除去血液中的 Ca2+)。
12、線粒體提取:細胞勻漿離心。
13、動物細胞的處理:破裂後加水,失水的細胞中加 NaCl.註意攪拌。
14、骨無機鹽的去除:鹽酸溶液。
15、滅菌方法:培養基用高壓蒸汽滅菌;接種環用火焰灼燒滅菌;手用肥皂清洗幹凈,擦幹後用 75%酒精滅菌;實驗室或接種箱用甲醛蒸汽或紫外線燈滅菌;整個過程在實驗室無菌區或酒精燈旁進行。
16、消除葉片中赤黴酸的作用:摘除成熟的葉片;
17、消除植物本身的生長素:摘除生長旺盛的器官或組織(芽、生長點);
18、補充植物激素的方法:施用、噴灑、用含植物激素的羊毛脂霜或瓊脂作載體;
19、補充動物激素的方法:口服(餵食)、註射;
19、補充動物激素的方法:口服(餵食)、註射; 20、補充動物激素的方法:口服(餵食)、註射。