(1)首先要設計具有特定限制性位點的引物，通過PCR擴增含有目的基因的cDNA樣品進行基因克隆。(2)其次，雙酶消化並回收目的基因片段和克隆載體，電泳檢測，吸光度測定濃度；(3)將載體連接並轉化大腸桿菌，選擇陽性克隆；(4)第四步，提取質粒，電泳檢測，吸光度測定濃度；(5)第五，轉型。棉花細胞可以通過PEG介導法和基因槍法直接轉化。如果使用農桿菌介導的方法，需要將質粒轉化到農桿菌中並篩選陽性單克隆，然後轉化誘導的棉花愈傷組織；(6)通過抗生素抗性篩選篩選陽性細胞；(7)第七步，通過細胞和組織培養獲得陽性植株，通過PCR檢測目的基因的表達水平，收獲種子；(8)分離遺傳穩定、基因表達水平適中的純合菌株。
上一篇:請幫忙查壹下 國藥準字：Z20090180是否真的，是什麽類的藥品？謝謝下一篇:藥廠分揀員能長期幹嗎