1，選擇中等配方
同壹種培養基的配方，在不同的作品中往往會有壹些差異。因此，除采用標準方法外，應嚴格按照其規定進行制備。壹般要盡可能多的收集相關信息，對比核對，然後根據自己的目的進行選擇，並記錄其來源。
2、培養基記錄的制備
每次配制培養基時，應做好記錄，包括培養基名稱、配方及其來源、各種成分的品牌、最終pH值、消毒溫度和時間、配制日期和配制人等。記錄應當復制，原始記錄應當保存備查。復制的記錄應與配制好的培養基壹起存放在野外，以防混淆。
3.稱量培養基的成分
培養基的所有成分必須準確稱量並註意防止混淆，最好壹次完成，不得中斷。配方可以放在邊上，每種成分都標在配軍上，待稱量的藥物壹次性收集放在左邊，每次稱量後移到右邊。完全稱重後，應進行檢查。
4.混合並溶解培養基的成分
培養基中使用的化學物質應該是化學純的。使用的蒸煮鍋不得為銅鍋或鐵鍋，以免微量銅或鐵混入培養基中，使細菌難以生長。加熱融化最好用不銹鋼生菜。可放入大燒杯或燒瓶中，在高壓蒸汽滅菌器或流動蒸汽滅菌器中煮熟融化。
在鍋裏溶解後，可以用溫水加熱，隨時擾動，防止結焦。如果發現結焦，培養基就不能用了，要重新配制。固體成分大部分熔化後，用小火將所有成分完全熔化，直至沸騰。對於瓊脂溶解，用另壹部分水溶解其他成分，然後將兩種溶液充分混合。在加熱和融化的過程中，蒸發損失的水分最終必須得到補充。
5.培養基pH值的初步調節
因為培養基的pH值在加熱和消毒過程中會發生變化，所以在培養基的所有成分完全溶解後，要對PH值進行初步調整。比如牛肉提取物可以降低pH0.2左右，而腸道提取物的pH會明顯升高。因此，對於這壹步，操作者要時刻註意摸索經驗，以便掌握培養基的最終PH值，保證培養基的質量。PH調節後，培養基也應煮沸幾分鐘，以促進培養基沈澱物的沈澱。
6.過濾並澄清培養基
液體培養基必須絕對澄清，瓊脂培養基應透明無明顯沈澱。因此，應采用過濾或其他澄清方法來達到這壹要求。壹般液體培養基可以用濾紙過濾，濾紙要折疊成折扇或漏鬥狀，避免濾紙因水壓不均而破裂。
瓊脂培養基可以趁熱用幹凈的白色絨布過濾。也可以用雙層紗布過濾，中間加壹層薄薄的脫脂棉。制作鮮肉、肝、血、土豆時，需要先用絨布過濾掉碎屑，再用濾紙反復過濾。如果過濾法不能滿足澄清要求，必須使用蛋清澄清法。
即把冷卻到55 ~ 60℃的培養基放入大三角瓶中，裝量不要超過燒瓶容量的1/2。每1000ml培養基中加入1~2個雞蛋蛋白，劇烈搖勻3~5分鐘，放入高壓滅菌器，121。