標記的標簽; ?
2 mL 螺旋蓋試管(外螺旋),內裝 MoBioBuffer 750 μL; ?
無菌采樣拭子; ?
無菌 SCF-1 溶液(50 mMTris 緩沖液 [pH 7.6]、1 mMEDTA [pH 8.0]、0.5% Tween-20),用於采樣前浸濕拭子;?
用於收集采樣管的拉鏈塑料袋;?便攜式冰盒(含冰塊)。
II.皮膚狀況研究
1.受試者排除標準如下:?
① 在過去七天中曾在面部、頸部、手臂或手部使用過局部抗生素或類固醇的受試者。(當受試者符合使用抗生素或類固醇的排除時間段時,可延遲篩查和采樣);?
② 面部、胸部、背部或肩部不得出現痤瘡;?
③ 頭皮、面部、手臂、前臂或手部出現多個水皰、膿皰、灼傷、膿腫、囊腫或潰瘍;?
④ 距取樣點 4 厘米範圍內有單個水皰、膿皰、燒傷、膿腫、感染、潰瘍、結痂、切口、裂口或粉紅色斑點/色素沈著斑或斑塊;?
⑤ 身體任何部位出現多個粉紅色斑點/紅色鱗屑斑塊/斑塊(牛皮癬或濕疹);?
⑥ 雙側手掌和/或雙腳出現均勻增厚的死皮、幹裂和過度幹燥;?
⑦ 每天使用成分不明的非處方去屑洗發水長達兩周;?
⑧皮疹擴散(出現在身體的多個部位或擴展到身體的大部分)。
2.檢測條件:?
皮膚檢查應在良好的照明條件下進行,包括局部皮膚(全身)的壹般檢查和取樣部位的詳細檢查。
3.
3.檢測附加標準:
①通過目測仔細檢查耳背皺紋(左右耳後)和兩臂肘窩(肘內側);?
② 任何單個水皰、膿皰、燒傷、膿腫、感染、潰瘍、結痂、切口、裂口或粉紅色/色素沈著斑或斑塊,且離取樣部位超過 4 厘米的可見皮損,仍被視為符合納入研究的條件。
III.樣本采集方法
說明:
①所有樣本均應采用無菌技術采集(詳見附錄)。
② 所戴無菌乳膠手套只能用於采集壹名受試者的皮膚樣本,並應註意避免汙染手套。
③ 如果用戴手套的手拉伸皮膚采樣,並接觸到采樣部位,則必須更換手套後才能進行下壹個部位的采樣。
樣本采集順序:
①耳後皺紋(耳後、左右兩側分開采集)?
②肘窩(肘內側,左右兩側分開采集)?
③鼻前孔(左右兩側可合並采集)
註意事項:?采樣過程中讓受試者舒適平躺更有利。
1. 耳後褶
耳後褶:這是從耳朵頂部與臉部相連的地方開始,壹直延伸到耳垂與臉部相連的地方。
① 使用樣本采集棉簽采集皮膚樣本,並用 SCF-1 溶液浸濕。
② 要到達該區域,用壹只手將耳朵向前折疊,露出折痕。
③ 另壹只手保持拭子的軸線與皮膚表面平行,沿著反向折痕穩定地按壓約 50 次(約 30 秒內完成 50 次擦拭)。
④ 將拭子的頭部插入收集管,從手柄上無菌切下拭子的頭部,並將蓋子旋回原位。
註意:
要獲得最佳的皮膚表面標本,采樣技術的要點是:使用濕潤的拭子、施以穩定的壓力、摩擦的壹致性(在采樣點 30 秒內往返 50 次)?
左側和右側分別取樣、標記和保存。將試管放入拉鏈自封袋中冰凍保存,並在 2 小時內送到實驗室保存。
2.肘窩(肘內側)
肘窩(肘內側):肘內側彎曲處上方手臂與前臂的交界處。
① 使用樣本采集拭子采集皮膚表面樣本,並用無菌 SCF-1 溶液浸濕。
② 用壹只手拉伸肘部皮膚,另壹只手握住拭子,使拭子軸與皮膚表面平行,沿肘前皺褶來回摩擦拭子約 50 次,施加穩定的壓力(完成 50 次摩擦約需 30 秒)。
③ 將拭子插入收集管,拭子頭部插入收集管,無菌操作下從手柄處剪斷拭子頭部,然後將蓋子旋回原位。
註意:
要想獲得最佳的皮膚表面取樣效果,取樣技術的關鍵是:使用濕潤的拭子、施加穩定的壓力和持續的摩擦(在取樣點來回摩擦 50 次,持續 30 秒)。
左右兩側分別取樣、標記和保存。將試管放入拉鏈自封袋中冰凍保存,並在 2 小時內送到實驗室保存。
3.前鼻孔
①用無菌拭子輕輕擦拭鼻孔粘膜表面,並做旋轉動作,每個鼻孔用同壹拭子擦拭同壹部位兩次。
② 左右兩側鼻孔樣本作為組合樣本進行采樣、匯集和標記。
③ 擦拭後,立即將拭子放入 750 μL 的 MoBioBuffer 中旋轉,並將拭子海綿在管壁上積聚數次,持續 20 s,以確保細菌轉移到溶液中。
樣品收集管裝入拉鏈自封袋並置於冰塊上,在約 2 小時內轉移到實驗室進行處理。
IV.附錄
無菌技術
原則:
所有樣本的采集和處理均采用無菌技術。
每項標準操作程序中收集的所有材料在購買和使用前均保證清潔無菌或確認無 菌。
無菌技術建議如下。
無菌技術操作適用於所有樣品采集 SOP。
無菌技術-準備樣品采集管
1) 無菌用品包括(但不限於)試管、吸頭、MoBiobuffer 和 SCF-1 緩沖液?
2) 如果要填充試管,MoBioBuffer 和 SCF-1 將在層流罩內分配。
無菌技術--受試者樣本采集
1. 按照當地安全委員會和/或機構政策的所有安全準則處理生物樣本。在配制血清的整個過程中必須戴手套、安全眼鏡或口罩和白大褂。采集任何生物樣本時都應遵守預防措施,包括至少戴上手套。
2.
2. 在采樣過程中親手接過樣本采集管時,應註意保持手套清潔,以避免采集管內外的交叉汙染。
3.
3.在樣本采集過程中使用幹凈的壹次性手套。
a) 采集皮膚和鼻腔樣本時,先采集四個皮膚部位的樣本,然後再采集鼻腔樣本。只要在拉伸皮膚時不接觸采樣部位,采樣員就可以用壹雙手套完成多個皮膚部位的樣本采集。壹旦接觸到采樣部位,就應更換手套,並采集下壹個皮膚樣本。
b) 研究人員可使用壹雙手套采集同壹受試者口腔內不同口腔部位的樣本。同樣,在采集同壹受試者的三個陰道樣本時,也無需更換手套。
無菌技術--樣本檢測
無菌用品包括(但不限於)試管、吸頭、所有緩沖液/試劑。