蛋白質分離純化的壹般程序可分為以下幾個步驟:(1)材料預處理和細胞破碎要分離純化某種蛋白質，首先要將蛋白質從組織或細胞中釋放出來，保持其原有的自然狀態，不喪失其活性。因此，應采用適當的方法破碎組織和細胞。常用的組織細胞破碎方法有:1。機械破碎法該方法利用機械力的剪切作用來破碎細胞。常用的設備有高速組織搗碎機、均質機、研缽等。2.滲透破碎法這種方法是在低滲透條件下使細胞膨脹破碎。3.反復凍融法生物組織冷凍後，胞內液凍結膨脹，導致細胞破裂。這種方法簡單方便，但需要註意的是不適用於對溫度變化敏感的蛋白質。4.超聲波法利用超聲波振動器使細胞膜上的張力不均勻，使細胞破裂。5.酶法，如用溶菌酶破壞微生物細胞。(2)蛋白質提取通常選擇合適的緩沖溶劑提取蛋白質。用於提取的緩沖液的pH、離子強度、組成和其他條件的選擇應取決於待制備的蛋白質的性質。例如用於膜蛋白的提取，表面活性劑(十二烷基磺酸鈉，tritonX-100等。)通常被添加到提取緩沖液中，以破壞膜結構並促進蛋白質從膜中分離。在提取過程中，要註意溫度，避免劇烈攪拌，防止蛋白質變性。
上一篇:雞爪去骨方法關於雞爪去骨的方法下一篇:耳鳴的治療方法是什麽？