生長激素是壹種蛋白質藥物。由於蛋白質的活性不能常規測定,蛋白質空間結構的變化,特別是二硫鍵的錯配,會影響蛋白質的生物活性,從而影響蛋白質的藥效,比活度可以反映這種情況。比活性是指每毫克蛋白質所具有的生物活性單位,它是衡量重組蛋白質藥物不同於化學藥物的重要指標。比活度檢測不僅可以反映生產工藝的穩定性,還可以比較不同表達系統和不同廠家生產的同種產品的質量。比活度高,說明生產工藝更先進、純度更高、質量更好。
測定比活度的正確方法
1.去垂體大鼠體重法
這種方法是通過比較生長激素標準品(S )和受試品(T )對幼年去垂體大鼠體重增加的程度來確定受試品的效價。
標準溶液的配制 試驗當天,取標準品,用含牛血清白蛋白的 0.9%氯化鈉溶液按標示效價配制高、低濃度標準溶液。壹般來說,高濃度標準溶液配制成每升l含0.1?0.2 IU,低濃度標準溶液配制成每升l含0.025?0.0 5 IU,高、低濃度之比(r )壹般為1 : 0.2 5。 標準溶液按日分裝,密封保存於15℃,使用時熔化。
供試品溶液的配制 根據供試品的標示效價或估計效價(A t ),按標準溶液的配制和保存方法配制和保存。
檢測方法 同壹來源、同壹品系、26-28日齡、體重60-80g、性別相同、健康的大鼠,於試驗前2-3周手術摘除垂體,術後置於屏障環境中恢復。將垂體摘除 2 或 3 周後體重變化小於手術前 10%的大鼠按體重隨機分為 4 組,每組至少 8 只,並對每只大鼠進行編號和記錄體重。大鼠頸部皮下註射壹種濃度的標準溶液或試驗溶液,每天壹次,每次 0.5 毫升,連續 6 天。最後壹次註射後 2 至 4 小時,殺死大鼠並稱重。必要時,在實驗結束後進行屍體解剖,切開翼狀區目測垂體,排除有垂體殘留的大鼠。以給藥後每只動物增加的體重克數作為反應值。試驗產品和標準產品各劑量組反應的平均值應具有可比性。效價和實驗誤差按《生物測定統計方法》(通則 1431)中定量反應平行線測定法計算。
該方法的置信限(F L% )不得大於 50%。
2 .去垂體大鼠脛骨法
本方法是通過比較生長激素標準品(S )與供試品(T )之間去垂體大鼠脛骨骺板寬度的增加程度來測定供試品效價的方法。
標準溶液和供試品溶液的配制與體重法相同。
測定方法 本方法可與去垂體大鼠體重法同步進行。體重法測定結束後,取雙腿脛骨,置 10%甲醛溶液中保存,從脛骨近端頂部沿矢狀面中線切開,置 10%甲醛溶液中保存,洗 10 分鐘,置丙酮溶液中 10 分鐘、洗 3 分鐘,放入 2%硝酸銀溶液中染色 2 分鐘,洗凈後放入水中強光照射至棕黑色,放入 10%硫代硫酸鈉溶液中固定 30 秒,放入 80%乙醇溶液中,再放入 80%乙醇溶液中固定。樣品在 10%的硫代硫酸鈉溶液中固定 30 秒,然後放入 80%的乙醇溶液中進行測量。在顯微鏡下測量脛骨骺板的寬度作為反應值。根據《生物測定統計方法》(通則 1431)中定量反應平行線測量法計算數值,並計算實驗誤差。
本方法的置信限(F L% )不得大於 50%。
綜合以上呼籲,相信大多數家長已經明白了什麽是生長激素比活度,但也應該知道生長激素比活度值是通過試驗而不是計算得到的。
數據來源--《兩種不同劑型重組人生長激素體外生物活性的比較》
-1.藥物評價中心,北京 100038;
2.李占軍,中國藥品生物制品檢定所,北京 10005;
20 年前,金賽水劑多批次平均比活達到 3.87,粉針劑多批次平均比活達到 3.25,賽珍珠粉針劑平均比活達到 3.0,壹直被中國檢驗檢疫科學研究院(CIIT)選為國家生長激素粉針劑 質量標準產品,生長激素粉針劑被中國檢驗檢疫科學研究院(CIQ)選為國家質量標準產品。
最後,需要重申的是,生長激素的比活是通過檢測得到的,並不是根據說明書計算出來的。所以家長在選擇生長激素時不要盲目選擇比活性得到的,壹定要搞清楚原理。如果實在不明白,可以去醫院詢問專業醫生。