用途:本方法采用正交函數分光光度法測定甘草流浸膏中甘草酸的含量。
該方法適用於原料藥和制劑的分析。
方法:樣品經氧化鋁柱吸附處理，用正交函數分光光度法測定甘草提取物中甘草酸的含量。
試劑:
1.乙酸乙酯(化學純)
2.甲醇(色譜純)]
3.甲酸(化學純)
4.氧化鋁
儀器設備:WZF-800D2分光光度計。
樣品制備:
1.樣品制備
準確稱取6克甘草粉末。流浸膏，加水50毫升溶解，加乙醇稀釋至刻度，搖勻，濾過，棄去初濾液，精確量取10毫升的連續濾液，加入6滴氨試液，水浴蒸至稠膏狀，加水10毫升溶解，緩慢加入2毫升鹽酸(5-10)，置於冰水中。用5ml水洗滌容器並沈澱，離心，除去上清液，如此洗滌至上清液近無色，用乙醇加熱使沈澱溶解，過濾至50ml容量瓶中，然後用熱乙醇洗滌離心管並過濾至洗液無色，冷卻至室溫，用乙醇稀釋至刻度，混勻，準確吸取液體1ml，以氧化鋁為空白柱。以甘草酸壹銨為展開劑，在254nm紫外燈下未檢出甘草酸斑點，表明用10ml水洗脫時甘草酸沒有損失，用10ml氨水試液可將甘草酸完全洗脫。
2.甘草酸陰性對照溶液的制備
準確量取5mL樣品溶液，置於水浴上幹燥，加入0.5ml水溶解，點於矽膠GF254上。
3.測試溶液的制備
取100mg供試品於10mL容量瓶中，準確加入3 ml氯仿-乙酸乙酯-甲醇(1: 1: 1)，冷浸過夜，超聲40分鐘，離心，取上清液，氮氣吹幹，用甲醇溶解作為供試品溶液。
操作步驟:
1.標準曲線的繪制
準確吸取0.1、0.2、0.3、0.4、0.5ml標準溶液，置於10ml容量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，在選定的六個測試點測量吸光度，計算P2值，以P2為縱坐標，濃度為橫坐標，作出標準曲線，得到P2 = 6.655的回歸方程。
2.樣品的測定
準確吸取5ml上述試液，置於10ml容量瓶中，加水稀釋至刻度，空白稀釋至等量。以空白為參照，測量六個測試點的吸光度，計算P2，通過回歸方程計算甘草酸含量。
參考文獻:魏友亮，黨創世，正交函數分光光度法測定甘草提取物和甘草流浸膏中甘草酸的含量，基礎中醫雜誌，1998，12 (2): 29-30。