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分離純化的方法有哪些

分離純化的方法有結晶和重結晶、蒸餾冷卻法、過濾法、升華法、萃取法、溶解法、增加法、吸收法、轉化法。

資料擴展:

分離純化是將多糖混合物分離為單壹多糖的過程。蛋白的分離純化常見方法有離子交換、分子篩、疏水層析、親和層析等。

蛋白質的分離純化:

蛋白質的分離純化是壹個用親和層析法對蛋白質分離的過程,分離方法有透析與超濾、凝膠過濾法、離子交換層析法、低溫有機溶劑沈澱法等。

根據配體特異性的分離方法-親和色譜法:

親和層析法(affinity chromatography)是分離蛋白質的壹種極為有效的方法,它經常只需經過壹步處理即可使某種待提純的蛋白質從很復雜的蛋白質混合物中分離出來,而且純度很高。這種方法是根據某些蛋白質與另壹種稱為配體(Ligand)的分子能特異而非***價地結合。

其基本原理:蛋白質在組織或細胞中是以復雜的混合物形式存在,每種類型的細胞都含有上千種不同的蛋白質,因此蛋白質的分離(Separation),提純和鑒定(Characterization)是生物化學中的重要的壹部分,至今還沒的單獨或壹套現成的方法能移把任何壹種蛋白質從復雜的混合蛋白質中提取出來,因此往往采取幾種方法聯合使用。

電泳法:

各種蛋白質在同壹pH條件下,因分子量和電荷數量不同而在電場中的遷移率不同而得以分開。值得重視的是等電聚焦電泳,這是利用壹種兩性電解質作為載體,電泳時兩性電解質形成壹個由正極到負極逐漸增加的pH梯度,當帶壹定電荷的蛋白質在其中泳動時,到達各自等電點的pH位置就停止,此法可用於分析和制備各種蛋白質。

離子交換層析法:

離子交換劑有陽離子交換劑(如:羧甲基纖維素;CM-纖維素)和陰離子交換劑(二乙氨基乙基纖維素;DEAE?FONT FACE="宋體">纖維素),當被分離的蛋白質溶液流經離子交換層析柱時,帶有與離子交換劑相反電荷的蛋白質被吸附在離子交換劑上,隨後用改變pH或離子強度辦法將吸附的蛋白質洗脫下來。

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